出版時(shí)間:2008-10 出版社:中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社 作者:文瑩,李穎 主編 頁數(shù):156
內(nèi)容概要
本書是為適應(yīng)微生物學(xué)科發(fā)展和研究生教學(xué)需要而編寫的研究生實(shí)驗(yàn)教材,目的是使研究生在了解本學(xué)科國內(nèi)外發(fā)展動(dòng)態(tài)的同時(shí),掌握必要的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路和實(shí)驗(yàn)技能,培養(yǎng)其科研創(chuàng)新能力。 本書將微生物學(xué)基本實(shí)驗(yàn)技術(shù)和近年來發(fā)展起來的新技術(shù)、新方法有機(jī)融合,全書共分18個(gè)實(shí)驗(yàn),按實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)的形式編寫,每個(gè)實(shí)驗(yàn)分實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、?shí)驗(yàn)原理、實(shí)驗(yàn)材料、實(shí)驗(yàn)步驟和問題討論5個(gè)部分。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容全面,涉及微生物分類、微生物生理、微生物遺傳、發(fā)酵工程等多個(gè)分支領(lǐng)域;操作對(duì)象廣泛,涵蓋了細(xì)菌(包括鏈霉菌)、真菌(包括食用菌)和病毒及其相關(guān)的研究手段。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)完整并系統(tǒng)化,每個(gè)實(shí)驗(yàn)為一個(gè)獨(dú)立的操作單元,大多數(shù)實(shí)驗(yàn)需要連續(xù)幾天才能完成。 本書是中國農(nóng)業(yè)大學(xué)微生物學(xué)與免疫學(xué)系教師多年教學(xué)和科研實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的積累,具有很強(qiáng)的實(shí)用性,它既可作為微生物專業(yè)研究生的實(shí)驗(yàn)教學(xué)用書,也可供從事微生物相關(guān)研究的科研和技術(shù)人員參考。
書籍目錄
實(shí)驗(yàn)一 細(xì)菌DNA G+C摩爾百分含量的測定實(shí)驗(yàn)二 細(xì)菌DNA同源性測定實(shí)驗(yàn)三 細(xì)菌的LMw RNA指紋圖譜分析及其在分類上的應(yīng)用實(shí)驗(yàn)四 大腸桿菌質(zhì)粒的提取、轉(zhuǎn)化及重組質(zhì)粒的檢測實(shí)驗(yàn)五 鏈霉菌原生質(zhì)體的轉(zhuǎn)化及轉(zhuǎn)化子的鑒定實(shí)驗(yàn)六 絲狀真菌原生質(zhì)體制備、融合及再生實(shí)驗(yàn)七 粗糙脈孢菌基因轉(zhuǎn)化及鑒定實(shí)驗(yàn)八 粗糙脈孢菌特定基因缺失突變體的構(gòu)建實(shí)驗(yàn)九 病毒的侵染性及其分子檢測實(shí)驗(yàn)十 大腸桿菌B-半乳糖苷酶誘導(dǎo)合成、分離純化及動(dòng)力學(xué)研究實(shí)驗(yàn)十一 茶樹菇凝集素的純化實(shí)驗(yàn)十二 聚羥基烷酸的發(fā)酵和提取實(shí)驗(yàn)十三 表達(dá)外源蛋白的大腸桿菌工程菌的高密度培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)十四 利用脈沖場凝膠電泳技術(shù)檢測鏈霉菌染色體的遺傳不穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)十五 利用染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)檢測蛋白質(zhì)和DNA在體內(nèi)的相互作用實(shí)驗(yàn)十六 利用免疫共沉淀和質(zhì)譜分析確定相互作用的蛋白實(shí)驗(yàn)十七 mRNA差異顯示技術(shù)在分析真菌致病力中的應(yīng)用實(shí)驗(yàn)十八 絲狀真菌線粒體DNA的提取及差異分析
章節(jié)摘錄
實(shí)驗(yàn)一 細(xì)菌DNA G+C摩爾百分含量的測定 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹 W(xué)習(xí)采用熱變性法測定細(xì)菌DNA G+C摩爾百分含量的技術(shù)?! 《?、實(shí)驗(yàn)原理 細(xì)菌DNA G+C摩爾百分含量是細(xì)菌分類中一個(gè)能反映屬、種間親緣關(guān)系的遺傳型特征。在《伯杰氏細(xì)菌鑒定手冊(cè)》第8版中,DNA G+C摩爾百分含量測定已成為細(xì)菌屬、種的常規(guī)鑒定方法?! ∶糠N生物都有特定的DNA G+C摩爾百分含量。動(dòng)植物的DNA G+C摩爾百分含量變化范圍較小,主要集中在30%~50%,而細(xì)菌的DNA G+C摩爾百分含量變化較大,在25%~75%,說明不同的細(xì)菌類群,其G+C摩爾百分含量不同,因此,DNA G+C摩爾百分含量在細(xì)菌鑒定方面更有價(jià)值。一般認(rèn)為同種內(nèi)不同菌株的DNA G+C摩爾百分含量的差異不大于5%,而同屬不同種的差異不大于10%。如果兩個(gè)菌株的DNA G+C摩爾百分含量差別大于10%,那就表明它們的基因組(genomes)堿基序列顯著不同,它們的親緣關(guān)系較遠(yuǎn);相反,如果兩個(gè)菌株的DNA G+c摩爾百分含量相似(如≤5%),則分兩種情況:如序列順序也相似,則可能屬于同一個(gè)種;如序列順序不同,則不屬于同一個(gè)種。所以,測定DNAG+C摩爾百分含量的重要意義在于否定的作用。在細(xì)菌鑒定和分類中,必須將DNA G+C摩爾百分含量與DNA同源性、表型特征等性狀相結(jié)合來進(jìn)行分析?! NA堿基組成的測定方法有直接法和間接法兩種。直接法(又稱化學(xué)法)包括紙色譜法、高效液相色譜法等,它們可直接測定DNA。水解后各種堿基的含量。間接法(又稱物理法)是利用DNA的各種物理、化學(xué)性質(zhì)與堿基組成的相關(guān)性來測定其堿基組成,常用的方法有浮力密度法和熱變性法。
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