植物生理生化實(shí)驗(yàn)原理和技術(shù)

內(nèi)容概要

　　本書全面地介紹了植物生理生化實(shí)驗(yàn)原理及其技術(shù)。全書分為兩篇。第一篇為實(shí)驗(yàn)原理，著重介紹離心技術(shù)、層析技術(shù)、電泳技術(shù)、紅外線二氧化碳?xì)怏w分析技術(shù)、光學(xué)分析技術(shù)、氣體測(cè)壓技術(shù)、電化學(xué)分析技術(shù)、免疫化學(xué)技術(shù)。

書籍目錄

第一篇 植物生理生化實(shí)驗(yàn)原理
第一章 植物生理生化實(shí)驗(yàn)技術(shù)的一般原理
1.1 植物材料的種類
1.2 植物材料的采取
1.3 分析樣品的前處理和保存
1.4 待測(cè)組分的提取、分離和純化技術(shù)
1.5 樣品中待測(cè)組分的測(cè)定
1.6 實(shí)驗(yàn)結(jié)果的數(shù)據(jù)處理與分析
第二章 離心技術(shù)
2.1 基本原理
2.2 離心機(jī)的類型及主要構(gòu)造
2.3 常用離心技術(shù)
2.4 分析性超速離心技術(shù)的應(yīng)用
第三章 層析技術(shù)
3.1 層析原理
3.2 分配層析
3.3 吸附層析
3.4 凝膠層析
3.5 離子交換層析
3.6 親和層析
3.7 氣相色譜
3.8 高壓液相色譜
3.9 毛細(xì)管電泳色譜
3.10 層析技術(shù)的應(yīng)用實(shí)例
第四章 電泳技術(shù)
4.1 電泳基本原理
4.2 影響遷移率的主要因素
4.3 凝膠電泳
4.4 電泳的應(yīng)用
第五章 紅外線CO2 氣體分析技術(shù)
5.1 紅外線CO2 氣體分析儀的工作原理
5.2 紅外線C0 2 氣體分析儀的類型
5.3 紅外線CO2 氣體分析技術(shù)的應(yīng)用
第六章 光學(xué)分析技術(shù)
6.1 紫外光一可見(jiàn)光分光光度法
6.2 原子吸收分光光度法
6.3 火焰分光光度法
6.4 熒光分光光度法
6.5 旋光分析法
第七章 氣體測(cè)壓技術(shù)
7.1 氣體測(cè)壓技術(shù)的類型及基本原理
7.2 氣體測(cè)壓技術(shù)的應(yīng)用
第八章 電化學(xué)分析技術(shù)
8.1 電化學(xué)分析技術(shù)的類型及基本原理
8.2 電化學(xué)分析技術(shù)的應(yīng)用
8.3 DDs_1 2 A型數(shù)字式電導(dǎo)率儀的
基本原理及使用方法
第九章 免疫化學(xué)技術(shù)——酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)
9.1 ELISA的原理
9.2 設(shè)計(jì)和合成特定的免疫原
9.3 抗體的制備
9.4 標(biāo)記抗原的制備
9.5 ELISA測(cè)定程序的設(shè)計(jì)
9.6 總結(jié)
第十章 Southernblotting和PcR反應(yīng)原理與技術(shù)
10.1 Southern雜交
10.2 PCR反應(yīng)
第二篇 植物生理生化實(shí)驗(yàn)技術(shù)
實(shí)驗(yàn)1 植物組織中自由水和束縛水含量的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)2 植物組織水勢(shì)的測(cè)定
I 小液流法
Ⅱ 折光儀法
Ⅲ 壓力室法
實(shí)驗(yàn)3 植物細(xì)胞滲透勢(shì)的測(cè)定(質(zhì)壁分離法)
實(shí)驗(yàn)4 鉀離子對(duì)氣孔開(kāi)度的影響
實(shí)驗(yàn)5 植物傷流液中糖和氨基酸的鑒定
實(shí)驗(yàn)6 根系活力的測(cè)定(TTC法)
實(shí)驗(yàn)7 植物組織中金屬元素的測(cè)定(原子吸收分光光度法)
實(shí)驗(yàn)8 植物體內(nèi)硝態(tài)氮含量的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)9 植物體內(nèi)硝酸還原酶活力的測(cè)定
I 離體法
Ⅱ 活體法
實(shí)驗(yàn)10 用真空滲入法測(cè)定環(huán)境因子對(duì)光合作用的影響
實(shí)驗(yàn)11 葉綠體色素的提取、分離和理化性質(zhì)
I 提取與分離
Ⅱ 理化性質(zhì)
實(shí)驗(yàn)12 葉綠素含量的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)13 希爾反應(yīng)的觀察
實(shí)驗(yàn)14 核酮糖一15 一二磷酸羧化酶活性的測(cè)定
I 分光光度法
Ⅱ 同位素法
實(shí)驗(yàn)15 乙醇酸氧化酶活性的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)16 紅外線CO2 氣體分析儀法測(cè)定植物光合速率與呼吸速率
I 密閉系統(tǒng)斜率法
Ⅱ 密閉系統(tǒng)落差法
實(shí)驗(yàn)17 TPs一1 便攜式光合作用系統(tǒng)測(cè)定光合速率、呼吸速率和蒸騰速率
實(shí)驗(yàn)18 氧電極法測(cè)定光合速率和呼吸速率
實(shí)驗(yàn)19 葉綠體光誘導(dǎo)熒光強(qiáng)度的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)20 葉綠體中甘油醛一3 一磷酸脫氫酶活性的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)21 微量定容測(cè)壓法測(cè)定種子的呼吸速率
