細(xì)胞生物學(xué)實驗與習(xí)題指導(dǎo)

內(nèi)容概要

　　細(xì)胞生物學(xué)實驗技術(shù)在生命基礎(chǔ)理論研究及臨床醫(yī)學(xué)實踐研究中起著極其重要的作用，為適應(yīng)醫(yī)學(xué)院校（含生物專業(yè)）細(xì)胞生物學(xué)實驗教學(xué)的需要，特組織力量編寫本實驗教材，以促進(jìn)醫(yī)學(xué)院校細(xì)胞生物學(xué)實驗教學(xué)，規(guī)范實驗課程內(nèi)容?！　　都?xì)胞生物學(xué)實驗與習(xí)題指導(dǎo)》共分兩個部分：第一部分為細(xì)胞生物學(xué)實驗教材，共設(shè)15個實驗。所選擇的實驗內(nèi)容都是細(xì)胞生物學(xué)中最基本、最重要的技術(shù)或方法，涵蓋了目前各高等學(xué)校細(xì)胞生物學(xué)實驗教學(xué)中所涉及的基本實驗和核心技術(shù)。第二部分為醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)章節(jié)習(xí)題及答案，目的是幫助學(xué)生進(jìn)一步理解課堂內(nèi)容和復(fù)習(xí)所學(xué)知識，以及方便學(xué)生檢查所學(xué)內(nèi)容?！　　都?xì)胞生物學(xué)實驗與習(xí)題指導(dǎo)》主要面向高等醫(yī)學(xué)院校生物科學(xué)或生物技術(shù)專業(yè)和臨床醫(yī)學(xué)、檢驗、護(hù)理、影像、預(yù)防等本科專業(yè)細(xì)胞生物學(xué)和醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)實驗教學(xué)，以及醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)課程輔導(dǎo)，也可作為相關(guān)實驗人員的參考書。

書籍目錄

前言 緒論 一、實驗室規(guī)則 二、實驗課學(xué)生守則 三、細(xì)胞生物學(xué)實驗繪圖方法與要求 第一部分 細(xì)胞生物學(xué)實驗 實驗一 普通光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)及其使用 實驗二 特殊顯微鏡構(gòu)造及其使用 實驗三 差速離心法分離細(xì)胞器及鑒定 實驗四 細(xì)胞中DNA與RNA的顯示與觀察 實驗五 細(xì)胞活體染色與細(xì)胞器的觀察 實驗六 微管的間接免疫熒光顯示與觀察 實驗七 細(xì)胞的吞噬活動觀察 實驗八 細(xì)胞的有絲分裂與減數(shù)分裂觀察 實驗九 培養(yǎng)器皿的清洗和消毒 實驗十 細(xì)胞培養(yǎng)試劑用液的配制與消毒 實驗十一 細(xì)胞的原代培養(yǎng) 實驗十二 細(xì)胞凍存和復(fù)蘇 實驗十三 細(xì)胞傳代培養(yǎng) 實驗十四 培養(yǎng)細(xì)胞的形態(tài)觀察、計數(shù)和活力檢測 實驗十五 聚乙二醇（PEG）介導(dǎo)的細(xì)胞融合 第二部分 《醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)》章節(jié)習(xí)題及答案 第一章 緒論 參考答案 第二章 細(xì)胞概念與分子基礎(chǔ) 參考答案 第三章 細(xì)胞生物學(xué)研究方法（略） 第四章 細(xì)胞膜與物質(zhì)的跨膜轉(zhuǎn)運 參考答案 第五章 細(xì)胞的內(nèi)膜系統(tǒng)與囊泡運輸 參考答案 第六章 線粒體及細(xì)胞內(nèi)的能量轉(zhuǎn)換 參考答案 第七章 細(xì)胞骨架與細(xì)胞運動 參考答案 第八章 細(xì)胞核 參考答案 第九章 基因信息的傳遞與蛋白質(zhì)合成（略） 第十章 細(xì)胞連接與細(xì)胞黏連 參考答案 第十一章 細(xì)胞外基質(zhì)及其與細(xì)胞的相互作用（略） 第十二章 細(xì)胞的信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 參考答案 第十三章 細(xì)胞分裂與細(xì)胞周期 參考答案 第十四章 細(xì)胞分化與干細(xì)胞 參考答案 第十五章 細(xì)胞衰老與細(xì)胞死亡 參考答案 第十六章 細(xì)胞工程（略） 醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)模擬試卷 參考答案

