微生物學實驗教程

前言

本書首版自復旦大學出版社于1993年正式出版至今，已有10余年。這是一本凝聚我專業(yè)數(shù)代教師40余年來教學經(jīng)驗的總結，具有歷史悠久、內(nèi)容豐富、特色鮮明、定位明確和易教易學等優(yōu)點。該書出版后，受到全國同行的歡迎和廣泛選用，至今還經(jīng)常收到求購和要求再版的信件。由于學科的發(fā)展及我校新一代教師的成長，10余年來，我們在教學和科學研究中又累積了不少新內(nèi)容和新經(jīng)驗，從而為本書第2版的出版提供了良好的物質(zhì)基礎和精神準備；同時，由于理論課教材《微生物學教程》（第2版）在全國同行中被廣泛選用和獲得較好反響，也為這本配套實驗教材的出版提出了要求和創(chuàng)造了有利條件。本教材共安排了104個實驗，包括76個基礎實驗和28個任選實驗，內(nèi)容比第1版豐富得多。其中有不少實驗是我們通過原創(chuàng)或革新等措施而成，形成了一批設計巧妙、條件簡單、易于掌握和便于推廣的特色實驗，如四大類微生物菌落的識別、真菌單孢子分離、乳酸茵和雙歧桿菌的簡便快速計數(shù)法、厭氧茵的針筒培養(yǎng)法、根霉的假根觀察、用側臂試管測定細菌的生長曲線，以及改良的霉菌栽片培養(yǎng)、劃線分離技術和芽孢染色法等。通過講解和學習這類自創(chuàng)實驗。不僅可活躍教學氣氛和提高學習效果，還可激發(fā)同學創(chuàng)新欲望和培養(yǎng)他們的創(chuàng)新能力。本書是一份集體創(chuàng)作。編寫過程中，得到我院副院長喬守怡教授的關心和支持，并受到高等教育出版社領導的大力支持和吳雪梅副編審的具體指導。在此，謹對他們表示由衷的感謝。最后，歡迎全國同行和新老讀者隨時對本書提出寶貴的意見和建議，以臻逐步完善和提高。

內(nèi)容概要

本書是作者總結了復旦大學微生物學課程50余年的教學經(jīng)驗編寫而成。共安排實驗104個，其中包括76個基礎實驗和28個任選實驗，既重視對基本操作的全面訓練，又關注到對學生研究能力、綜合能力和實驗興趣的培養(yǎng)。　　內(nèi)容涵蓋了顯微鏡技術，各類微生物的形態(tài)觀察，培養(yǎng)基配制，消毒與滅菌，生長繁殖的測定，菌種的分離、培養(yǎng)、鑒定和保藏，厭氧菌培養(yǎng)，遺傳與變異，病毒與免疫基本技術，以及與食品、發(fā)酵、環(huán)境、土壤和殺蟲菌等有關的應用微生物學實驗。其中有不少內(nèi)容為作者獨創(chuàng)或改進，可操作性強，富有特色?！　∪珪哂袃?nèi)容豐富、取材新穎、體系科學、特色鮮明和易教易學等優(yōu)點。可用作綜合性大學、師范院校和其他高校的生物科學、生物技術、環(huán)境科學以及食品、發(fā)酵和農(nóng)林等專業(yè)的微生物學實驗教材。

