生物化學(xué)技術(shù)原理及應(yīng)用

前言

盡管《生物化學(xué)技術(shù)原理及應(yīng)用》第三版從2002年7月出版以來，至今6年共印刷7次，受到很多讀者的贊同與認(rèn)可，國(guó)內(nèi)有些高校也選其作為教材或參考書，但是，相對(duì)于國(guó)內(nèi)外優(yōu)秀的同類書，它與讀者要求的內(nèi)容豐富翔實(shí)、表述通俗精練、知識(shí)融會(huì)貫通、技術(shù)與時(shí)俱進(jìn)等還有相當(dāng)差距，還需狠下工夫。如今，值第四版修訂之機(jī)，期待能以適應(yīng)生化技術(shù)快速發(fā)展趨勢(shì)的眼光，能從人們選擇與評(píng)價(jià)專業(yè)書籍刊物的角度，對(duì)前一版中的原理要點(diǎn)、名詞概念，以及文理圖表等環(huán)節(jié)進(jìn)行認(rèn)真核查補(bǔ)正、遣詞推敲，爭(zhēng)取編撰出一本更符合讀者心意、更能滿足讀者需求的教科書。第四版的編排與第三版基本相同，其修訂的重點(diǎn)主要包括：精心完善經(jīng)典方法，著力推薦現(xiàn)代技術(shù)，緊密聯(lián)系理論與實(shí)際，盡量刪除過時(shí)資料，消除矛盾、重復(fù)與罅漏。新版教材會(huì)比前一版讓讀者更易學(xué)、易懂、易行。全書仍為二十章，各章基本是由第三版原班撰稿人（見第三版前言）承擔(dān)，唯第十四章的編者黃燕屬新加盟。為方便工作，本次再版邀黃健博士任副主編。另外，何其敏博士為第七章提供了部分素材。全書由趙永芳審查、統(tǒng)編和定稿。本書在編撰過程中，參編人員都盡心竭力、幾易其稿。但限于學(xué)術(shù)水平、編寫能力以及學(xué)科特點(diǎn)等原因，書中難免有不足、欠妥和錯(cuò)漏之處。編者懇請(qǐng)讀者指正。編者對(duì)多年來一直關(guān)注本書并提出寶貴意見、建議的讀者、老師和同學(xué)表示謝意，同時(shí)感謝科學(xué)出版社及單冉東編輯的大力支持。

內(nèi)容概要

　　本書在第三版的基礎(chǔ)上，結(jié)合近年來學(xué)科進(jìn)展修訂而成。全書共分三編、二十章：第一編概述蛋白質(zhì)、核酸等生命大分子物質(zhì)的制備程序及基本要點(diǎn)；第二編講解從動(dòng)、植物和微生物材料中分離上述物質(zhì)的常見方法，如疏水層析、離子交換層析、凝膠過濾、親和層析、聚焦層析、反相高效液相色譜等；第三編介紹鑒定生命大分子物質(zhì)所涉及的相關(guān)方法，如同位素標(biāo)記（包括DNA、RNA和蛋白質(zhì)的標(biāo)記）、基因重組、DNA測(cè)序、生物芯片、細(xì)胞凋亡檢測(cè)、生物傳感器、各種電泳（包括凝膠電泳、聚焦電泳、瓊脂電泳、轉(zhuǎn)移電泳、毛細(xì)管電泳，以及多種大分子物質(zhì)電泳后所用染色液的配制等）、免疫分析（包括單克隆抗體的制備、免疫擴(kuò)散、各種免疫電泳、微球測(cè)定、固相免疫測(cè)定等）、薄層與薄膜層析和氣相色譜等。書中在闡明各類方法基本原理的同時(shí)，還講述了主要操作和應(yīng)用實(shí)例，在每章末尾附有思考題和參考文獻(xiàn)，全書共有圖、表370余幅。
　　本書適合綜合性大學(xué)及醫(yī)、農(nóng)、師范院校等相關(guān)專業(yè)本科生和研究生使用，也可供從事生物科學(xué)工作的有關(guān)人員參考。

作者簡(jiǎn)介

趙永芳，女，1940年生，教授、碩士生導(dǎo)師，1965年畢業(yè)于上海復(fù)旦大學(xué)生物化學(xué)與微生物專業(yè)，2002年前就職于武漢大學(xué)生命科學(xué)院，先后擔(dān)任生物化學(xué)教研室的實(shí)驗(yàn)室主任、教研室副主任并兼任湖北藥學(xué)會(huì)生化專業(yè)委員會(huì)主任等職務(wù)。主講過生物化學(xué)技術(shù)、免疫學(xué)、酶學(xué)、生物化學(xué)、儀器分析和相關(guān)的部分實(shí)驗(yàn)等課程。2006年3月應(yīng)聘到武漢大學(xué)東湖分校工作，擔(dān)任生物學(xué)教研室主任，從事生物化學(xué)技術(shù)的理論課和生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)課的教學(xué)工作。長(zhǎng)期以來，主要從事“應(yīng)用生物化學(xué)和微生物學(xué)”方面的教學(xué)與科研工作。主持并完成了多項(xiàng)研究工作，其中“生物活性物質(zhì)PQQ科研”課題獲得三項(xiàng)國(guó)家自然科學(xué)基金和一項(xiàng)發(fā)明專利（名稱：吡咯喹啉醌的提取方法，專利號(hào)：ZL00114639.4，證書號(hào)：第144125號(hào)）。多年來，公開發(fā)表論文50余篇，出版“生物化學(xué)技術(shù)原理及應(yīng)用”（第四版2008年6月由科學(xué)出版社（北京）出版）和醌酶原理導(dǎo)論等著作五部，其中高級(jí)生化實(shí)驗(yàn)選編曾獲得國(guó)家教委優(yōu)秀教材二等獎(jiǎng)。

