出版時間:2010-6 出版社:浙江大學出版社 作者:李鈞敏 編 頁數(shù):137
內(nèi)容概要
本書主要介紹分子生物學的基本操作技術與實驗手段,主要包括植物、動物、微生物基因組DNA的提取與鑒定,哺乳動物組織總RNA的提取與鑒定,質(zhì)粒DNA的提取與鑒定,PCR擴增,分子雜交技術,限制性內(nèi)切酶消化,分子克隆全過程和基因文庫的構建等實驗項目的原理及步驟。 本書是一本既具有一定的理論體系,又具有通用性和指導性作用的教學用書。本書主要面向高等院校,特別是應用型本科院校生物科學、生物工程等相關專業(yè)的學生及分子生物學初級研究者。
書籍目錄
第1章 分子生物學實驗室規(guī)范及注意事項 1.1 分子生物學實驗室常用儀器設備 1.2 分子生物學實驗室操作規(guī)范 1.3 分子生物學實驗注意事項第2章 常用的檢測分析方法 2.1 分光光度法 2.2 電泳 實驗1 DNA濃度與純度的紫外分光光度法分析 實驗2 DNA的瓊脂糖凝膠電泳 實驗3 DNA的聚丙烯酰胺凝膠電泳第3章 植物基因組DNA的提取及鑒定 3.1 植物基因組DNA 3.2 植物基因組DNA的提取技術 實驗4 改進SDS法提取植物基因組DNA 實驗5 CTAB法提取植物基因組DNA第4章 動物基因組DNA的提取及鑒定 4.1 動物基因組DNA 4.2 動物基因組DNA、的提取技術 實驗6 動物組織基因組DNA的提取 實驗7 血液基因組DNA的提取第5章 微生物基因組DNA的提取及鑒定 5.1 微生物基因組DNA 5.2 微生物基因組DNA的提取技術 實驗8 大腸桿菌基因組DNA的提取 實驗9 酵母基因組DNA的提取 實驗10 環(huán)境微生物基因組’DNA的提取第6章 質(zhì)粒DNA的提取及鑒定 6.1 質(zhì)粒 6.2 大腸桿菌質(zhì)粒DNA的提取技術 實驗11 堿裂解法小量制備質(zhì)粒DNA 實驗12 試劑盒抽提大腸桿菌質(zhì)粒 實驗13 質(zhì)粒DNA的大量制備第7章 哺乳動物組織總RNA的提取及鑒定 7.1 哺乳動物組織總RNA 7.2 哺乳動物組織總RNA的提取技術 7.3 總RNA提取中的關鍵問題 實驗14 哺乳動物組織總RNA的提取第8章 PCR基因擴增及檢測 8.1 PCR技術的原理 8.2 PCR技術的發(fā)展歷程 8.3 PCR技術的種類 實驗15 綠色熒光蛋白基因的PCR擴增 實驗16 乳鐵蛋白基因的PCR擴增 實驗17 查爾酮合成酶基因的PCR擴增 實驗18 逆轉錄PCR擴增第9章 分子雜交 9.1 分子雜交的原理 9.2 分子雜交的發(fā)展歷程 9.3 分子雜交的種類 實驗19 Southern雜交 實驗20 Northern雜交 實驗21 Western雜交第10章 限制性內(nèi)切酶消化 10.1 限制性內(nèi)切酶的發(fā)現(xiàn) 10.2 限制性內(nèi)切酶的命名及種類 10.3 限制性內(nèi)切酶的反應體系 10.4 限制性內(nèi)切酶酶切圖譜 實驗22 質(zhì)粒的限制性內(nèi)切酶消化 實驗23 λDNA的限制性內(nèi)切酶消化第11章 目的基因的分離純化 實驗24 乙醇沉淀法純化PCR擴增產(chǎn)物 實驗25 硅膠膜吸附法純化PCR擴增產(chǎn)物 實驗26 外源DNA的瓊脂糖凝膠電泳回收第12章 DNA的體外重組 12.1 常用的載體 12.2 外源DNA與載體的連接方法 實驗27 PCR產(chǎn)物直接克隆 實驗28 黏性末端的連接第13章 感受態(tài)細胞的制備及轉化 13.1 轉化 13.2 感受態(tài)細胞的制備方法 實驗29 大腸桿菌感受態(tài)細胞的制備及轉化 實驗30 重組DNA的藍白斑篩選第14章 外源基因的誘導表達 14.1 表達系統(tǒng) 14.2 表達載體 14.3 外源基因誘導表達的優(yōu)化 實驗31 外源基因在大腸桿菌中的誘導表達 實驗32 蛋白質(zhì)的SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳第15章 基因文庫的構建 15.1 基因文庫的構建方法 15.2 基因文庫的應用 實驗33 植物cDNA文庫的構建附錄 常用試劑母液配制表
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