書籍目錄

實驗須知實驗常用器皿一覽表第一部分　基礎　　實驗　第一周　環(huán)境微生物的檢測和菌落識別　　實驗1-1-1　環(huán)境中微生物的檢測　　實驗1-1-2　斜面接種與培養(yǎng)　　實驗1-1-3　三點接種與培養(yǎng)　　實驗1-1-4　四大類微生物菌落形態(tài)的識別　第二周　細菌染色法和光學顯微鏡的使用　　實驗1-2-1　普通光學顯微鏡的使用　　實驗1-2-2　細菌的涂片及簡單染色法　　實驗1-2-3　革蘭氏染色法（經(jīng)典法）　　實驗1-2-4　革蘭氏染色法（三步法）　　實驗1-2-5　顯微測微尺的使用　第三周　細菌的芽孢、莢膜染色法　　實驗1-3-1　芽孢染色法　　實驗1-3-2　莢膜染色法　　實驗1-3-3　相差顯微鏡的使用　第四周　鞭毛染色法和細菌運動的觀察　　實驗1-4-1　鞭毛染色法　　實驗1-4-2　穿刺接種法和細菌運動力的觀察　　實驗1-4-3　用懸滴法觀察細菌的運動　　實驗1-4-4　用暗視野顯微鏡觀察細菌的運動　第五周　放線菌和真菌的培養(yǎng)與形態(tài)觀察　　實驗1-5-1　放線菌的插片、搭片培養(yǎng)和形態(tài)觀察　　實驗1-5-2　放線菌的玻璃紙培養(yǎng)和形態(tài)觀察　　實驗1-5-3　真菌的載片培養(yǎng)和形態(tài)觀察　　第六周　真菌若干特殊構造的觀察　　實驗1-6-1　根霉孢子囊和假根的觀察　　實驗1-6-2　根霉接合孢子囊的形成和觀察　　實驗1-6-3　酵母菌子囊孢子的形成和觀察　　實驗1-6-4　藍色犁頭霉接合孢子囊的形成和觀察　　實驗1-6-5　霉菌子囊殼、子囊和子囊孢子的觀察　第七周　培養(yǎng)基的配制、分裝和滅菌　　實驗1-7-1　通用培養(yǎng)基的配制　　實驗1-7-2　鑒別性培養(yǎng)基的配制　　實驗1-7-3　選擇性培養(yǎng)基的配制　　實驗1-7-4　加壓蒸汽滅菌法　　實驗1-7-5　培養(yǎng)皿的干熱滅菌法　　實驗1-7-6　過濾除菌技術　第八周　微生物生長量的測定和生長曲線的繪制　　實驗1-8-1　細菌的液體接種法和培養(yǎng)特征的觀察　　實驗1-8-2　細菌生長曲線的測定　　實驗1-8-3　用干重比色法測定微生物的生長量　第九周　微生物的顯微鏡直接計數(shù)法　　實驗1-9-1　酵母菌和霉菌孢子的直接計數(shù)法　　實驗1-9-2　細菌細胞的直接計數(shù)法　第十周　微生物的間接計數(shù)法　　實驗1-10-1　平板菌落計數(shù)法　　實驗1-10-2　乳酸菌和雙歧桿菌的簡便快速計數(shù)法　　實驗1-10-3　用MPN法測定活性污泥中的硝化細菌數(shù)　第十一周　微生物的純種分離法　　實驗1-11-1　用平板劃線法分離菌種　　實驗1-11-2　用澆注平板法和涂布平板法分離菌種　　實驗1-11-3　真菌的單孢子分離法　　實驗1-11-4　真菌的菌絲尖端切割分離法　第十二周　檢測噬菌體的基本　　實驗技術　　實驗1-12-1　大腸埃希氏菌噬菌體的分離和純化　　實驗1-12-2　噬菌體效價的測定　　實驗1-12-3　溶源性細菌的檢測和鑒定　第十三周　厭氧菌的培養(yǎng)技術　　實驗1-13-1　厭氧罐技術　　實驗1-13-2　用厭氧袋法分離培養(yǎng)丙酮丁醇梭菌　　實驗1-13-3　針筒厭氧培養(yǎng)法　第十四周　微生物的遺傳變異　　實驗　　實驗1-14-1　紫外線對細菌的誘變作用　　實驗1-14-2　紫外線對枯草芽孢桿菌產(chǎn)生淀粉酶的誘變效應　　實驗1-14-3　用梯度平板法篩選大腸埃希氏菌抗藥性突變株　　實驗1-14-4　大腸埃希氏菌營養(yǎng)缺陷型突變株的篩選　　實驗1-14-5　