生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)叢書(shū)-細(xì)胞生物學(xué)與遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)

前言

隨著生命科學(xué)研究的深入，生物學(xué)科領(lǐng)域中的主要分支學(xué)科，如遺傳學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、生物化學(xué)、發(fā)育生物學(xué)、生物進(jìn)化論等學(xué)科間相互聯(lián)系、相互補(bǔ)充、相互滲透、相互交叉越來(lái)越明顯。尤其在當(dāng)今生命科學(xué)分子水平的研究上，學(xué)科間知識(shí)體系的關(guān)系及運(yùn)用更是相輔相承。在我國(guó)生命科學(xué)高等教育教學(xué)中，無(wú)論是理論教學(xué)還是實(shí)驗(yàn)教學(xué)，為了將各學(xué)科實(shí)驗(yàn)有機(jī)結(jié)合，避免重復(fù)，許多院校均在探討教學(xué)體系改革或質(zhì)量工程。為了適應(yīng)當(dāng)今生物科學(xué)學(xué)科間融合交叉的特點(diǎn)，我們結(jié)合我校自身特點(diǎn)組織編寫(xiě)了這套生物科學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)叢書(shū)，其目的就是打破過(guò)去以課程為主設(shè)置實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容、缺少學(xué)科間交叉融合的教學(xué)模式。細(xì)胞生物學(xué)和遺傳學(xué)均為生物科學(xué)教育中的核心課程。眾所周知，遺傳是生命的最基本特征，遺傳學(xué)又是研究遺傳物質(zhì)——基因本質(zhì)的一門(mén)學(xué)科；細(xì)胞是生物的基本結(jié)構(gòu)單位，細(xì)胞生物學(xué)則是研究細(xì)胞基本生命活動(dòng)規(guī)律的科學(xué)。兩門(mén)學(xué)科知識(shí)體系聯(lián)系密切，尤其是實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容相互重疊，又互為基礎(chǔ)。基于此種情況，精心選擇編排細(xì)胞生物學(xué)和遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與體系也是實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革的重要組成部分。因此，我們?cè)诳偨Y(jié)多年教學(xué)經(jīng)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，借鑒兄弟院校的教學(xué)成果并結(jié)合學(xué)科發(fā)展，編寫(xiě)了這本實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)。全書(shū)共計(jì)48個(gè)實(shí)驗(yàn)，分為三個(gè)部分。（1）基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)：包含經(jīng)典的細(xì)胞學(xué)與遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)，如細(xì)胞器形態(tài)學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)、細(xì)胞化學(xué)、細(xì)胞生理、電鏡標(biāo)本制備、動(dòng)植物有絲分裂和減數(shù)分裂、核型分析、遺傳物質(zhì)DNA提取等29個(gè)實(shí)驗(yàn)，通過(guò)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)使學(xué)生掌握實(shí)驗(yàn)基本操作技能；（2）綜合實(shí)驗(yàn)：涵蓋了細(xì)胞培養(yǎng)、原生質(zhì)體融合、遺傳轉(zhuǎn)化、多倍體誘導(dǎo)及雜種優(yōu)勢(shì)分析等技術(shù)和方法，力求在基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，盡可能全面地培養(yǎng)學(xué)生相關(guān)實(shí)驗(yàn)技能；（3）開(kāi)放實(shí)驗(yàn)：主要內(nèi)容為細(xì)胞融合、細(xì)胞凋亡分析、熒光原位雜交、綠色熒光蛋白表達(dá)、遺傳物質(zhì)誘變、流式細(xì)胞分選等較新的技術(shù)和方法，目的是在實(shí)驗(yàn)老師指導(dǎo)下，讓學(xué)生自主設(shè)計(jì)并完成實(shí)驗(yàn)，使學(xué)生獨(dú)立完成實(shí)驗(yàn)的技能得到提高。

內(nèi)容概要

隨著生命科學(xué)研究的深入，生物學(xué)科領(lǐng)域中的主要分支學(xué)科，如遺傳學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、生物化學(xué)、發(fā)育生物學(xué)、生物進(jìn)化論等學(xué)科間相互聯(lián)系、相互補(bǔ)充、相互滲透、相互交叉越來(lái)越明顯。尤其在當(dāng)今生命科學(xué)分子水平的研究上，學(xué)科間知識(shí)體系的關(guān)系及運(yùn)用更是相輔相承。

