現(xiàn)代分子生物學(xué)模塊實驗指南

前言

　　科學(xué)與技術(shù)從來都是相輔相成、互促共進的一對孿生兄弟，科學(xué)為技術(shù)的發(fā)明與提升提供理論依據(jù)，技術(shù)為科學(xué)的發(fā)現(xiàn)與研究提供方法手段。20世紀(jì)70年代建立的“遺傳工程”是Paul Bet’g和他的合作者將許多獨立的技術(shù)要素相互聯(lián)系，形成網(wǎng)絡(luò)后的一項重要的技術(shù)集成。這一技術(shù)創(chuàng)造性地實現(xiàn)了不同物種DNA分子的體外遺傳重組，不僅引發(fā)了一場分子生物學(xué)革命，而且被科學(xué)界評價為與watson和Crick發(fā)現(xiàn)DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型具有同樣的開拓性價值。Kary B．MulIis發(fā)明了DNA擴增的PCR技術(shù)，盡管它本身并未開辟分子生物學(xué)新的研究領(lǐng)域，但它卻使一些既無法實施，又無法深入的研究領(lǐng)域迅速獲得成功與突破。毫無疑問，這項簡單而又晚熟的技術(shù)發(fā)明對分子生物學(xué)研究的影響程度超過了其他任何技術(shù)，它的應(yīng)用領(lǐng)域也幾乎超過了其他任何技術(shù)?！　》肿由飳W(xué)的發(fā)展不僅得益于不同學(xué)科的相互滲透，而且在極大程度上取決于實驗技術(shù)、研究手段的不斷革新與發(fā)明?，F(xiàn)代分子生物學(xué)已從一門“觀察性”和“驗證性”的科學(xué)發(fā)展成為一門“干涉性”和“創(chuàng)造性”的科學(xué)。學(xué)生只有在學(xué)習(xí)分子生物學(xué)基本理論的同時，不斷強化分子生物學(xué)實驗技能的訓(xùn)練，才能為全面提高從事科學(xué)研究、技術(shù)發(fā)明、產(chǎn)品開發(fā)的綜合創(chuàng)新能力奠定基礎(chǔ)。　　《現(xiàn)代分子生物學(xué)模塊實驗指南》一書正是基于這一學(xué)科發(fā)展的規(guī)律和人才培養(yǎng)的理念，以形式新穎、內(nèi)容先進、圖解清晰、注重啟迪為特色，為實驗教學(xué)提供了一本圖文并茂、系統(tǒng)完整的實驗教材。作者將自己豐富的教學(xué)經(jīng)驗與豐厚的科研積累有機地結(jié)合起來，組合了一系列具有設(shè)計性、綜合性的模塊式教學(xué)實驗內(nèi)容。該書的突出特點主要體現(xiàn)在：　　1．將現(xiàn)代分子生物學(xué)的前沿研究技術(shù)與經(jīng)典的實驗技術(shù)進行有機整合，不僅使每一模塊的實驗內(nèi)容形成一個獨立的研究專題，而且強化了實驗內(nèi)容的相關(guān)性、完整性和先進性?！　?．每個實驗?zāi)K都編寫有“注意事項與建議”，不僅有助于學(xué)生對實驗原理的理解，而且有助于提高學(xué)生分析問題、解決問題的能力。　　3．全書以流程圖的方式對每一模塊實驗的基本過程進行圖文并茂的講述和邏輯嚴(yán)謹(jǐn)?shù)闹笇?dǎo)，有操作過程直觀、要點提示清晰的效果，不僅提高了課堂實驗的成功概率，而且增強了學(xué)生參與實踐教學(xué)的興趣?！　≡摃鴮ι镱悓I(yè)本科生和研究生以及相關(guān)領(lǐng)域研究人員均具有較高的參考價值，是實現(xiàn)研究型實驗教學(xué)的一本不可多得的好教材。

