醫(yī)學(xué)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)

內(nèi)容概要

　　《醫(yī)學(xué)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)》是根據(jù)醫(yī)學(xué)生物化學(xué)教學(xué)大綱編寫的，可供臨床醫(yī)學(xué)、口腔、護(hù)理、兒科、檢驗(yàn)和藥學(xué)等專業(yè)五年制及七年制本科生使用，內(nèi)容包括吸收光譜法、電泳法、層析法、酶學(xué)分析及常用分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)。在介紹各項(xiàng)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)基本理論的基礎(chǔ)上，選擇了32個(gè)有代表性的實(shí)驗(yàn)供教學(xué)時(shí)選用。

書籍目錄

第一章 吸收光譜法第一節(jié) 吸收光譜第二節(jié) 光吸收的基本定律——Lamber-Beer定律第三節(jié) 分光光度計(jì)簡(jiǎn)介第四節(jié) 吸收光譜法的應(yīng)用實(shí)驗(yàn)一 血紅蛋白和氧合血紅蛋白吸收光譜的測(cè)定實(shí)驗(yàn)二 血液葡萄糖測(cè)定（鄰甲苯胺法）實(shí)驗(yàn)三 蛋白質(zhì)含量的測(cè)定實(shí)驗(yàn)四 血清膽固醇的測(cè)定（氯化鐵法）實(shí)驗(yàn)五 RNA含量的測(cè)定實(shí)驗(yàn)六 DNA含量的測(cè)定實(shí)驗(yàn)七 血清過(guò)氧化脂質(zhì)的測(cè)定第二章 電泳技術(shù)第一節(jié) 電泳的基本原理第二節(jié) 影響電泳速度的因素第三節(jié) 常用的電泳支持介質(zhì)第四節(jié) 電泳后的染色實(shí)驗(yàn)八 血清蛋白醋酸纖維素薄膜電泳實(shí)驗(yàn)九 血清脂蛋白瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)十 血清蛋白聚丙烯酰胺凝膠電泳實(shí)驗(yàn)十一 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳測(cè)定蛋白質(zhì)的分子量實(shí)驗(yàn)十二 聚丙烯酰胺梯度凝膠電泳測(cè)定蛋白質(zhì)的分子量實(shí)驗(yàn)十三 等電聚焦電泳測(cè)定蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)實(shí)驗(yàn)十四 血清載脂蛋白B的免疫定量測(cè)定（單向火箭免疫電泳法）第三章 層析法第一節(jié) 概述第二節(jié) 吸附層析第三節(jié) 分配層析第四節(jié) 離子交換層析第五節(jié) 凝膠層析第六節(jié) 親和層析實(shí)驗(yàn)十五 氨基酸的紙層析實(shí)驗(yàn)十六 糖的薄層層析實(shí)驗(yàn)十七 凝膠層析分離血紅蛋白與魚精蛋白實(shí)驗(yàn)十八 離子交換層析分離混合氨基酸實(shí)驗(yàn)十九 親和層析法分離人血漿纖溶酶原實(shí)驗(yàn)二十 血漿免疫球蛋白IgG的分離提純與鑒定第四章 酶學(xué)分析第一節(jié) 酶的分離純化第二節(jié) 酶的活力測(cè)定第三節(jié) 酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)第四節(jié) 酶法分析第五節(jié) 同工酶第六節(jié) 酶在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用實(shí)驗(yàn)二十一 血清谷-丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）活性的測(cè)定（改良Mohun法）實(shí)驗(yàn)二十二 血清乳酸脫氫酶活性的測(cè)定實(shí)驗(yàn)二十三 底物濃度對(duì)酶活性的影響——堿性磷酸酶Km值的測(cè)定實(shí)驗(yàn)二十四 酶法測(cè)定血清膽固醇含量實(shí)驗(yàn)二十五 酶法測(cè)定血液葡萄糖含量實(shí)驗(yàn)二十六 血清乳酸脫氫酶同工酶測(cè)定——瓊脂糖凝膠電泳法第五章 分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)基本技術(shù)第一節(jié) 核酸分離提取的原則第二節(jié) 核酸分離提取的基本方法第三節(jié) 核酸的鑒定第四節(jié) 限制性核酸內(nèi)切酶及其應(yīng)用實(shí)驗(yàn)二十七 外周血白細(xì)胞DNA的提?。∟aI法）實(shí)驗(yàn)二十八 真核基因組DNA的分離純化實(shí)驗(yàn)二十九 DNA的瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)三十 質(zhì)粒DNA的小量快速制備（堿變性裂解法）實(shí)驗(yàn)三十一 質(zhì)粒DNA的限制性內(nèi)切酶消化酶解實(shí)驗(yàn)三十二 真核組織RNA的制備附錄一 生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)守則附錄二 玻璃儀器的洗滌與干燥附錄三 生化實(shí)驗(yàn)樣品的制備附錄四 試劑的分級(jí)、配制與保存附錄五 常用緩沖液的配制方法附錄六 易變質(zhì)及特殊試劑的保存方法附錄七 一些常見(jiàn)蛋白質(zhì)分子量參考值附錄八 一些常見(jiàn)蛋白質(zhì)等電點(diǎn)參考值

章節(jié)摘錄

　　一、酶的分離　　1.材料的選取　　在酶的分離過(guò)程中，首先應(yīng)該考慮的一個(gè)問(wèn)題是如何選擇材料。同一種酶在不同組織細(xì)胞中的含量可能相差千倍或上萬(wàn)倍，因此，如果不是對(duì)某種酶在各組織中的含量進(jìn)行比較分析或是某些特殊需要，一般選擇含量豐富的材料進(jìn)行提純?！　?.細(xì)胞的破碎　　常用的細(xì)胞破碎方法有：（1）絞碎、勻漿、高速組織搗碎機(jī)搗碎等；（2）對(duì)于細(xì)胞壁較厚的微生物材料，通常采用加石英砂研磨、超聲波破碎、反復(fù)凍融等方法；（3）對(duì)于細(xì)胞膜上的酶還可以采用有機(jī)溶劑處理、去垢劑處理等。　　從組織中抽提所需要的酶往往用緩沖液抽提，這樣可以避免由于pH的突然變化而導(dǎo)致酶的失活。低溫（0～4攝氏度）操作更宜。　　二、酶的純化　　隨著科學(xué)技術(shù)水平的不斷提高，酶的分離純化手段也不斷增加，盡管方法多樣，但大致可歸納為以下幾類：　　1.沉淀法　　常用的有鹽析法、聚乙二醇沉淀法、等電點(diǎn)沉淀法、有機(jī)溶劑沉淀法、熱變性沉淀法等。　　……

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