艾姆斯（Ames）試驗法　　實驗1-14-6　細菌原生質(zhì)體的制備和融合　　實驗1-14-7　酵母菌原生質(zhì)體的制備和融合　第十五周　物理、化學因素對微生物生長的影響　　實驗1-15-1　溫度、pH和滲透壓對微生物生長的影響　　實驗1-15-2　紫外線的殺菌作用　　實驗1-15-3　微波的殺菌作用　　實驗1-15-4　消毒劑和殺菌劑最低抑制濃度（M1C）的測定　　實驗1-15-5　用杯碟法測定抗生素的效價　　第十六周　菌種的保藏原理與方法　　實驗1-16-1　常用的簡易保藏法　　實驗1-16-2　甘油保藏法　　實驗1-16-3　干燥保藏法　　實驗1-16-4　冷凍真空干燥保藏法　　實驗1-16-5　液氮超低溫保藏法　第十七周　細菌鑒定中的常規(guī)和微量快速生理生化反應　　實驗1-17-1　若干常規(guī)生理生化反應　　實驗1-17-2　鑒定細菌的微量、快速生化試驗　　實驗1-17-3　應用AP1-20E細菌鑒定系鑒定腸桿菌科和部分其他革蘭氏陰性桿菌　　實驗1-17-4　應用SWF（A）細菌鑒定系統(tǒng)鑒定發(fā)酵性革蘭氏陰性桿菌　第十八周　血清學反應和巨噬細胞功能的測定　　實驗1-18-1　免疫血清的制備　　實驗1-18-2　凝集反應　　實驗1-18-3　環(huán)狀沉淀試驗　　實驗1-18-4　用鱟試劑法測定細菌內(nèi)毒素　　實驗1-18-5　雙向瓊脂擴散沉淀反應　　實驗1-18-6　火箭免疫電泳　　實驗1-18-7　巨噬細胞吞噬功能的測定　第二部分　任選實驗　實驗Ⅱ-1　利用選擇性培養(yǎng)基分離固氮菌、酵母菌和土壤真菌．　實驗Ⅱ-2　酸奶的制作和其中乳酸菌的分離　實驗Ⅱ-3　泡菜的制作和其中乳酸菌的分離　實驗Ⅱ-4　甜酒釀的制作及酒藥中根霉的分離　實驗Ⅱ-5　拮抗性放線菌的篩選法　實驗Ⅱ-6　用瓊脂塊法篩選抗生菌　實驗Ⅱ-7　殺蟲細菌——蘇云金芽孢桿菌的分離　實驗Ⅱ-8　殺蟲真菌——白僵菌的分離　實驗Ⅱ-9　酚降解細菌的分離、純化和篩選　實驗Ⅱ-10　用亨蓋特滾管技術分離嚴格厭氧菌　實驗Ⅱ-11　食用菌菌種的分離和制種技7R　實驗Ⅱ-12　植物病毒的接種、培養(yǎng)和定量測定　實驗Ⅱ-13　TMV的免疫血清制備和效價測定　實驗Ⅱ-14　動物病毒的雞胚接種、培養(yǎng)和病毒滴度測定　實驗Ⅱ-15　家蠶質(zhì)型多角體病毒的培養(yǎng)和分離提純　實驗Ⅱ-16　微生物細胞的固定化及其應用　實驗Ⅱ-17　水中細菌總數(shù)的測定　實驗Ⅱ-18　水中大腸菌群的檢測　實驗Ⅱ-19　五日生化需氧量（BOD5）的測定　實驗Ⅱ-20　微生物傳感器法測定BOD值　實驗Ⅱ-21　極端嗜鹽菌甘油二醚類衍生物的測定　實驗Ⅱ-22　細菌DNA中（G+C）mol％的測定　實驗Ⅱ-23　質(zhì)粒DNA轉化酵母細胞　實驗Ⅱ-24　酵母原生質(zhì)體的DNA轉化　實驗Ⅱ-25　非中斷雜交與基因定位　實驗Ⅱ-26　大腸埃希氏菌A噬菌體的高頻轉導　實驗Ⅱ-27　大腸埃希氏菌口一半乳糖苷酶的誘導合成及其調(diào)控　實驗Ⅱ-28　臺式自控發(fā)酵罐的原理、構造和使用附錄　一、若干微生物的學名及其發(fā)音　二、酸堿指示劑的配制　三、常用培養(yǎng)基成分　四、染色液和試劑的配制　五、蒸汽壓力與溫度的關系　六、培養(yǎng)基容積與加壓滅菌所需時間　七、緩沖液的配制表　八、常用消毒劑表　九、市售濃酸和氨水的相對密度和實際濃度　十、相對密度與糖度換算表　十一、常用干燥劑　十二、十進制倍數(shù)和分數(shù)的詞冠表（國際制）　十三、常用的計量單位　十四、洗液的配制　十五、標準篩孔對照表　十六、部分國家的菌種保藏機構名稱和網(wǎng)址信息　