書(shū)籍目錄

第一篇　基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)　實(shí)驗(yàn)一　普通光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)和使用方法　實(shí)驗(yàn)二　動(dòng)物細(xì)胞的基本形態(tài)與顯微測(cè)量　實(shí)驗(yàn)三　細(xì)胞器的顯示與觀察　實(shí)驗(yàn)四　臨時(shí)制片方法及細(xì)胞形態(tài)的觀察　實(shí)驗(yàn)五　細(xì)胞骨架標(biāo)本的制備及觀察　實(shí)驗(yàn)六　植物有絲分裂的孚爾根(Feulgen)核染色觀察　實(shí)驗(yàn)七　小鼠減數(shù)分裂標(biāo)本的制備及觀察　實(shí)驗(yàn)八　植物減數(shù)分裂與玉米花粉母細(xì)胞涂片及觀察　實(shí)驗(yàn)九　蝗蟲(chóng)精巢減數(shù)分裂的觀察　實(shí)驗(yàn)十　植物染色體標(biāo)本的制備與觀察　實(shí)驗(yàn)十一　果蠅唾腺解剖及其染色體觀察　實(shí)驗(yàn)十二　植物染色體顯帶技術(shù)與帶型分析　實(shí)驗(yàn)十三人類性染色體小體的檢測(cè)與觀察　實(shí)驗(yàn)十四　人體外周血淋巴細(xì)胞的培養(yǎng)及染色體觀察　實(shí)驗(yàn)十五　小鼠骨髓細(xì)胞染色體標(biāo)本的制備與觀察　實(shí)驗(yàn)十六　過(guò)氧化氫酶活性的測(cè)定與定位　實(shí)驗(yàn)十七　線粒體和液泡系的活細(xì)胞染色　實(shí)驗(yàn)十八　粗糙鏈孢霉的雜交　實(shí)驗(yàn)十九　細(xì)胞膜通透性和細(xì)胞吞噬活動(dòng)的觀察　實(shí)驗(yàn)二十　堿裂解法制備少量質(zhì)粒DNA　實(shí)驗(yàn)二十一　植物基因組總DNA的提取　實(shí)驗(yàn)二十二　動(dòng)物組織細(xì)胞DNA的提取與檢測(cè)　實(shí)驗(yàn)二十三　數(shù)量性狀遺傳分析　實(shí)驗(yàn)二十四　苯硫脲(PTC)嘗味試驗(yàn)及其基因頻率的計(jì)算　實(shí)驗(yàn)二十五　植物有性雜交　實(shí)驗(yàn)二十六　細(xì)胞的有絲分裂　實(shí)驗(yàn)二十七　細(xì)胞中多糖和過(guò)氧化物酶的定位　實(shí)驗(yàn)二十八　細(xì)胞內(nèi)酸性磷酸酶的顯示　實(shí)驗(yàn)二十九　果蠅基因的連鎖與交換分析第二篇　綜合實(shí)驗(yàn)　實(shí)驗(yàn)三十　細(xì)菌遺傳轉(zhuǎn)化　實(shí)驗(yàn)三十一　果蠅形態(tài)特征、生活史觀察與雜交實(shí)驗(yàn)　實(shí)驗(yàn)三十二植物多倍體的誘發(fā)和鑒定　實(shí)驗(yàn)三十三　雜種優(yōu)勢(shì)的測(cè)定與分析　實(shí)驗(yàn)三十四　植物原生質(zhì)體的分離和培養(yǎng)　實(shí)驗(yàn)三十五　細(xì)胞計(jì)數(shù)及活力測(cè)定　實(shí)驗(yàn)三十六　動(dòng)物細(xì)胞原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)　實(shí)驗(yàn)三十七　植物組織培養(yǎng)技術(shù)　實(shí)驗(yàn)三十八　細(xì)胞的凍存和復(fù)蘇第三篇　開(kāi)放實(shí)驗(yàn)　實(shí)驗(yàn)三十九　動(dòng)物細(xì)胞融合　實(shí)驗(yàn)四十　植物體細(xì)胞雜交——原生質(zhì)體融合　實(shí)驗(yàn)四十一　細(xì)胞顯微注射技術(shù)　實(shí)驗(yàn)四十二　免疫熒光抗體法檢查細(xì)胞表面抗原　實(shí)驗(yàn)四十三　正常細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞常規(guī)核型的標(biāo)本制備　實(shí)驗(yàn)四十四　間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)及鑒定　實(shí)驗(yàn)四十五　染色體的熒光原位雜交　實(shí)驗(yàn)四十六　分子標(biāo)記技術(shù)及其遺傳多態(tài)性分析　實(shí)驗(yàn)四十七　DNA限制酶酶切圖譜構(gòu)建與分析　實(shí)驗(yàn)四十八　模擬選擇對(duì)基因頻率的影響附錄　一、常用試劑的配制　二、常用染色液的配制　三、常用緩沖液的配制　四、常用培養(yǎng)基的配制　五、X2值表主要參考文獻(xiàn)

