生物學實驗指導叢書-細胞生物學與遺傳學實驗指導

前言

隨著生命科學研究的深入，生物學科領(lǐng)域中的主要分支學科，如遺傳學、細胞生物學、分子生物學、生物化學、發(fā)育生物學、生物進化論等學科間相互聯(lián)系、相互補充、相互滲透、相互交叉越來越明顯。尤其在當今生命科學分子水平的研究上，學科間知識體系的關(guān)系及運用更是相輔相承。在我國生命科學高等教育教學中，無論是理論教學還是實驗教學，為了將各學科實驗有機結(jié)合，避免重復，許多院校均在探討教學體系改革或質(zhì)量工程。為了適應(yīng)當今生物科學學科間融合交叉的特點，我們結(jié)合我校自身特點組織編寫了這套生物科學實驗指導叢書，其目的就是打破過去以課程為主設(shè)置實驗教學內(nèi)容、缺少學科間交叉融合的教學模式。細胞生物學和遺傳學均為生物科學教育中的核心課程。眾所周知，遺傳是生命的最基本特征，遺傳學又是研究遺傳物質(zhì)——基因本質(zhì)的一門學科；細胞是生物的基本結(jié)構(gòu)單位，細胞生物學則是研究細胞基本生命活動規(guī)律的科學。兩門學科知識體系聯(lián)系密切，尤其是實驗教學內(nèi)容相互重疊，又互為基礎(chǔ)?；诖朔N情況，精心選擇編排細胞生物學和遺傳學實驗內(nèi)容與體系也是實驗教學改革的重要組成部分。因此，我們在總結(jié)多年教學經(jīng)驗的基礎(chǔ)上，借鑒兄弟院校的教學成果并結(jié)合學科發(fā)展，編寫了這本實驗指導。全書共計48個實驗，分為三個部分。（1）基礎(chǔ)實驗：包含經(jīng)典的細胞學與遺傳學實驗，如細胞器形態(tài)學、細胞遺傳學、細胞化學、細胞生理、電鏡標本制備、動植物有絲分裂和減數(shù)分裂、核型分析、遺傳物質(zhì)DNA提取等29個實驗，通過基礎(chǔ)實驗使學生掌握實驗基本操作技能；（2）綜合實驗：涵蓋了細胞培養(yǎng)、原生質(zhì)體融合、遺傳轉(zhuǎn)化、多倍體誘導及雜種優(yōu)勢分析等技術(shù)和方法，力求在基礎(chǔ)實驗的基礎(chǔ)上，盡可能全面地培養(yǎng)學生相關(guān)實驗技能；（3）開放實驗：主要內(nèi)容為細胞融合、細胞凋亡分析、熒光原位雜交、綠色熒光蛋白表達、遺傳物質(zhì)誘變、流式細胞分選等較新的技術(shù)和方法，目的是在實驗老師指導下，讓學生自主設(shè)計并完成實驗，使學生獨立完成實驗的技能得到提高。

內(nèi)容概要

隨著生命科學研究的深入，生物學科領(lǐng)域中的主要分支學科，如遺傳學、細胞生物學、分子生物學、生物化學、發(fā)育生物學、生物進化論等學科間相互聯(lián)系、相互補充、相互滲透、相互交叉越來越明顯。尤其在當今生命科學分子水平的研究上，學科間知識體系的關(guān)系及運用更是相輔相承。