章節(jié)摘錄

插圖：鑒別性培養(yǎng)基是一類在成分中加有能與目的菌的無色代謝產(chǎn)物發(fā)生顯色反應的指示劑，從而達到只需用肉眼辨別顏色就能方便地從近似菌落中找出目的菌菌落的培養(yǎng)基。其一如伊紅一美藍瓊脂，在其配方中含有乳糖、伊紅和美藍，用以鑒別腸道病原菌及其他雜菌。其中伊紅、美藍作指示劑，伊紅系酸性染料，當大腸埃希氏菌或產(chǎn)氣腸桿菌分解乳糖產(chǎn)酸時，由于細菌帶正電荷，所以被伊紅著色。在大腸埃希氏菌中因為伊紅與美藍結合，使菌落不呈紅色，而是藍紫黑色，且具有綠色金屬光澤；菌落呈棕色者為產(chǎn)氣腸桿菌；不分解乳糖的腸道病原菌則不著色，有時因產(chǎn)生堿性物質(zhì)較多，細菌帶負電荷，被美藍著色后，菌落并不呈藍色，因美藍與伊紅結合，所以菌落為淡紫色。其二如乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基，可用于食品衛(wèi)生中大腸菌群的檢測。該培養(yǎng)基內(nèi)含膽鹽5g/L，能抑制大部分非腸道細菌的生長，而不能抑制大腸菌群的生長。大腸菌群發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，引起pH變化，溴甲酚紫溶液顏色發(fā)生變化（由紫色變成黃色），以此來初步判斷大腸菌群的存在。其三如亞硫酸鉍瓊脂（Bs）常用于分離傷寒和副傷寒沙門氏菌，在此培養(yǎng)基配方中含有葡萄糖、亞硫酸鈉、檸檬酸鉍銨和煌綠，它們既是抑菌劑，又是指示劑。煌綠、亞硫酸鉍能抑制革蘭氏陽性菌和大腸埃希氏菌的生長。兩種抑菌劑對傷寒和副傷寒沙門氏菌均無影響，而且由于傷寒沙門氏菌能發(fā)酵葡萄糖，可將亞硫酸鉍還原成硫酸鉍，形成黑色菌落，其周圍有黑色環(huán)，對光觀察可見有金屬光澤，以此達到鑒別的目的。需注意的是，因為糖類經(jīng)高溫滅菌后會發(fā)生不同程度的水解，因此應避免高壓高溫滅菌，可采用降低壓力、溫度或用阿諾氏蒸汽鍋滅菌；有條件的話，還可用過濾除菌方法滅菌，或將糖類單獨滅菌后，再加到培養(yǎng)基中，以免因糖類被水解而影響使用效果。

編輯推薦

《微生物學實驗教程(第2版)》是普通高等教育“十一五”國家級規(guī)劃教材之一。

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