章節(jié)摘錄

插圖：5.攝影目鏡該鏡是專供顯微攝影使用的一種目鏡。其種類繁多，每廠家皆有各自的專用攝影目鏡。有的目鏡為一發(fā)散光線的負(fù)透鏡系統(tǒng)，焦點(diǎn)和出射光瞳在同一方，都處于鏡筒之中；有的目鏡把被檢驗(yàn)樣品的影像投射到距離較遠(yuǎn)的照相機(jī)機(jī)身的膠片面上。顯微攝影時(shí)，物鏡射出的成像光束經(jīng)攝影目鏡將光線發(fā)散出去，在膠片面上聚焦成像。攝影目鏡專司攝影，不能用做鏡檢觀察。當(dāng)今，世界各國(guó)不同廠家都相繼推出各自的產(chǎn)品，常見(jiàn)的有0PTON、Nikon和Olympus系統(tǒng)顯微鏡。為了提高顯微鏡的成像質(zhì)量，各廠家在物鏡和目鏡的制造上，采取配套設(shè)計(jì)，互補(bǔ)配套，共同提高。在顯微鏡的使用上，只有采用同一工廠生產(chǎn)的相同系統(tǒng)的物鏡和目鏡配套使用，方能獲得最佳光學(xué)效果；否則，定會(huì)招致成像質(zhì)量的降低。為了擴(kuò)大顯微鏡市場(chǎng)，能在同一視場(chǎng)內(nèi)看到更多的被檢樣品，現(xiàn)今廣泛使用廣視角（wide field）目鏡和超廣視角（super wide field或ultra wide field）目鏡，以逐步取代普通視場(chǎng)目鏡。目鏡的出射點(diǎn)或眼點(diǎn)是成像光束射離目鏡的聚焦點(diǎn)。鏡檢時(shí)，瞳孔必須與出射點(diǎn)重合，方能窺見(jiàn)像。目鏡出射點(diǎn)隨目鏡放大率的增加而降低，即靠近眼透鏡，鏡檢時(shí)眼睛必須貼近目鏡，給觀察者帶來(lái)諸多不便，尤其不適于眾多的眼睛配戴者。由于鏡片的阻截，瞳孔遠(yuǎn)離射點(diǎn)，看不到影像；摘脫眼鏡，又因視力不佳難以進(jìn)行觀察。為此，近些年，各廠家相繼制造出多規(guī)格的高出射點(diǎn)目鏡，出射點(diǎn)與眼透鏡的距離大，鏡檢者可隨意戴上眼鏡進(jìn)行鏡檢。目鏡的出射點(diǎn)已成為目鏡的性能指標(biāo)之一。（三）聚光器（condensers）聚光器等聚光系統(tǒng)使來(lái)自光源的光線放大，并聚成光束，透過(guò)載片照明樣品，射人物鏡。聚光器由聚光鏡和孔徑光闌構(gòu)成。聚光鏡屬正透鏡系統(tǒng)，由一至數(shù)片透鏡組成，具會(huì)聚作用，把照明光線會(huì)聚放大，射向被檢樣品，進(jìn)入物鏡?？讖焦怅@位于聚光鏡下方，光闌的孔徑可變，以改變照明光束的直徑，調(diào)節(jié)進(jìn)光量?？讖焦怅@的開(kāi)度即聚光器數(shù)值孔徑會(huì)影響顯微鏡的成像質(zhì)量。物鏡的有效數(shù)值孔徑涵容聚光器的數(shù)值孔徑，其關(guān)系式如下：物鏡的有效數(shù)值孔徑一（物鏡數(shù)值孔徑+聚光器數(shù)值孔徑）／2聚光器數(shù)值孔徑為0.25～1.40。使用數(shù)值孔徑超過(guò)1.0的油浸物鏡時(shí)，聚光器也應(yīng)油浸，在聚光鏡的上透鏡與載玻片之間要充滿浸油。

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