章節(jié)摘錄

版權(quán)頁：   插圖：   （實驗步驟） 1.制備肝細(xì)胞勻漿 將饑餓24 h的小白鼠用頸椎脫位法處死，迅速開腹取肝，剪成小塊（去除結(jié)締組織）盡快置于盛有0.9%NaCl的燒杯中，反復(fù)洗滌，除去血污，用濾紙吸去表面的液體。 稱取1g肝組織（濕重）放在小平皿中，用量筒量取8mL預(yù)冷的0.25 mol／L蔗糖—0.003 mol／L CaCl2溶液，先加少量該溶液于平皿中，盡量剪碎肝組織后，再全加入。剪碎的肝組織倒人勻漿管中，使勻漿器下端浸入盛有冰塊的器皿中，左手持之，右手將勻漿搗桿垂直插入管中，上下轉(zhuǎn)動研磨3～5次，用8層紗布（先用蔗糖液濕潤）過濾勻漿于離心管中，然后制備涂片①，做好標(biāo)記，自然干燥。 2.分級分離與觀察 （1）細(xì)胞核的分離提取與觀察。將裝有濾液的離心管配平后，放入低溫離心機(jī)，以2500 rpm，離心15 min;緩緩取上清液，移人高速離心管中，放在冰塊中，待分離線粒體用；同時涂一張上清液片②，做好標(biāo)記，自然干燥；余下的沉淀物進(jìn)行下一步驟。 用6 mL蔗糖一氯化鈣溶液懸浮沉淀物，以2500 rpm離心15 min棄上清，將殘留液體用吸管吹打成懸液，滴一滴于干凈的載片上，即涂片③，自然干燥。 將涂片①②③用姬姆薩染液（Giemsa）工作液（吸出少量原液用1／15 mol／L磷酸緩沖液作10～20倍稀釋）。染色后蓋片即可觀察。 （2）線粒體的分離提取與觀察。將上述裝有上清液的高速離心管，從裝有冰塊的燒杯中取出，配平后，以17000 rpm離心20 min，棄上清，留取沉淀物。加入0.25 mol／L蔗糖—0.003 mol／L氯化鈣溶液1 mL，用吸管吹打成懸液，以17000 rpm離心20 min，將上清吸人另一試管中，留取沉淀物，加入蔗糖—氯化鈣溶液0.1 mL混勻成懸液（可用牙簽）。取上清液和沉淀懸液，分別滴一滴于干凈載玻片上（分別標(biāo)記④⑤涂片），各滴一滴0.02%詹納斯綠B染液蓋上蓋片染色20 min，用高倍鏡觀察，顆粒狀的線粒體被詹納斯綠B染成藍(lán)綠色。 （注意事項） 實驗全過程要求在O℃～4℃進(jìn)行，如果使用非冷凍控溫的離心機(jī)，一般只宜分離細(xì)胞核和線粒體，同時注意使樣品保持低溫；盡可能充分破碎組織、縮短勻漿時間。整個分離過程不宜過長。 （觀察結(jié)果） Giemsa染液染10 min，蒸餾水漂洗數(shù)秒，用濾紙吸干水，用顯微鏡（40×）檢查，細(xì)胞核呈紫紅色，混雜的胞質(zhì)為淺藍(lán)色碎片。 詹納斯綠溶液染液，10 min后用光學(xué)顯微鏡觀察，線粒體藍(lán)綠色，呈小棒狀或啞鈴狀。

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《細(xì)胞生物學(xué)實驗與習(xí)題指導(dǎo)》主要面向高等醫(yī)學(xué)院校生物科學(xué)或生物技術(shù)專業(yè)和臨床醫(yī)學(xué)、檢驗、護(hù)理、影像、預(yù)防等本科專業(yè)細(xì)胞生物學(xué)和醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)實驗教學(xué)，以及醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)課程輔導(dǎo)，也可作為相關(guān)實驗人員的參考書。

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