蛋白質(zhì)技術(shù)手冊

內(nèi)容概要

本書是一本蛋白質(zhì)研究實(shí)驗(yàn)方法的工具書。內(nèi)容包括蛋白質(zhì)分離純化、蛋白質(zhì)濃度測定、蛋白質(zhì)溶液的濃縮、凝膠電泳、等電聚焦電泳、雙向電泳、毛細(xì)管電泳、免疫印跡、層析技術(shù)、蛋白質(zhì)晶體培養(yǎng)和蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)測定等。本書介紹了這些方法的基本原理，重點(diǎn)在于每種方法的操作過程和經(jīng)驗(yàn)總結(jié)，指出成敗的關(guān)鍵、可能出現(xiàn)的問題及解決的方法。書后附有蛋白質(zhì)研究的各種常用數(shù)據(jù)表。    本書可供生物化學(xué)、分子生物學(xué)、生物技術(shù)、醫(yī)藥衛(wèi)生以及農(nóng)、林、牧等方面有關(guān)的科研、教學(xué)與技術(shù)人員參考。

書籍目錄

第一章 蛋白質(zhì)分離的準(zhǔn)備 1.1 引言 1.2 緩沖液 1.3 鹽、金屬離子和螯合劑 1.4 還原劑 1.5 去垢劑 1.6 蛋白質(zhì)的環(huán)境因素 1.7 蛋白酶抑制劑第二章 蛋白質(zhì)的提取和溶解 2.1 引言 2.2 細(xì)胞破碎和蛋白質(zhì)溶解 2.3 包涵體蛋白質(zhì)的溶解第三章 蛋白質(zhì)濃度測定 3.1 280納米(A280)光吸收法 3.2 Bradford檢測法 3.3 Lowry檢測法 3.4 二喹啉甲酸(BCA)檢測法 3.5 斑點(diǎn)濾膜結(jié)合法 3.6 干擾物質(zhì)表第四章 蛋白質(zhì)溶液的濃縮 4.1 分析方法 4.2 制備方法第五章 變性條件下的凝膠電泳 5.1 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳 5.2 梯度膠 5.3 SDS-尿素膠 5.4 其他方法第六章 非變性條件下的凝膠電泳 6.1 引言 6.2 不連續(xù)非變性凝膠電泳 6.3 相關(guān)的方法第七章 等電聚焦和雙向凝膠電泳 7.1 等電聚焦 7.2 固相pH梯度等電聚焦電泳 7.3 雙向凝膠電泳第八章 蛋白質(zhì)的毛細(xì)管電泳分析 8.1 引言 8.2 影響分離效率的幾個因素 8.3 柱制備技術(shù) 8.4 不同分離條件的影響 8.5 毛細(xì)管電泳檢測器 8.6 實(shí)驗(yàn)操作 8.7 應(yīng)用實(shí)例第九章 免疫印跡 9.1 引言 9.2 免疫印跡操作 9.3 討論第十章 離子交換層析 10.1 蛋白質(zhì)純化 10.2 蛋白質(zhì)溶液的濃縮 10.3 批量層析第十一章 凝膠過濾層析 11.1 蛋白質(zhì)的純化 11.2 更換蛋白質(zhì)的緩沖液第十二章 親和層析 12.1 引言 12.2 親和柱的制備 12.3 特異分離技術(shù)第十三章 蛋白質(zhì)的晶體培養(yǎng)——懸滴結(jié)晶 13.1 引言 13.2 懸滴結(jié)晶法 13.3 設(shè)計(jì)最優(yōu)結(jié)晶方案第十四章 cDNA法推斷蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu) 14.1 引言 14.2 一般策略 14.3 PK-120的純化及肽段氨基酸序列分析 14.4 部分分解多肽兩端有關(guān)的PCR法篩選PK-120基因 14.5 PK-12O cDNA克隆附錄1 常用化學(xué)物質(zhì)分子量附錄2 一些蛋白質(zhì)的分子量和等電點(diǎn)附錄3 硫酸銨沉淀劑表附錄4 分光光度曲線

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