書籍目錄

第四版前言
第三版前言
第一編 概述
第一章 生命大分子物質(zhì)的制備
第二編 純化方法
第二章 沉淀法
第三章 吸附層析
第四章 疏水層析
第五章 離子交換層析
第六章 凝膠過濾
第七章 親和層析
第八章 聚焦層析
第九章 高效液相色譜
第十章 固定化酶與微生物
第三編 鑒定方法
第十一章 標(biāo)記
第十二章 重組DNV
第十三章 DNA序列測(cè)定
第十四章 生物芯片
第十五章 聚合酶鏈反應(yīng)
第十六章 細(xì)胞凋亡的檢測(cè)
第十七章 生物傳感器
第十八章 電泳
第十九章 免疫分析
第二十章 氣相色譜
參考文獻(xiàn)
附錄
中英文縮寫詞

章節(jié)摘錄

插圖：第一章 生命大分子物質(zhì)的制備生命大分子物質(zhì)通常是指動(dòng)物、植物和微生物在進(jìn)行生長(zhǎng)發(fā)育、新陳代謝時(shí)，所形成的蛋白質(zhì)（包括酶）和核酸等有機(jī)化合物的總稱。它不僅是一些生物科學(xué)工作者研究、探索的主要對(duì)象，而且與廣大從事化工、醫(yī)學(xué)和食品等學(xué)科的人員也密切相關(guān)。在這些方面，特別是科研方面，隨著人類基因組的30億堿基對(duì)測(cè)序工作的完成，生命科學(xué)研究已進(jìn)入后基因組時(shí)代（研究的焦點(diǎn)將從基因的序列轉(zhuǎn)移到功能方面）。為鑒定大量未知蛋白質(zhì)（酶）的結(jié)構(gòu)和功能，蛋白質(zhì)研究也將進(jìn)入一個(gè)空前活躍的時(shí)期，因此分離純化和測(cè)試分析蛋白質(zhì)技術(shù)顯得十分重要。首先，蛋白質(zhì)與核酸（包括DNA、rRNA、mRNA和tRNA等）相比，蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)（包括一級(jí)結(jié)構(gòu)和空間結(jié)構(gòu)）更具有奇妙獨(dú)特的復(fù)雜性和藝術(shù)性。它是由20多個(gè)不同性質(zhì)（或極性）的氨基酸交互排列而成，不僅潛在的數(shù)量多（約lOO億個(gè)），而且相互間差異大。而核酸的結(jié)構(gòu)，雖然也有異乎尋常的多樣性，但是，它是由結(jié)構(gòu)相似、理化性質(zhì)接近的4個(gè)堿基交互排列，且有一定規(guī)律可循。相對(duì)而言，蛋白質(zhì)的分離、純化和鑒定有較大的難度和特殊性。而核酸的分離、制備和鑒定則比較容易，有捷徑可走。其次，蛋白質(zhì)和核酸類物質(zhì)通常是與自然界存在的諸多不同化合物結(jié)合在一起，或者是不同蛋白質(zhì)、不同核酸自身相互組合在_起出現(xiàn)的，加玄它們穩(wěn)定性較差（如離體后的多數(shù)酶）、含量相對(duì)偏低，這使提取分離過程變得更加困難、艱巨。第三，提取生命物質(zhì)的材料五花八門、千變?nèi)f化，所用的方法通用性較差，尤其是提取分離蛋白質(zhì)的方法更是如此，這也給制備工作帶來了麻煩和困惑。盡管如此錯(cuò)綜復(fù)雜，卻也不是無軌跡可尋。另外，在實(shí)踐中，確實(shí)非常需要一定純度或較高純度的生命大分子物質(zhì)；所以人們?cè)诩?xì)心觀察、認(rèn)真歸納制備這些物質(zhì)的程序時(shí)，也發(fā)現(xiàn)了不少類似操作和共同點(diǎn)，對(duì)制備生命大分子物質(zhì)很有裨益。因此，本章將以蛋白質(zhì)和核酸為主線討論其制備的共有特質(zhì)和一般過程，其中包括材料的選擇與處理、測(cè)定方法的確立、有效成分的抽提、粗品的純化和純品的鑒定（這部分移至后面的章節(jié)介紹）等相關(guān)步驟。

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