出版時間:2010-10 出版社:武漢大學(xué) 作者:張蕾//趙潔 頁數(shù):244
內(nèi)容概要
本書系統(tǒng)介紹了植物發(fā)育生物學(xué)研究的常規(guī)方法和技術(shù),重點介紹了有關(guān)分子生物學(xué)研究方法和技術(shù)。涉及植物開花、傳粉、受精、胚胎發(fā)育及植株形成等不同發(fā)育階段的細(xì)胞和分子機(jī)理。該書可供高校有關(guān)專業(yè)作教材,也可供有關(guān)研究人員參考。
書籍目錄
實驗室安全守則第一部分 植物發(fā)育相關(guān)突變體和轉(zhuǎn)基因植株的獲得及初步分析 第一節(jié) 利用化學(xué)方法獲得植物突變體及功能基因的克隆 實驗一 EMS誘變獲得植物突變體庫 實驗二 圖位克隆技術(shù) 實驗三 TILLING技術(shù) 第二節(jié) 利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的植物轉(zhuǎn)基因技術(shù) 實驗四 農(nóng)桿茵培養(yǎng)、感受態(tài)細(xì)胞準(zhǔn)備和質(zhì)粒轉(zhuǎn)化 實驗五 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的擬南芥轉(zhuǎn)基因方法 實驗六 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的煙草轉(zhuǎn)基因方法 實驗七 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的水稻轉(zhuǎn)基因方法 第三節(jié) 擬南芥T-DNA插入突變體的獲得和鑒定 實驗八 擬南芥T-DNA插入突變體庫的獲得 實驗九 擬南芥T-DNA插入突變體的篩選——植株表型分析和鑒定 實驗十 T-DNA插入位點基因的克隆和鑒定——Tail-PCR 實驗十一 T-DNA插入突變體純合體的鑒定 實驗十二 T-DNA插入突變體的互補(bǔ)實驗 第四節(jié) 多基因突變體的獲得 實驗十三 擬南芥雜交技術(shù) 第五節(jié) 目的基因RNAi及過量表達(dá)轉(zhuǎn)基因植株的獲得 實驗十四 RNAi原理及基本步驟 實驗十五 過量表達(dá)的原理及基本步驟 實驗十六 擬南芥RNAi及過量表達(dá)轉(zhuǎn)基因植株的獲得第二部分 植物發(fā)育相關(guān)突變體及轉(zhuǎn)基因植株的驗證和分析 第一節(jié) 轉(zhuǎn)基因植株DNA水平的鑒定 實驗十七 PCR方法驗證外源基因轉(zhuǎn)入植株 實驗十八 Southern雜交驗證轉(zhuǎn)基因植株中外源基因的拷貝數(shù) 第二節(jié) 轉(zhuǎn)基因植株mRNA水平的鑒定 實驗十九 Northern雜交分析基因的表達(dá) 實驗二十 RT-PCR方法分析基因的表達(dá) 實驗二十一 Real-time PCR方法分析基因的表達(dá) 實驗二十二 mRNA原位雜交技術(shù) 第三節(jié) 轉(zhuǎn)基因植株蛋白質(zhì)水平的鑒定 實驗二十三 轉(zhuǎn)基因植株蛋白質(zhì)水平的檢測(Western blot) 實驗二十四 植物組織免疫酶和免疫熒光技術(shù)第三部分 生物信息學(xué)方法及其他常用分子生物學(xué)技術(shù) 第一節(jié) 生物信息學(xué)方法 第二節(jié) 啟動子分析 實驗二十五 啟動子序列的克隆——染色體步移法 實驗二十六 啟動子和GUS融合轉(zhuǎn)基因植株的染色分析 實驗二十七 DR5::GUS融合轉(zhuǎn)基因植株的染色分析 第三節(jié) 定點突變獲得突變體的方法 實驗二十八 利用QuikChange Site-directed Mutagenesis試劑盒獲得定點突變基因 第四節(jié) 蛋白質(zhì)亞細(xì)胞定位技術(shù)——基因槍法 實驗二十九 基因槍法轉(zhuǎn)化洋蔥表皮細(xì)胞 第五節(jié) DNA和蛋白質(zhì)互作的研究方法 實驗三十 CHIP技術(shù) 第六節(jié) 蛋白質(zhì)相互作用的研究方法 實驗三十一 酵母雙雜交技術(shù) 實驗三十二 免疫共沉淀技術(shù)第四部分 植物組織培養(yǎng)技術(shù) 實驗三十三 植物培養(yǎng)基的配制 實驗三十四 煙草無茵苗的培養(yǎng) 實驗三十五 水稻種子愈傷組織的培養(yǎng)和 幼苗的再生第五部分 植物發(fā)育生物學(xué)研究中常用的細(xì)胞學(xué)方法 實驗三十六 植物組織石蠟切片技術(shù) 實驗三十七 植物組織冰凍切片技術(shù) 實驗三十八 煙草小孢子發(fā)育過程的觀察 實驗三十九 擬南芥花粉表型的分析 實驗四十 煙草大孢子發(fā)育過程的觀察 實驗四十一 擬南芥胚珠透明技術(shù)——胚胎發(fā)育過程的觀察 實驗四十二 煙草胚胎分離技術(shù)及胚胎發(fā)育過程的觀察縮寫詞參考文獻(xiàn)
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