實(shí)驗(yàn)22 小籃子法(廣口瓶法)測(cè)定植物的呼吸速率
實(shí)驗(yàn)23 愈創(chuàng)木酚法測(cè)定過(guò)氧化物酶活性
實(shí)驗(yàn)24 過(guò)氧化氫酶活性測(cè)定
I 紫外吸收法
Ⅱ 高錳酸鉀滴定法
實(shí)驗(yàn)25 氮藍(lán)四唑(NBT)法測(cè)定超氧物歧化酶活力
實(shí)驗(yàn)26 淀粉酶活性的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)27 脲酶K值的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)28 植物過(guò)氧化物酶同工酶測(cè)定(圓盤式凝膠電泳法)
實(shí)驗(yàn)29 蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的測(cè)定(SDS一聚丙烯酰胺凝膠電泳法)
實(shí)驗(yàn)30 植物組織中蛋白質(zhì)含量的測(cè)定
I 雙縮脲法
Ⅱ Folin一酚試劑法
Ⅲ 考馬斯亮藍(lán)G一2 50 法(Bradford法)
Ⅳ 紫外吸收法
實(shí)驗(yàn)31 植物組織中總氮含量的測(cè)定——微量凱氏定氮法
實(shí)驗(yàn)32 植物組織中游離氨基酸總量的測(cè)定——茚三酮試劑顯色法
實(shí)驗(yàn)33 植物組織中糖含量的測(cè)定
I 蒽酮比色法測(cè)定可溶性糖
Ⅱ 35 一二硝基水楊酸測(cè)定還原糖
Ⅲ 苯酚法測(cè)定可溶性糖
Ⅳ 斐林試劑比色法測(cè)定還原糖
實(shí)驗(yàn)34 谷物淀粉含量的測(cè)定(旋光法)
方法I
方法Ⅱ
實(shí)驗(yàn)35 谷物種子蛋白質(zhì)組分的分析
實(shí)驗(yàn)36 植物種子生命力的快速測(cè)定
I TTC法
Ⅱ 染料染色法
Ⅲ 碘化鉀反應(yīng)法
Ⅳ 熒光法
實(shí)驗(yàn)37 花粉活力的測(cè)定
I 碘一碘化鉀(I—KI)染色測(cè)定法
Ⅱ 過(guò)氧化物酶測(cè)定法
Ⅲ 氯化三苯基四氮唑法(TTC法)
實(shí)驗(yàn)38 植物組織中纖維素含量的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)39 苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)4 植物組織中DNA的提取與測(cè)定
實(shí)驗(yàn)41 DNA的瓊脂糖凝膠電泳
實(shí)驗(yàn)42 RNA的聚丙烯酰胺凝膠電泳
實(shí)驗(yàn)43 PCR反應(yīng)
實(shí)驗(yàn)44 Sotlthemblotting
實(shí)驗(yàn)45 植物組織ATP酶活性測(cè)定
實(shí)驗(yàn)46 種子粗脂肪含量的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)47 氣相色譜法測(cè)定植物樣品膜脂中脂肪酸的含量
實(shí)驗(yàn)48 植物種子中主要不飽和脂肪酸的分離(反相紙層析法)
實(shí)驗(yàn)49 油菜籽中硫代葡萄糖苷總量的測(cè)定
I 內(nèi)源酶法
Ⅱ 葡萄糖試紙法(硫苷總量的快速測(cè)定)
實(shí)驗(yàn)50 氣相色譜法測(cè)定乙烯含量
實(shí)驗(yàn)51 酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)法(ELISA)測(cè)定植物激素含量
實(shí)驗(yàn)52 植物體內(nèi)脫落酸、赤霉素的分離和測(cè)定
實(shí)驗(yàn)53 赤霉素對(duì)a一淀粉酶的誘導(dǎo)形成
實(shí)驗(yàn)54 植物激素對(duì)愈傷組織的形成和分化的影響
實(shí)驗(yàn)55 類似生長(zhǎng)素對(duì)種子萌發(fā)的影響
實(shí)驗(yàn)56 植物春化和光周期現(xiàn)象的觀察
I 植物春化現(xiàn)象的觀察
Ⅱ 植物光周期現(xiàn)象的觀察
實(shí)驗(yàn)57 抗壞血酸(維生素c)的測(cè)定
I 滴定法
Ⅱ 比色法
實(shí)驗(yàn)58 谷類作物種子中賴氨酸含量的測(cè)定
I 茚三酮顯色法
Ⅱ 染料結(jié)合法(DBL)
實(shí)驗(yàn)59 脯氨酸含量的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)60 植物組織中丙二醛含量的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)61 植物抗逆性的鑒定(電導(dǎo)儀法)
實(shí)驗(yàn)62 綜合實(shí)驗(yàn)1 一大豆為材料
實(shí)驗(yàn)63 綜合實(shí)驗(yàn)2 一甜葉菊葉片為材料
附錄
附錄1 硫酸銨飽和度常用表
附錄2 實(shí)驗(yàn)中常用酸堿的相對(duì)密度和濃度的關(guān)系
附錄3 常用固態(tài)酸、堿、鹽的摩爾濃度配制參考表
附錄4 常用酸堿指示劑
附錄5 常用緩沖溶液的配制
主要參考文獻(xiàn)
附錄6 植物組織培養(yǎng)常用培養(yǎng)基
附錄7 常用計(jì)量單位
附錄8 常見(jiàn)的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)及其主要性質(zhì)
附錄9 植物激素與生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用

