分子生物學(xué)實驗手冊

內(nèi)容概要

馬文麗主編的本書較為系統(tǒng)地介紹了分子生物學(xué)實驗室的基本要求，闡述了分子生物學(xué)實驗常用技術(shù)的實驗原理、流程、操作步驟、注意事項、可能出現(xiàn)的常見問題及其處理。隨書附贈光盤，演示了各實驗的操作步驟，以幫助讀者更直觀地學(xué)習(xí)。本書適合從事生命科學(xué)，特別是分子生物學(xué)相關(guān)領(lǐng)域初入實驗室的研究人員、技術(shù)人員及學(xué)生等閱讀參考。

書籍目錄

第一部分  基本操作
  第1章  分子生物學(xué)實驗室的基本要求
    第一節(jié)  實驗室規(guī)則
    第二節(jié)  實驗室安全
    第三節(jié)  實驗室物品與儀器的管理
  第2章  儀器操作、實驗用水與溶液配制
    第一節(jié)  實驗儀器操作
    第二節(jié)  實驗用水
    第三節(jié)  溶液的配制
  第3章  大腸桿菌培養(yǎng)的基本操作
    第一節(jié)  培養(yǎng)前準備
    第二節(jié)  大腸桿菌培養(yǎng)及測定方法
    第三節(jié)  大腸桿菌菌株保存
  第4章  電泳基本操作
    第一節(jié)  基本原理
    第二節(jié)  瓊脂糖凝膠電泳
    第三節(jié)  聚丙烯酰胺凝膠電泳
    第四節(jié)  雙向瓊脂糖凝膠電泳
  第5章  生物信息學(xué)基本分析方法
    第一節(jié)  核酸信息分析
    第二節(jié)  蛋白質(zhì)信息分析
第二部分  核酸實驗
  第6章  核酸的分離純化和定量
    第一節(jié)  質(zhì)粒DNA的提取與純化
    第二節(jié)  基因組DNA的提取
    第三節(jié)  RNA的提取
    第四節(jié)  核酸的定量
  第7章  聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)
    第一節(jié)  PCR實驗流程
    第二節(jié)  普通PCR
    第三節(jié)  RT-PCR反應(yīng)
    第四節(jié)  熒光定量PCR
  第8章  基因克隆
    第一節(jié)  載體的選擇
    第二節(jié)  載體與目的基因的酶切和產(chǎn)物回收
    第三節(jié)  連接反應(yīng)
    第四節(jié)  基因的轉(zhuǎn)移
    第五節(jié)  陽性重組子的鑒定
  第9章  核酸分子雜交
    第一節(jié)  核酸探針的制備
    第二節(jié)  斑點雜交
    第三節(jié)  Southern雜交
    第四節(jié)  Northern印跡雜交
    第五節(jié)  基因芯片技術(shù)
  第10章  核酸序列測定
    第一節(jié)  雙脫氧測序法
    第二節(jié)  焦磷酸測序法
第三部分  蛋白質(zhì)實驗
  第11章  蛋白質(zhì)的提取與純化
    第一節(jié)  蛋白質(zhì)提取的基本原則
    第二節(jié)  蛋白質(zhì)的提取
    第三節(jié)  基因工程表達蛋白的純化
  第12章  蛋白質(zhì)的定量檢測
    第一節(jié)  Lowry法測定蛋白質(zhì)含量
    第二節(jié)  BCA法測定蛋白質(zhì)含量
    第三節(jié)  Bradford法測定蛋白質(zhì)含量
  第13章  目標蛋白質(zhì)的測定
    第一節(jié)  蛋白質(zhì)SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳
    第二節(jié)  蛋白質(zhì)免疫印跡法
附錄
  附錄A  溶液配制
  附錄B  常用核酸和蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量標準物
  附錄C  常用限制性內(nèi)切核酸酶數(shù)據(jù)
  附錄D  核酸蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換
參考文獻

章節(jié)摘錄

　?。ㄒ唬┎Ａ髅蟆　?.試管試管常用于顏色實驗、小容量的反應(yīng)、裝培養(yǎng)基等。試管可經(jīng)加熱滅菌，試管帽或棉塞密封可保持無菌狀態(tài)?！　?.燒杯用于盛液、加熱、溶解和配試劑，常與容量瓶配合使用。使用時切勿用手接觸其內(nèi)壁，溶解或混勻試劑時可用玻璃棒攪拌助溶或助勻。燒杯內(nèi)試劑傾入容量瓶時，注意多次沖洗燒杯，一并傾入容量瓶內(nèi)。燒杯壁上常有體積刻度，但不準確，只能粗略使用?！　?.錐形瓶錐形瓶用于儲存溶液，其底部較寬故穩(wěn)定性好，瓶口較小可減少蒸發(fā)且易于密封。有的錐形瓶側(cè)壁上也有體積刻度，但常不準確。　　4.試劑瓶試劑瓶具有螺口或圓形玻璃塞，可安全、無菌存放溶液，防止溶液蒸發(fā)或氧化、被污染?！　∷袃Υ嬉憾紤?yīng)清楚地標記，包括相應(yīng)的危險性信息（最好用橙色、黃色危險警告標簽標記）。容器的密封方法要合適，如用塞子或封口膠密封。為防止試劑降解，溶液應(yīng)存放在冰箱中，但使用前要恢復(fù)到室溫。含有有機成分的溶液容易滋生微生物（除非溶液有毒或已經(jīng)滅菌），因此久存的溶液做出的實驗結(jié)果不可能可靠?！　?.滴管正確使用滴管，保持滴管垂直，以中指和環(huán)指（無名指）夾住管柱，拇指和示指（食指）輕輕擠壓膠頭，使液體逐滴滴下?！　∈褂玫喂芪∮卸救芤簳r要小心：松開膠頭之前一定要將管尖移離溶液，吸入的空氣可防止液體溢散。為了避免交叉污染，不要將溶液吸入膠頭或?qū)⒌喂軝M放。一次性塑料滴管使用安全，可避免污染?！　?.量筒量筒是實驗中常用的度量液體的量器，用于不太精密的液體計量，用容量表示。根據(jù)需要選用不同容量規(guī)格的量筒。量筒不能用作反應(yīng)容器，不能裝熱的液體，更不可對其加熱。　　讀取量筒的刻度值，一定要使視線與量筒內(nèi)液面（半月形彎曲面）的最低點處于同一水平線上，否則會增加體積的測量誤差。讀數(shù)前要靜止一定時間，讓溶液從器壁上完全流下。 　　……

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