醫(yī)學(xué)生物化學(xué)實驗技術(shù)

內(nèi)容概要

　　《醫(yī)學(xué)生物化學(xué)實驗技術(shù)》是根據(jù)醫(yī)學(xué)生物化學(xué)教學(xué)大綱編寫的，可供臨床醫(yī)學(xué)、口腔、護理、兒科、檢驗和藥學(xué)等專業(yè)五年制及七年制本科生使用，內(nèi)容包括吸收光譜法、電泳法、層析法、酶學(xué)分析及常用分子生物學(xué)實驗技術(shù)。在介紹各項生物化學(xué)實驗技術(shù)基本理論的基礎(chǔ)上，選擇了32個有代表性的實驗供教學(xué)時選用。

書籍目錄

第一章 吸收光譜法第一節(jié) 吸收光譜第二節(jié) 光吸收的基本定律——Lamber-Beer定律第三節(jié) 分光光度計簡介第四節(jié) 吸收光譜法的應(yīng)用實驗一 血紅蛋白和氧合血紅蛋白吸收光譜的測定實驗二 血液葡萄糖測定（鄰甲苯胺法）實驗三 蛋白質(zhì)含量的測定實驗四 血清膽固醇的測定（氯化鐵法）實驗五 RNA含量的測定實驗六 DNA含量的測定實驗七 血清過氧化脂質(zhì)的測定第二章 電泳技術(shù)第一節(jié) 電泳的基本原理第二節(jié) 影響電泳速度的因素第三節(jié) 常用的電泳支持介質(zhì)第四節(jié) 電泳后的染色實驗八 血清蛋白醋酸纖維素薄膜電泳實驗九 血清脂蛋白瓊脂糖凝膠電泳實驗十 血清蛋白聚丙烯酰胺凝膠電泳實驗十一 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳測定蛋白質(zhì)的分子量實驗十二 聚丙烯酰胺梯度凝膠電泳測定蛋白質(zhì)的分子量實驗十三 等電聚焦電泳測定蛋白質(zhì)的等電點實驗十四 血清載脂蛋白B的免疫定量測定（單向火箭免疫電泳法）第三章 層析法第一節(jié) 概述第二節(jié) 吸附層析第三節(jié) 分配層析第四節(jié) 離子交換層析第五節(jié) 凝膠層析第六節(jié) 親和層析實驗十五 氨基酸的紙層析實驗十六 糖的薄層層析實驗十七 凝膠層析分離血紅蛋白與魚精蛋白實驗十八 離子交換層析分離混合氨基酸實驗十九 親和層析法分離人血漿纖溶酶原實驗二十 血漿免疫球蛋白IgG的分離提純與鑒定第四章 酶學(xué)分析第一節(jié) 酶的分離純化第二節(jié) 酶的活力測定第三節(jié) 酶促反應(yīng)動力學(xué)第四節(jié) 酶法分析第五節(jié) 同工酶第六節(jié) 酶在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用實驗二十一 血清谷-丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）活性的測定（改良Mohun法）實驗二十二 血清乳酸脫氫酶活性的測定實驗二十三 底物濃度對酶活性的影響——堿性磷酸酶Km值的測定實驗二十四 酶法測定血清膽固醇含量實驗二十五 酶法測定血液葡萄糖含量實驗二十六 血清乳酸脫氫酶同工酶測定——瓊脂糖凝膠電泳法第五章 分子生物學(xué)實驗基本技術(shù)第一節(jié) 核酸分離提取的原則第二節(jié) 核酸分離提取的基本方法第三節(jié) 核酸的鑒定第四節(jié) 限制性核酸內(nèi)切酶及其應(yīng)用實驗二十七 外周血白細胞DNA的提取（NaI法）實驗二十八 真核基因組DNA的分離純化實驗二十九 DNA的瓊脂糖凝膠電泳實驗三十 質(zhì)粒DNA的小量快速制備（堿變性裂解法）實驗三十一 質(zhì)粒DNA的限制性內(nèi)切酶消化酶解實驗三十二 真核組織RNA的制備附錄一 生物化學(xué)實驗守則附錄二 玻璃儀器的洗滌與干燥附錄三 生化實驗樣品的制備附錄四 試劑的分級、配制與保存附錄五 常用緩沖液的配制方法附錄六 易變質(zhì)及特殊試劑的保存方法附錄七 一些常見蛋白質(zhì)分子量參考值附錄八 一些常見蛋白質(zhì)等電點參考值

章節(jié)摘錄

　　一、酶的分離　　1.材料的選取　　在酶的分離過程中，首先應(yīng)該考慮的一個問題是如何選擇材料。同一種酶在不同組織細胞中的含量可能相差千倍或上萬倍，因此，如果不是對某種酶在各組織中的含量進行比較分析或是某些特殊需要，一般選擇含量豐富的材料進行提純。　　2.細胞的破碎　　常用的細胞破碎方法有：（1）絞碎、勻漿、高速組織搗碎機搗碎等；（2）對于細胞壁較厚的微生物材料，通常采用加石英砂研磨、超聲波破碎、反復(fù)凍融等方法；（3）對于細胞膜上的酶還可以采用有機溶劑處理、去垢劑處理等?！　慕M織中抽提所需要的酶往往用緩沖液抽提，這樣可以避免由于pH的突然變化而導(dǎo)致酶的失活。低溫（0～4攝氏度）操作更宜?！　《?、酶的純化　　隨著科學(xué)技術(shù)水平的不斷提高，酶的分離純化手段也不斷增加，盡管方法多樣，但大致可歸納為以下幾類：　　1.沉淀法　　常用的有鹽析法、聚乙二醇沉淀法、等電點沉淀法、有機溶劑沉淀法、熱變性沉淀法等。　　……

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