內(nèi)容概要

本書由10個模塊組成，分為核酸提取與分子雜交，目的基因的合成與檢測，大規(guī)?；虿町惐磉_分析，蛋白質(zhì)樣品的制備、分離與鑒定，目的蛋白質(zhì)的表達、純化與檢測，蛋白質(zhì)相互作用的研究，分子標(biāo)記技術(shù)的比較與應(yīng)用，目的基因的遺傳轉(zhuǎn)化，激光共聚焦顯微鏡的應(yīng)用，生物信息學(xué)與網(wǎng)絡(luò)應(yīng)用等內(nèi)容?！　”緯哂幸韵绿厣孩侔熏F(xiàn)代分子生物學(xué)的經(jīng)典及前沿研究技術(shù)分成若干個模塊，模塊內(nèi)的實驗相互有機聯(lián)系形成一個小的研究專題，使學(xué)生通過實驗理解研究內(nèi)容，提高學(xué)生的研究能力，達到研究型教學(xué)的目的； ②每章設(shè)有模塊的實驗?zāi)康暮湍K的實驗流程圖，使學(xué)生對實驗的目的和流程有一個系統(tǒng)的了解和掌握；③實驗方法與主要結(jié)果附圖，具有一定的示范實驗的作用；④每個模塊都設(shè)有注意事項與建議，提高了學(xué)生的實驗操作技巧與成功概率；⑤編人大量的前沿研究技術(shù)，對培養(yǎng)本科生的研究能力及研究生研究使用都很有幫助。　　本書實驗體系新穎、方法先進、技術(shù)全面，可作為生物、農(nóng)林、醫(yī)學(xué)專業(yè)本科生、研究生的分子生物學(xué)實驗教材和相關(guān)科研人員的參考書。

書籍目錄

模塊一 核酸提取與分子雜交　1—1 DNA的提取與Sotlthern雜交　1—2 RNA的提取與Northern雜交　1—3原位雜交分析模塊二 目的基因的合成及檢測　2—1 CDNA末端快速擴增法合成目的基因　2—2 目的基因的克隆　2—3 目的基因的序列分析模塊三 大規(guī)?；虿町惐磉_分析　3—1 抑制消減文庫的建立　3—2 特異基因的序列測定　3—3 序列比對與基因注釋　3—4 基因芯片分析模塊四 目的蛋白質(zhì)表達、純化與檢測　4—1 目的基因原核表達質(zhì)粒的構(gòu)建　4—2 谷胱甘肽一S一轉(zhuǎn)移酶融合蛋白的表達與純化　4—3 組氨酸標(biāo)簽融合蛋白的表達與純化　4—4 免疫印跡檢測目的蛋白質(zhì)的表達模塊五 蛋白質(zhì)樣品的制備、分離與鑒定　5—1 蛋白質(zhì)樣品的制備　5—2 蛋白質(zhì)的定量　5—3 SDS一聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白質(zhì)　5—4 雙向電泳分離蛋白質(zhì)　5—5 二維液相色譜分離蛋白質(zhì)　5—6 蛋白質(zhì)的質(zhì)譜鑒定模塊六 蛋白質(zhì)相互作用的研究　6一1 酵母雙雜交　6—2 T7噬茵體展示篩選技術(shù)　6—3 Pull—down分析蛋白質(zhì)相互作用　6—4 免疫共沉淀模塊七 分子標(biāo)記技術(shù)的比較與應(yīng)用　7—1 SSR分子標(biāo)記技術(shù)　7—2 改良AFLP分子標(biāo)記技術(shù)　7—3 相關(guān)分子標(biāo)記技術(shù)概述模塊八 目的基因的遺傳轉(zhuǎn)化　8—1 PCR法克隆目的基因全長　8—2 Gateway技術(shù)構(gòu)建表達載體　8—3 農(nóng)桿菌真空滲入法遺傳轉(zhuǎn)化　8—4 水稻愈傷組織的遺傳轉(zhuǎn)化　8—5 RNAi發(fā)夾式載體的構(gòu)建及轉(zhuǎn)化模塊九 激光掃描共聚焦顯微鏡的應(yīng)用　9—1 激光掃描共聚焦顯微鏡的基本使用　9—2 花粉管內(nèi)鈣離子梯度分布的觀察　9—3 激光掃描共聚焦顯微鏡檢測熒光蛋白模塊十 生物信息學(xué)與網(wǎng)絡(luò)應(yīng)用　10—1 基因序列分析　10—2 蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)以及相互作用預(yù)測附錄

編輯推薦

　　《現(xiàn)代分子生物學(xué)模塊實驗指南》基于學(xué)科發(fā)展的規(guī)律和人才培養(yǎng)的理念，以形式新穎、內(nèi)容先進、圖解清晰、注重啟迪為特色，為實驗教學(xué)提供了一本圖文并茂、系統(tǒng)完整的實驗教材。作者將自己豐富的教學(xué)經(jīng)驗與豐厚的科研積累有機地結(jié)合起來，組合了一系列具有設(shè)計性、綜合性的模塊式教學(xué)實驗內(nèi)容。

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