基因工程實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)

內(nèi)容概要

為了適應(yīng)學(xué)科的發(fā)展與實(shí)際需要，本實(shí)驗(yàn)教材在第1版的基礎(chǔ)上進(jìn)行了修改和補(bǔ)充，擴(kuò)展了部分實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，增加了一些最新進(jìn)展的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，由原來的35個(gè)實(shí)驗(yàn)增加為49個(gè)實(shí)驗(yàn)，使其在內(nèi)容上更加豐富和完善。第2版的編寫除了繼續(xù)保持第1版的寫作特點(diǎn)和基本要求外，著重?cái)U(kuò)充了基因的克隆、鑒定方法以及蛋白質(zhì)化學(xué)分析的一些新技術(shù)和新發(fā)展，此外還添加了部分真核生物酵母的實(shí)驗(yàn)。書中選用了一批新的插圖、照片，以使教材內(nèi)容形象、直觀，可讀性強(qiáng)。
本教材中所有實(shí)驗(yàn)比較系統(tǒng)地介紹了與實(shí)驗(yàn)內(nèi)容相關(guān)的基本原理，強(qiáng)調(diào)指出了實(shí)驗(yàn)中的注意事項(xiàng)，并對與實(shí)驗(yàn)相關(guān)的內(nèi)容進(jìn)行評(píng)議，以利于讀者更好地理解實(shí)驗(yàn)，起到實(shí)驗(yàn)指南的作用。書末附錄部分還包含了試劑的配制等內(nèi)容，方便讀者參考。本教材可作為本科生或者研究生的基因工程實(shí)驗(yàn)教學(xué)的參考書。

書籍目錄

實(shí)驗(yàn)計(jì)劃表
導(dǎo)論
1  基因文庫的構(gòu)建
  1一l  染色體DNA的提取
  1-2  總RNA和mRNA的提取
  1-3  λ噬菌體DNA的提取
  1-4  染色體DNA的部分消化
  1-5  基因組文庫的構(gòu)建
  1-6  cDNA合成
  1-7  cDNA文庫的構(gòu)建
2  目的基因的獲得
  2-1  PCR擴(kuò)增
  2-2  核酸電泳
  2-3  目的基因片段的獲得
  2-4  核酸探針的標(biāo)記及檢測
  2-5  核酸探針篩選基因文庫
  2-6  反轉(zhuǎn)錄PCR
  2-7  RACE PCR
  2-8  反向PCR
  2-9  Sitefinding-PCR
3  載體質(zhì)粒的制備
  3-1  質(zhì)粒DNA的提取與純化
  3-2  核酸純度、濃度與相對分子質(zhì)量的測定
4  擴(kuò)增質(zhì)粒的構(gòu)建
  4-1  限制性內(nèi)切酶的酶切反應(yīng)
  4-2  凝膠電泳法進(jìn)行DNA的分離與純化
  4-3  DNA片段的體外連接
  4-4  T-A克隆
5  重組DNA導(dǎo)入宿主細(xì)胞
  5-1  感受態(tài)細(xì)胞的制備
  5-2  重組質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化
  5-3  外源基因在畢赤酵母中的轉(zhuǎn)化與整合
6  重組子的篩選與鑒定
  6-1  陽性克隆的篩選
  6-2  DNA序列測定
  6-3  序列同源性分析
  6-4  DNA印跡
  6-5  菌落原位雜交
  6-6  熒光原位雜交
7  表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建與誘導(dǎo)表達(dá)
  7-1  表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建與轉(zhuǎn)化
  7-2  RNA印跡
  7-3  外源基因的誘導(dǎo)表達(dá)
  7-4  蛋白質(zhì)濃度的測定
  7-5  SDS-PAGE
  7-6  蛋白質(zhì)印跡
8  蛋白質(zhì)樣品的分析
  8-1  等電聚焦電泳
  8-2  雙向電泳
  8-3  非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳
  8-4  酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）
  8-5  蛋白質(zhì)生物功能測定
  8-6  酶活性的測定
9  工程菌的培養(yǎng)與目的產(chǎn)物分離
  9-1  發(fā)酵條件的優(yōu)化
  9-2  包含體的復(fù)性
  9-3  誘導(dǎo)表達(dá)蛋白質(zhì)的分離沉淀
  9-4  凝膠過濾層析
  9-5  離子交換層析
  9-6  親和層析
附錄1  簡寫
附錄2  實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)
附錄3  如何撰寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告
附錄4  常用堿基、氨基酸符號(hào)及緩沖液
附錄5  大腸桿菌基因型
附錄6  培養(yǎng)基與試劑的配制
附錄7  實(shí)驗(yàn)儀器
參考文獻(xiàn)

圖書封面

評(píng)論、評(píng)分、閱讀與下載

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