生物化學(xué)與分子生物學(xué)實驗技術(shù)教程

內(nèi)容概要

　　生物化學(xué)與分子生物學(xué)作為一門實驗性學(xué)科及21世紀(jì)帶頭學(xué)科，發(fā)展迅速，受到廣泛關(guān)注。本教材分為生物化學(xué)實驗基本操作、生物化學(xué)實驗原理與技術(shù)、分子生物學(xué)實驗原理與技術(shù)三大部分，共13章30個實驗課程，側(cè)重介紹了分光光度法、層析法、電泳法和離心法四大基本實驗技術(shù)，一些典型的臨床生化檢測實驗，以及與臨床相關(guān)的分子生物學(xué)實驗。其中8個系統(tǒng)、連貫的基因工程實驗，既可連成一個完整的綜合性大實驗，又可任選其中部分實驗分別教學(xué)。本課程學(xué)習(xí)，有助于學(xué)生掌握基本實驗操作技能，提高科研動手能力?！　”窘滩倪m合高等醫(yī)學(xué)院校五年制本科生和七年制√乙年制本碩連讀研究生使用。

書籍目錄

前言第一部分 生物化學(xué)實驗基本操作第一章 玻璃儀器洗滌與清潔第二章 吸量器的選擇與使用第三章 溶液的處理第四章 實驗樣品的制備附錄1 實驗操作規(guī)則第二部分 生物化學(xué)實驗原理與技術(shù)第五章 分光光度法實驗1 紫外分光光度法測定核酸與蛋白質(zhì)含量實驗2 Folin-酚試劑法測定蛋白質(zhì)含量(Lowry基本法)實驗3 血清蛋白的鹽析與定量第六章 層析法實驗4 凝膠層析分離血紅蛋白與魚精蛋白實驗5 離子交換層析分離混合氨基酸實驗6 紙層析法分析轉(zhuǎn)氨基反應(yīng)第七章 電泳法實驗7 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳分離混合蛋白質(zhì)實驗8 血清蛋白的醋酸纖維素膜電泳第八章 離心分離技術(shù)實驗9 細(xì)胞核分離和核酸、蛋白質(zhì)含量的測定第九章 蛋白質(zhì)、酶實驗10 影響酶作用的因素實驗11 堿性磷酸酶米氏常數(shù)的測定實驗12 血清蛋白的分離、純化及鑒定第十章 臨床生化實驗實驗13 飲食和激素對家兔血糖濃度的影響實驗14 飲食對家兔血漿脂蛋白影響的探討實驗15 過氧化脂質(zhì)測定實驗16 改良Mohtln法測定血清谷-丙轉(zhuǎn)氨酶活性第三部分 分子生物學(xué)實驗原理與技術(shù)第十一章 基因工程基本技術(shù)實驗17 質(zhì)粒DNA的抽提純化與鑒定實驗18 小鼠肝臟RNA的抽提純化與鑒定實驗19 逆轉(zhuǎn)錄PCR擴(kuò)增基因?qū)嶒?0 基因的酶切、連接與轉(zhuǎn)化實驗21 重組質(zhì)粒的篩選與鑒定實驗22 重組體DNA序列測定實驗23 表達(dá)載體的構(gòu)建與篩選實驗24 基因的誘導(dǎo)表達(dá)與融合蛋白的純化第十二章 基因表達(dá)與功能分析的基本方法實驗25 外源基因在真核細(xì)胞中的導(dǎo)入和表達(dá)實驗26 實時定量PCR實驗27 Western Blot檢測蛋白質(zhì)的表達(dá)及含量第十三章 臨床分子生物學(xué)實驗實驗28 頰黏膜上皮細(xì)胞基因組DNA的抽提及ACE基因多態(tài)性的檢測實驗29 PCR-RFLP分析中國人群CETP基因的多態(tài)性實驗30 基于反向點雜交的膜法檢測核酸突變參考文獻(xiàn)

章節(jié)摘錄

第一章 玻璃儀器洗滌與清潔一、玻璃儀器的洗滌與清潔生物化學(xué)實驗經(jīng)常要使用各種玻璃儀器，其清潔程度將直接影響到待測樣品的可靠性和準(zhǔn)確性。因此，玻璃儀器的清潔工作不僅是實驗室的常規(guī)工作，同時也是一項關(guān)系到實驗成敗的基本技術(shù)。經(jīng)過洗滌的玻璃儀器要求清潔透明，玻璃表面不含可溶解性物質(zhì)。水沿器皿壁自然下流時不掛水珠。玻璃器皿的清潔方法很多，根據(jù)實驗要求的清潔程度和污物的不同性質(zhì)可以選擇不同的清潔方法。1.新購置玻璃儀器的清洗新購買的儀器表面附著油污和灰塵，特別是附著有可溶解的金屬離子。因此，新購買的儀器需要用洗潔精等浸泡或刷洗，流水沖洗干凈。必要時可進(jìn)一步浸于10％Na2CO3溶液中煮沸，流水沖洗干凈后，再浸泡于1％～2％HCI溶液中過夜，流水沖洗去除殘余的酸液。最后需用蒸餾水沖洗至少3次，干燥后備用。2.使用過玻璃儀器的清洗一般的非計量用玻璃儀器或粗容量儀器，如試管、燒杯、量筒等先用洗潔精等浸泡或刷洗，再用自來水沖洗干凈，最后用蒸餾水沖洗3次后，倒置晾干。容量分析儀器，如吸量管，滴定管，容量瓶等，先用自來水沖洗后瀝干，浸泡于鉻酸洗液中數(shù)小時，然后用自來水和蒸餾水依次沖洗干凈，干燥備用。比色杯需要保證表面的光潔。用畢立即用自來水反復(fù)沖洗。如有污物附著于杯壁，需用稀鹽酸或其他適當(dāng)溶液清洗。然后依次用自來水和蒸餾水沖洗干凈。切忌用刷子、粗糙的布或濾紙等擦拭。洗凈后倒置晾干備用。

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