生物化學實驗

內容概要

　　本書在第三版多年使用的基礎上進行了修訂，增加了生物化學和分子生物學方面的一些新方法、新技術，特別是根據實驗教學需要增加了6個綜合實驗。全書共100多個實驗，內容設置與鄭集和陳鈞輝教授編著的《普通生物化學》第四版教材一致，包括糖、脂、蛋白質、核酸、酶、維生素、激素、物質代謝與生物氧化以及為培養(yǎng)學生應用和創(chuàng)新能力的綜合實驗，適合作為本科教學的同步教材。本書可操作性強，內容全面，可供不同學校、不同專業(yè)根據具體條件選用。
《生物化學實驗(第4版)》可作為高等院校生命科學、醫(yī)藥衛(wèi)生相關專業(yè)實驗教材，也可供有關教師和科研人員參考使用。

書籍目錄

第四版前言
第三版前言
第一章　糖類
  實驗 1　糖的顏色反應
  實驗 2　糖的還原作用
  實驗 3　血糖的定量測定（Folin-Wu法）
  實驗 4　血糖的定量測定（Folin-Malmros法）
  實驗 5　血糖的定量測定（葡萄糖氧化酶法）
  實驗 6　血液中葡萄糖的測定（鄰甲苯胺法）
  實驗 7　葡萄糖含量測定（苯酚法）
  實驗 8　蒽酮比色定糖法
  實驗 9　植物組織中可溶性總糖的測定（蒽酮比色法）
  實驗 10　總糖和還原糖的測定（3，5-二硝基水楊酸法）
  實驗 11　多糖的試驗
  實驗 12　肝素鈉的定量測定
  實驗 13　糖的旋光性和變旋現象
第二章　脂類
  實驗 14　脂肪的組成
  實驗 15　卵磷脂的提取和鑒定
  實驗 16　粗脂肪含量的測定（Soxhlet抽提法）
  實驗 17　碘價的測定（Hanus法）
  實驗 18　皂化價的測定
  實驗 19　脂肪酸價的測定
  實驗 20　脂肪乙酰價的測定
  實驗 21　血清膽固醇的定量測定（磷硫鐵法）
  實驗 22　血清總膽固醇的測定（鄰苯二甲醛法）
  實驗 23　血清膽固醇的定量測定（醋酸酐法）
  實驗 24　血清甘油三酯簡易測定法
  實驗 25　血清甘油三酯的測定（GPO-PAP法）
  實驗 26　丙二醛（MDA）的測定
第三章　蛋白質
  實驗 27　蛋白質的顏色反應
  實驗 28　蛋白質的沉淀反應
  實驗 29　蛋白質濃度測定（微量凱氏定氮法）
  實驗 30　蛋白質濃度測定（雙縮脲法）
  實驗 31　蛋白質濃度測定（Folin-酚試劑法）
  實驗 32　蛋白質濃度測定（紫外光吸收法）
  實驗 33　蛋白質濃度測定（考馬斯亮藍結合法）
  實驗 34　非蛋白氮（NPN）的測定
  實驗 35　甲醛滴定法
  實驗 36　DNP氨基酸的制備和鑒定
  實驗 37　DNS氨基酸的制備和鑒定
  實驗 38　用DNS法鑒定蛋白質或多肽的N端氨基酸
  實驗 39　用DNS法測定多肽的氨基酸組成
  實驗 40　肽的序列分析（PTH法）
  實驗 41　甲硫氨酰甘氨酸二肽的合成
  實驗 42　尿素對蛋白質的變性作用
  實驗 43　氨基酸紙層析法
  實驗 44　氨基酸微晶纖維素薄板層析法
  實驗 45　離子交換柱層析法分離氨基酸
  實驗 46　血清白蛋白的分離與純化
  實驗 47　凝膠層析法分離純化蛋白質
  實驗 48　DEAE-Sephadex A-25分離純化多肽
  實驗 49　親和層析法分離純化單克隆抗體
  實驗 50　醋酸纖維薄膜電泳法分離血清蛋白質
  實驗 51　血清糖蛋白醋酸纖維薄膜電泳
  實驗 52　牛乳中酪蛋白和乳糖的制備與鑒定
  實驗 53　聚丙烯酰胺凝膠圓盤電泳法分離血清蛋白質
  實驗 54　聚丙烯酰胺凝膠垂直平板電泳法鑒定胰島素
  實驗 55　SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法測定蛋白質的相對分子質量
  實驗 56　用等電聚焦電泳法測定蛋白質等電點
  實驗 57　對流免疫電泳法測定胎兒甲種蛋白質
  實驗 58　火箭免疫電泳法
  實驗 59　Western印跡
  實驗 60　酶聯免疫吸附測定（ELISA）
第四章　核酸
  實驗 61　核酸的定量測定（定磷法）
  實驗 62　酵母RNA的提取
  實驗 63　RNA的定量測定（苔黑酚法）
  實驗 64　動物肝臟中DNA的提取
  實驗 65　DNA的定量測定（二苯胺法）
  實驗 66　5′核苷酸的定量測定（過碘酸氧化法）
  實驗 67　DEAE纖維素薄板層析法測定核苷酸
  實驗 68　腺苷三磷酸的定量測定（紙電泳法）
  實驗 69　核酸的酶法降解以及葡聚糖凝膠層析法制備5′單核苷酸
  實驗 70　質粒DNA的提取
  實驗 71　DNA瓊脂糖凝膠電泳
第五章　酶
  實驗 72　過氧化氫酶的作用
  實驗 73　過氧化物酶的作用
  實驗 74　細胞色素氧化酶的作用
  實驗 75　乳酸脫氫酶及其輔酶的作用
  實驗 76　影響酶促反應的因素——溫度、pH、激活劑及抑制劑
  實驗 77　胰蛋白酶米氏常數的測定
  實驗 78　膽堿酯酶米氏常數的測定
  實驗 79　過氧化氫酶米氏常數的測定
  實驗 80　用正交法測定幾種因素對酶活力的影響
  實驗 81　溶菌酶的提純結晶和活力測定
  實驗 82　豬胰糜蛋白酶的制備和純度鑒定
  實驗 83　大腸桿菌堿性磷酸酶的制備
  實驗 84　堿性磷酸酶的提取和分離及比活力測定
  實驗 85　瓊脂糖凝膠電泳法分離乳酸脫氫酶同工酶
  實驗 86　聚丙烯酰胺凝膠電泳法分離乳酸脫氫酶同工酶
  實驗 87　肝臟谷丙轉氨酶活力測定
  實驗 88　血清谷丙轉氨酶活力測定
  實驗 89　固定化5′-磷酸二酯酶的制備及其在分離核苷酸中的應用
第六章　維生素
  實驗 90　維生素A的定性測定
  實驗 91　維生素B1的定性測定
  實驗 92　維生素C的定量測定（2，6-二氯酚靛酚滴定法）
  實驗 93　維生素C的定量測定（磷鉬酸法）
  實驗 94　核黃素（維生素B2）熒光光度定量測定法
  實驗 95　熒光法測定核黃素結合蛋白核黃素的解離常數
第七章　激素
  實驗 96　尿中17-羥皮質類固醇的測定（Porter-Silber法）
第八章　物質代謝與生物氧化
  實驗 97　肌糖原的酵解作用
  實驗 98　脂肪酸的β-氧化
  實驗 99　華氏（Warburg）呼吸儀瓶常數的測定
  實驗 100　L-谷氨酸的酶促脫羧作用（測壓法測定L-谷氨酸）
  實驗 101　發(fā)酵過程中無機磷的被利用和ATP的生成（ATP的生物合成）
第九章　綜合實驗 
  實驗 102　酵母醇脫氫酶的提純及其性質的研究
  實驗 103　α-淀粉酶的分離純化、鑒定和Km、Vmax的測定
  實驗 104　螺旋藻藻藍蛋白的分離、純化與鑒定
  實驗 105　原花色素的提取、純化與測定
  實驗 106　熊果酸的制備和測定
  實驗 107　鎳化合物誘導人Jurkat細胞凋亡途徑的研究
附錄
  一、生物化學實驗 須知
  二、玻璃儀器的洗滌及一些常用的洗滌劑
  三、移液器的使用
  四、吸管的使用
  五、過濾和離心
  六、722型分光光度計的使用
  七、930型熒光光度計的使用
  八、UV-9100型紫外可見分光光度計的使用
  九、實驗 室常用酸堿的比重和濃度
  十、常用酸堿指示劑
  十一、緩沖液的配制
  十二、恒沸鹽酸的制備
  十三、大腸桿菌丙酮粉的制備
  十四、生物化學中某些重要化合物的Mr及pK值
  十五、氨基酸的一些物理常數
  十七、化學元素的相對原子質量表
  十八、離心機轉速（r/min）與相對離心力（RCF）的換算
  十九、硫酸銨飽和度的常用表
  二十、常用離子交換劑
  二十一、常用凝膠過濾層析介質
  二十二、汞的密度

