醫(yī)學(xué)免疫學(xué)實驗教程

出版時間:2010-8  出版社:北京大學(xué)醫(yī)學(xué)出版社  作者:張曉莉,新燕,張濤 主編  頁數(shù):144  

內(nèi)容概要

  免疫學(xué)是基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)的重要學(xué)科,是現(xiàn)代生命科學(xué)的前沿學(xué)科之一,近年來發(fā)展迅猛,與其他基礎(chǔ)及臨床學(xué)科的交叉滲透越來越廣泛和深入,尤其是現(xiàn)代免疫學(xué)技術(shù)已經(jīng)滲透到生命科學(xué)研究的每一個領(lǐng)域,不論是基礎(chǔ)研究領(lǐng)域,還是臨床醫(yī)學(xué)診斷和研究,都離不開免疫學(xué)技術(shù)。因此醫(yī)學(xué)生在免疫學(xué)學(xué)習(xí)過程中,掌握一定的實驗技能,既可鞏固理論知識又可為今后的研究和實踐奠定扎實的基礎(chǔ)。
  在醫(yī)學(xué)免疫學(xué)教學(xué)環(huán)節(jié)中實驗教學(xué)具有與理論教學(xué)同等重要的作用,實驗教學(xué)工作不僅僅是培養(yǎng)學(xué)生的操作技能,還應(yīng)該側(cè)重于學(xué)生分析問題、解決問題及創(chuàng)新能力的培養(yǎng)。因此為適應(yīng)我國高等醫(yī)學(xué)教育改革和發(fā)展的需要,本著全面貫徹落實科學(xué)發(fā)展觀、培養(yǎng)符合時代要求的醫(yī)學(xué)人才的宗旨,我們五所院校在教學(xué)一線工作、具有豐富教學(xué)經(jīng)驗的教師,針對免疫學(xué)的特點、教學(xué)過程中發(fā)現(xiàn)的問題對免疫學(xué)實驗技術(shù)進行了認(rèn)真細(xì)致的甄選,編寫了這本實驗教程。
  內(nèi)容上我們摒棄了一些陳舊的、重復(fù)性的實驗內(nèi)容,新增了一些與現(xiàn)代分子醫(yī)學(xué)相關(guān)的新技術(shù)。在篇章結(jié)構(gòu)上進行了優(yōu)化和調(diào)整,力求實驗內(nèi)容系統(tǒng)和完整。全書共設(shè)五章,經(jīng)典免疫學(xué)實驗技術(shù)分列四章,主要是:抗原抗體反應(yīng)、免疫細(xì)胞檢測、免疫分子檢測、臨床免疫(超敏反應(yīng))。第五章其他免疫學(xué)技術(shù)主要介紹了綜合實驗和科研工作中常用的免疫學(xué)實驗方法。附錄主要介紹基本實驗技能:動物飼養(yǎng)、抓持、采血、處死方法;常用試劑的配制等。本書力求簡明實用,使其適合各專業(yè)層次的教學(xué)實踐需要,同時也能為醫(yī)學(xué)本科生提供

書籍目錄

第一章 經(jīng)典抗原抗體反應(yīng)
 第一節(jié) 凝集反應(yīng)
  實驗一 直接凝集試驗
  實驗二 間接凝集試驗
 第二節(jié) 沉淀反應(yīng)
  實驗一 環(huán)狀沉淀試驗
  實驗二 瓊脂擴散試驗——單向免疫擴散
  實驗三 瓊脂擴散試驗——雙向免疫擴散
  實驗四 免疫電泳技術(shù)
 第三節(jié) 補體參與的抗原抗體反應(yīng)——補體結(jié)合試驗
 第四節(jié) 免疫標(biāo)記技術(shù)
  實驗一 酶免疫技術(shù)
  實驗二 免疫熒光技術(shù)
第二章 免疫細(xì)胞及其功能檢測
 第一節(jié) 免疫細(xì)胞分離
  實驗一 人外周血細(xì)胞分離
  實驗二 淋巴組織中淋巴細(xì)胞的分離
  實驗三 淋巴細(xì)胞的分離、純化
 第二節(jié) 淋巴細(xì)胞免疫功能檢測
  實驗一 T淋巴細(xì)胞亞群的檢測
  實驗二 T淋巴細(xì)胞功能檢測
  實驗三 B淋巴細(xì)胞及其功能檢測
 第三節(jié) 非特異免疫細(xì)胞功能檢測
  實驗一 中性粒細(xì)胞吞噬功能測定(小吞噬試驗)
  實驗二 中性粒細(xì)胞活性檢測
  實驗三 中性粒細(xì)胞趨化功能測定
  實驗四 動物腹腔巨噬細(xì)胞收集
  實驗五 巨噬細(xì)胞吞噬功能測定
  實驗六 NK細(xì)胞活性測定
第三章 免疫分子檢測技術(shù)
 第一節(jié) 血清補體活性測定及相關(guān)  實驗
  實驗一 總補體活性測定(CH5n測定)
  實驗二 補體C3、C4含量測定
 第二節(jié) 細(xì)胞因子的檢測
  實驗一 白細(xì)胞介素-2(IL-2)生物學(xué)活性測定
 ……
第四章 超敏反應(yīng)
第五章 免疫學(xué)相關(guān)  實驗技術(shù)
附錄一 常用醫(yī)學(xué)免疫學(xué)儀器及使用方法
附錄二 常用醫(yī)學(xué)免疫學(xué)試劑的配制

章節(jié)摘錄

  在選擇培養(yǎng)期間,一般每2~3天換一半培養(yǎng)液?! ?.抗體的檢測檢測抗體的方法應(yīng)根據(jù)抗原的性質(zhì)、抗體的類型不同,選擇不同的篩選方法,一般以快速、簡便、特異、敏感的方法為原則?! 〕S玫姆椒ㄓ校骸 。?)放射免疫測定(RIA)可用于可溶性抗原、細(xì)胞McAb的檢測。 ?。?)酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)可用于可溶性抗原、細(xì)胞和病毒等McAb的檢測?! 。?)免疫熒光試驗適合于細(xì)胞表面抗原的McAb的檢測?! 。?)其他如間接血凝試驗、細(xì)胞毒性試驗、旋轉(zhuǎn)黏附雙層吸附試驗等。五、雜交瘤的克隆化  雜交瘤克隆化一般是指將抗體陽性孔進行克隆化。因為經(jīng)過HAT篩選后的雜交瘤克隆不能保證一個孔內(nèi)只有一個克隆。在實際工作中,可能會有數(shù)個甚至更多的克隆,可能包括抗體分泌細(xì)胞、抗體非分泌細(xì)胞、所需要的抗體(特異性抗體)分泌細(xì)胞和其他無關(guān)抗體的分泌細(xì)胞。要想將這些細(xì)胞彼此分開就需要克隆化??寺』脑瓌t是,對于檢測抗體陽性的雜交克隆盡早進行克隆化,否則抗體分泌的細(xì)胞會被抗體非分泌的細(xì)胞所抑制,因為抗體非分泌細(xì)胞的生長速度比抗體分泌的細(xì)胞生長速度快,二者競爭的結(jié)果會使抗體分泌的細(xì)胞丟失。即使克隆化過的雜交瘤細(xì)胞也需要定期再克隆,以防止雜交瘤細(xì)胞的突變或染色體丟失,從而喪失產(chǎn)生抗體的能力。

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