生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)

內(nèi)容概要

　　《研究型大學(xué)藥學(xué)實(shí)驗(yàn)系列教材：生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》共包括三部分內(nèi)容：第一篇為理論篇，講解實(shí)驗(yàn)的基本原理、常用的操作方法及注意事項(xiàng)。第二篇為實(shí)驗(yàn)篇，分為基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)、綜合性實(shí)驗(yàn)和設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)。每個(gè)實(shí)驗(yàn)都包括實(shí)驗(yàn)要求、原理、目的、操作方法及試劑配制方法。第三篇為附錄，提供常用緩沖液的配方、單位的換算等，供讀者學(xué)習(xí)參考。

書(shū)籍目錄

第一篇 理論篇
　第一章 生物大分子的制備
　　第一節(jié) 細(xì)胞的破碎與細(xì)胞器的分離
　　第二節(jié) 蛋白質(zhì)、核酸的提取、分離和純化
　　第三節(jié) 樣品的濃縮、干燥和保存
　第二章 電泳技術(shù)
　　第一節(jié) 電泳
　　第二節(jié) 聚丙烯酰胺凝膠電泳
　　第三節(jié) Western印跡術(shù)
　第三章 細(xì)胞培養(yǎng)
　　第一節(jié) 細(xì)胞培養(yǎng)基本知識(shí)
　　第二節(jié) 細(xì)胞培養(yǎng)基本技術(shù)
　　第三節(jié) 細(xì)胞培養(yǎng)常用研究方法
　第四章 分子生物學(xué)
　　第一節(jié) 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）獲取目的基因
　　第二節(jié) 外源基因與載體的連接
　　第三節(jié) 重組DNA的篩選鑒定
　　第四節(jié) 重組DNA的表達(dá)
　　第五節(jié) 表達(dá)產(chǎn)物的分離純化
第二篇　實(shí)驗(yàn)篇
　第一章 基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)
　　實(shí)驗(yàn)一 蛋白質(zhì)定性實(shí)驗(yàn)
　　實(shí)驗(yàn)二 改良Lowry比色測(cè)定法（Hartree法）定量蛋白質(zhì)
　　實(shí)驗(yàn)三 紫外分光光度法定量蛋白質(zhì)
　　實(shí)驗(yàn)四 考馬斯亮藍(lán)法（Bradford法）定量蛋白質(zhì)
　　實(shí)驗(yàn)五 肝臟谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性測(cè)定
　　實(shí)驗(yàn)六 血中葡萄糖的測(cè)定——葡萄糖氧化酶一過(guò)氧化物酶法
　　實(shí)驗(yàn)七 肝糖原的提取與鑒定
　　實(shí)驗(yàn)八 血清脂蛋白瓊脂糖電泳
　　實(shí)驗(yàn)九 血清總膽固醇測(cè)定
　　實(shí)驗(yàn)十 血清高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽同醇的測(cè)定
　　實(shí)驗(yàn)十一 醋酸纖維薄膜電泳
　　實(shí)驗(yàn)十二 不連續(xù)聚丙烯酰胺凝膠電泳
　　實(shí)驗(yàn)十三 聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS）
　　實(shí)驗(yàn)十四 等電聚焦電泳
　　實(shí)驗(yàn)十五 Western印跡術(shù)
　　實(shí)驗(yàn)十六 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）
　　實(shí)驗(yàn)十七 反轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）
　　實(shí)驗(yàn)十八 真核細(xì)胞總RNA的制備
　第二章 綜合性實(shí)驗(yàn)
　　實(shí)驗(yàn)一 乳汁過(guò)氧化物酶的提取純化與活性鑒定
　　實(shí)驗(yàn)二 動(dòng)物組織中核酸的提取、鑒定及含量測(cè)定
　　實(shí)驗(yàn)三 重組質(zhì)粒的構(gòu)建與篩選
　　實(shí)驗(yàn)四 5-氟尿嘧啶對(duì)肝癌細(xì)胞株HepG2的殺傷實(shí)驗(yàn)
　第三章 設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)
　　實(shí)驗(yàn)一 血清白蛋白的分離純化及鑒定
　　實(shí)驗(yàn)二 血漿高密度脂蛋白、低密度脂蛋白的分離及鑒定
　　實(shí)驗(yàn)三 糖尿病的發(fā)病機(jī)制與分型
　　實(shí)驗(yàn)四 乳酸脫氫酶同工酶（LDH）的測(cè)定與急性心肌梗死（AMI）的臨床鑒定
附錄 常用緩沖液配方及單位換算

章節(jié)摘錄

第一章 生物大分子的制備生物大分子在生物化學(xué)這個(gè)領(lǐng)域里主要是指蛋白質(zhì)（或酶）和核酸，它們是生命活動(dòng)的物質(zhì)基礎(chǔ)。研究這些大分子物質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能已成為探索生命奧秘的中心課題。而要研究生物大分子，首先需要提取高純度的具有生物活性的目的物質(zhì)。生物大分子的分離制備與一些傳統(tǒng)的化學(xué)制品的分離制備相比有著較大的差異：待分離的生物大分子在原料中的含量較少或極少，而且經(jīng)過(guò)繁復(fù)的分離過(guò)程更會(huì)增加它們的損耗；生物大分子在生物體內(nèi)是具有一定的生物活性的，一旦離體極易造成生物活性的喪失，所以在分離制備的時(shí)候選擇合適的條件如pH值、緩沖溶液、溫度和離子強(qiáng)度等是防止生物大分子失活的重要步驟；生物大分子種類繁多，分離制備的方法也各不相同，不同的方法得到的結(jié)果也不相同。新型的方法和儀器不斷地出現(xiàn)，為更好的分離制備提供了便利條件。在具體的實(shí)驗(yàn)中，為得到最好的分離效果，應(yīng)靈活使用各種實(shí)驗(yàn)方法。生物大分子分離制備過(guò)程主要包括：樣品預(yù)處理，包括組織和細(xì)胞的破碎以及細(xì)胞器的分離等；蛋白質(zhì)、核酸的提取、分離和純化；樣品的濃縮、干燥和保存。

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《生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》由復(fù)旦大學(xué)出版社出版。

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