書籍目錄

第一篇　基礎(chǔ)實驗　實驗一　普通光學顯微鏡的結(jié)構(gòu)和使用方法　實驗二　動物細胞的基本形態(tài)與顯微測量　實驗三　細胞器的顯示與觀察　實驗四　臨時制片方法及細胞形態(tài)的觀察　實驗五　細胞骨架標本的制備及觀察　實驗六　植物有絲分裂的孚爾根(Feulgen)核染色觀察　實驗七　小鼠減數(shù)分裂標本的制備及觀察　實驗八　植物減數(shù)分裂與玉米花粉母細胞涂片及觀察　實驗九　蝗蟲精巢減數(shù)分裂的觀察　實驗十　植物染色體標本的制備與觀察　實驗十一　果蠅唾腺解剖及其染色體觀察　實驗十二　植物染色體顯帶技術(shù)與帶型分析　實驗十三人類性染色體小體的檢測與觀察　實驗十四　人體外周血淋巴細胞的培養(yǎng)及染色體觀察　實驗十五　小鼠骨髓細胞染色體標本的制備與觀察　實驗十六　過氧化氫酶活性的測定與定位　實驗十七　線粒體和液泡系的活細胞染色　實驗十八　粗糙鏈孢霉的雜交　實驗十九　細胞膜通透性和細胞吞噬活動的觀察　實驗二十　堿裂解法制備少量質(zhì)粒DNA　實驗二十一　植物基因組總DNA的提取　實驗二十二　動物組織細胞DNA的提取與檢測　實驗二十三　數(shù)量性狀遺傳分析　實驗二十四　苯硫脲(PTC)嘗味試驗及其基因頻率的計算　實驗二十五　植物有性雜交　實驗二十六　細胞的有絲分裂　實驗二十七　細胞中多糖和過氧化物酶的定位　實驗二十八　細胞內(nèi)酸性磷酸酶的顯示　實驗二十九　果蠅基因的連鎖與交換分析第二篇　綜合實驗　實驗三十　細菌遺傳轉(zhuǎn)化　實驗三十一　果蠅形態(tài)特征、生活史觀察與雜交實驗　實驗三十二植物多倍體的誘發(fā)和鑒定　實驗三十三　雜種優(yōu)勢的測定與分析　實驗三十四　植物原生質(zhì)體的分離和培養(yǎng)　實驗三十五　細胞計數(shù)及活力測定　實驗三十六　動物細胞原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)　實驗三十七　植物組織培養(yǎng)技術(shù)　實驗三十八　細胞的凍存和復蘇第三篇　開放實驗　實驗三十九　動物細胞融合　實驗四十　植物體細胞雜交——原生質(zhì)體融合　實驗四十一　細胞顯微注射技術(shù)　實驗四十二　免疫熒光抗體法檢查細胞表面抗原　實驗四十三　正常細胞與腫瘤細胞常規(guī)核型的標本制備　實驗四十四　間充質(zhì)干細胞的培養(yǎng)及鑒定　實驗四十五　染色體的熒光原位雜交　實驗四十六　分子標記技術(shù)及其遺傳多態(tài)性分析　實驗四十七　DNA限制酶酶切圖譜構(gòu)建與分析　實驗四十八　模擬選擇對基因頻率的影響附錄　一、常用試劑的配制　二、常用染色液的配制　三、常用緩沖液的配制　四、常用培養(yǎng)基的配制　五、X2值表主要參考文獻

章節(jié)摘錄

插圖：5.攝影目鏡該鏡是專供顯微攝影使用的一種目鏡。其種類繁多，每廠家皆有各自的專用攝影目鏡。有的目鏡為一發(fā)散光線的負透鏡系統(tǒng)，焦點和出射光瞳在同一方，都處于鏡筒之中；有的目鏡把被檢驗樣品的影像投射到距離較遠的照相機機身的膠片面上。顯微攝影時，物鏡射出的成像光束經(jīng)攝影目鏡將光線發(fā)散出去，在膠片面上聚焦成像。攝影目鏡專司攝影，不能用做鏡檢觀察。當今，世界各國不同廠家都相繼推出各自的產(chǎn)品，常見的有0PTON、Nikon和Olympus系統(tǒng)顯微鏡。為了提高顯微鏡的成像質(zhì)量，各廠家在物鏡和目鏡的制造上，采取配套設(shè)計，互補配套，共同提高。在顯微鏡的使用上，只有采用同一工廠生產(chǎn)的相同系統(tǒng)的物鏡和目鏡配套使用，方能獲得最佳光學效果；否則，定會招致成像質(zhì)量的降低。為了擴大顯微鏡市場，能在同一視場內(nèi)看到更多的被檢樣品，現(xiàn)今廣泛使用廣視角（wide field）目鏡和超廣視角（super wide field或ultra wide field）目鏡，以逐步取代普通視場目鏡。目鏡的出射點或眼點是成像光束射離目鏡的聚焦點。鏡檢時，瞳孔必須與出射點重合，方能窺見像。目鏡出射點隨目鏡放大率的增加而降低，即靠近眼透鏡，鏡檢時眼睛必須貼近目鏡，給觀察者帶來諸多不便，尤其不適于眾多的眼睛配戴者。由于鏡片的阻截，瞳孔遠離射點，看不到影像；摘脫眼鏡，又因視力不佳難以進行觀察。為此，近些年，各廠家相繼制造出多規(guī)格的高出射點目鏡，出射點與眼透鏡的距離大，鏡檢者可隨意戴上眼鏡進行鏡檢。目鏡的出射點已成為目鏡的性能指標之一。（三）聚光器（condensers）聚光器等聚光系統(tǒng)使來自光源的光線放大，并聚成光束，透過載片照明樣品，射人物鏡。聚光器由聚光鏡和孔徑光闌構(gòu)成。聚光鏡屬正透鏡系統(tǒng)，由一至數(shù)片透鏡組成，具會聚作用，把照明光線會聚放大，射向被檢樣品，進入物鏡?？讖焦怅@位于聚光鏡下方，光闌的孔徑可變，以改變照明光束的直徑，調(diào)節(jié)進光量。孔徑光闌的開度即聚光器數(shù)值孔徑會影響顯微鏡的成像質(zhì)量。物鏡的有效數(shù)值孔徑涵容聚光器的數(shù)值孔徑，其關(guān)系式如下：物鏡的有效數(shù)值孔徑一（物鏡數(shù)值孔徑+聚光器數(shù)值孔徑）／2聚光器數(shù)值孔徑為0.25～1.40。使用數(shù)值孔徑超過1.0的油浸物鏡時，聚光器也應(yīng)油浸，在聚光鏡的上透鏡與載玻片之間要充滿浸油。

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