章節(jié)摘錄

版權頁：插圖：實驗107 鎳化合物誘導人Jurkat細胞凋亡途徑的研究近年來，由于鎳在工業(yè)中大量應用及消耗，造成環(huán)境中鎳及其化合物的污染呈逐年遞增趨勢，其生物學毒性及致病性已經引起廣泛關注。鎳及其化合物對人體最嚴重的危害是造成惡性腫瘤的發(fā)生，并明顯增加多種其他腫瘤的發(fā)病機率。鎳及其化合物對免疫系統也具有明顯的毒性。研究鎳化合物的免疫毒性不僅可以發(fā)現鎳化合物對免疫系統毒性的具體途徑，也可以從免疫監(jiān)控作用的抑制與惡性腫瘤發(fā)生的相關機制入手，尋找鎳化合物的致癌的新思路。凋亡是指生物體為了維持內環(huán)境穩(wěn)定，由基因控制的細胞自主、有序的死亡，又稱為程序性細胞死亡，是細胞增殖調控的一種重要手段。凋亡涉及一系列基因的激活、表達以及調控過程，是細胞對環(huán)境中一些生理性或病理性刺激信號、損傷產生的應答，其細胞及組織的變化與壞死有明顯的不同。凋亡過程如果失去調控，將造成嚴重的后果，導致疾病發(fā)生，如癌癥、神經系統惡化和自身免疫疾病。氯化鎳對人工細胞瘤Jurakt細胞株具有明顯的細胞毒作用。已有的體外試驗數據表明，氯化鎳可能是通過凋亡途徑抑制Jurkat細胞的增殖。因此，本實驗進一步探討氯化鎳對Jurkat細胞株毒性的分子機制.證實凋亡過程的發(fā)生以及研究凋亡過程中重要的調控蛋白質的作用。

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