章節(jié)摘錄

版權(quán)頁(yè)：   插圖：   目前，PAGE連續(xù)體系應(yīng)用廣泛，雖然電泳過(guò)程中無(wú)濃縮效應(yīng)，但利用分子篩及電荷效應(yīng)也可以使樣品得到較好的分離，加之在溫和的pH條件下，不導(dǎo)致蛋白質(zhì)、酶、核酸等變性失活，顯示了它的優(yōu)越性，故使用得也較多。 3.分子篩效應(yīng)凝膠的三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)具有分子篩效應(yīng)，在凝膠中生物大分子的分離取決于它的凈電荷和分子大小。分子篩效應(yīng)的大小取決于凝膠孔徑大小與生物大分子大小相接近的程度。凝膠濃度不同，平均孑L徑也不同，不同大小和形狀的大分子通過(guò)孔徑時(shí)所受的阻滯力也不同，加上大分子的電荷效應(yīng)，相對(duì)分子質(zhì)量或構(gòu)型不同的蛋白質(zhì)通過(guò)一定孔徑的分離膠時(shí)所受摩擦不同，受阻滯的程度不同，因此表現(xiàn)出不同的遷移率即為分子篩效應(yīng)。當(dāng)夾在快離子和慢離子中間的蛋白質(zhì)通過(guò)濃縮膠進(jìn)入分離膠時(shí)，pH和凝膠突然改變，分離膠選用pH 8.9的Tris—HCI緩沖液，其pH與甘氨酸的pK2（9.7～9.8）相近。這就使慢離子的解離度增大，因而其有效遷移率也相應(yīng)增大，慢離子逐漸趕上并超過(guò)了所有的蛋白質(zhì)分子，隨之高電場(chǎng)強(qiáng)度不存在了，于是蛋白質(zhì)樣品就在均一的電場(chǎng)強(qiáng)度和pH條件下通過(guò)一定孑L徑的分離膠，相對(duì)分子質(zhì)量小且為球形的蛋白質(zhì)分子所受阻力小，移動(dòng)速度快，走在前面；反之，則阻力大，移動(dòng)慢，走在后面，從而通過(guò)凝膠的分子篩作用將各種蛋白質(zhì)分成各自的區(qū)帶。即使蛋白質(zhì)分子的凈電荷相似（即自由遷移率相等），也會(huì)因分子篩效應(yīng)在分離膠中被分開(kāi)。 4.3.1.6 聚丙烯酰胺凝膠電泳的操作 1.制備凝膠把含有一定濃度的Acr和Bis與引發(fā)劑的電泳膠緩沖液抽真空，同時(shí)將電泳槽下槽底部加1％瓊脂封口，如果是圓盤電泳，則是把一端用玻璃棒將橡膠管塞住的玻璃管垂直放著，再向抽真空的溶液中加入加速劑，即可把分離膠溶液加入管子內(nèi)或兩玻璃板之間，高度為2／3左右，用注射器小心地在膠液的表面上蓋上一層水，使膠有一個(gè)水平的表面，并與空氣隔絕，有利于凝膠的聚合。凝膠形成后，可看到一個(gè)清晰的界面，用濾紙吸去覆蓋的水層，在分離膠上加濃縮膠后，插進(jìn)梳子，待膠凝固后再拔出梳子。 垂直板電泳制膠法：將電泳槽下槽底部加1％瓊脂封口，將配制好的凝膠溶液注入到兩塊垂直放置的玻璃板之間而聚膠，高度為2／3左右，用注射器小心地在膠液的表面蓋一層水，使膠有一個(gè)水平的表面并與空氣隔絕，有利于凝膠的聚合。凝膠形成后，即可看到清晰的界面，用濾紙吸去覆蓋的水層，在分離膠上加濃縮膠后，插進(jìn)梳子，待膠凝固后再拔出梳子。

編輯推薦

《普通高等教育"十一五"國(guó)家級(jí)規(guī)劃教材:植物生理生化實(shí)驗(yàn)原理和技術(shù)(第2版)》以高等農(nóng)林院校植物生產(chǎn)類各專業(yè)的本科生為對(duì)象，也可供綜合性大學(xué)、師范院校及其他從事植物生理生化實(shí)驗(yàn)技術(shù)相關(guān)工作的師生、科技人員參考。

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