植物細(xì)胞組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)教程

出版時(shí)間:2009-12  出版社:中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社  作者:郭仰東 編  頁(yè)數(shù):203  
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前言

  本書(shū)是為配合講授植物細(xì)胞組織培養(yǎng)、植物生物技術(shù)等課程而編寫(xiě)的,是普通高等教育“十一五”國(guó)家級(jí)規(guī)劃教材《植物細(xì)胞組織培養(yǎng)》(劉慶昌等主編)的配套實(shí)驗(yàn)教材。編寫(xiě)者來(lái)自國(guó)內(nèi)多所高校,具有多年的相關(guān)領(lǐng)域教學(xué)和科研經(jīng)歷。在植物細(xì)胞組織培養(yǎng)和植物生物技術(shù)課程教學(xué)工作中,我們感到缺乏合適的實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)類(lèi)教材,實(shí)驗(yàn)講解過(guò)程中頗感不便。同時(shí),缺乏合適的實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)教材對(duì)學(xué)生開(kāi)展實(shí)驗(yàn)和學(xué)習(xí)掌握相關(guān)知識(shí)也有很大影響,基于上述原因我們編寫(xiě)此書(shū)。本書(shū)可以作為農(nóng)林和生物類(lèi)各專(zhuān)業(yè)大學(xué)生的實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)教材,也可作為研究生及從事植物細(xì)胞組織培養(yǎng)和植物生物技術(shù)研究和應(yīng)用的科技工作者的參考書(shū)?! ”緯?shū)第一章(植物細(xì)胞組織培養(yǎng)的基本設(shè)備和技術(shù)),第五章(植物單倍體細(xì)胞培養(yǎng))和附錄部分由中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)郭仰東教授編寫(xiě);第二章(植物組織器官培養(yǎng))由北京農(nóng)學(xué)院張喜春副教授編寫(xiě);第三章(植物離體快繁)由中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)郭仰東教授和北京農(nóng)學(xué)院張喜春副教授編寫(xiě);第四章(植物莖尖分生組織培養(yǎng))由武漢大學(xué)李家儒副教授和中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)郭仰東教授編寫(xiě);第六章(原生質(zhì)體培養(yǎng)、融合及植株再生)由浙江大學(xué)陳利萍教授編寫(xiě),其中實(shí)驗(yàn)五由中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)翟紅副教授編寫(xiě);第七章(植物細(xì)胞培養(yǎng)與次生代謝)由中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)周立剛教授編寫(xiě);第八章(植物遺傳轉(zhuǎn)化)由中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)翟紅副教授編寫(xiě);第九章(植物種質(zhì)離體保存)由內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)石嶺教授編寫(xiě);第十章(植物人工種子)由北京農(nóng)學(xué)院葛秀秀博士和中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)郭仰東教授編寫(xiě)。最后由郭仰東教授統(tǒng)稿。中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)劉莉莎和王玉玨協(xié)助參加了本書(shū)的編寫(xiě)工作。本書(shū)承蒙中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)劉慶昌教授審閱,在此表示感謝?! ”緯?shū)涉及內(nèi)容較廣,限于編者水平,書(shū)中不妥之處,敬請(qǐng)讀者批評(píng)指正。

內(nèi)容概要

本書(shū)是為配合講授植物細(xì)胞組織培養(yǎng)、植物生物技術(shù)等課程而編寫(xiě)的,是普通高等教育“十一五”國(guó)家級(jí)規(guī)劃教材《植物細(xì)胞組織培養(yǎng)》的配套實(shí)驗(yàn)教材。編寫(xiě)者來(lái)自國(guó)內(nèi)多所高校,具有多年的相關(guān)領(lǐng)域教學(xué)和科研經(jīng)歷。在植物細(xì)胞組織培養(yǎng)和植物生物技術(shù)課程教學(xué)工作中,編者感到缺乏合適的實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)類(lèi)教材,實(shí)驗(yàn)講解過(guò)程中頗感不便,為此編寫(xiě)了本書(shū)。本書(shū)可以作為農(nóng)林和生物類(lèi)各專(zhuān)業(yè)大學(xué)生的實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)教材,也可作為研究生及從事植物細(xì)胞組織培養(yǎng)和植物生物技術(shù)研究和應(yīng)用的科技工作者的參考書(shū)。

書(shū)籍目錄

第一章  植物細(xì)胞組織培養(yǎng)的基本設(shè)備和技術(shù)  實(shí)驗(yàn)一  植物組織培養(yǎng)所需基本設(shè)備儀器用具的認(rèn)知及其使用方法介紹  實(shí)驗(yàn)二  植物離體培養(yǎng)的基本技術(shù)簡(jiǎn)介  實(shí)驗(yàn)三  MS培養(yǎng)基的配制第二章  植物組織器官培養(yǎng)  實(shí)驗(yàn)一  番茄離體根培養(yǎng)技術(shù)  實(shí)驗(yàn)二  菊花花器官培養(yǎng)技術(shù)  實(shí)驗(yàn)三  小麥胚培養(yǎng)技術(shù)  實(shí)驗(yàn)四  蘋(píng)果胚乳培養(yǎng)技術(shù)第三章  植物離體快繁  實(shí)驗(yàn)一  煙草微繁殖技術(shù)  實(shí)驗(yàn)二  蝴蝶蘭的快繁技術(shù)  實(shí)驗(yàn)三  石刁柏莖段培養(yǎng)技術(shù)  實(shí)驗(yàn)四  香蕉快繁技術(shù)第四章  植物莖尖分生組織培養(yǎng)  實(shí)驗(yàn)一  植物莖尖分生組織剝離和培養(yǎng)  實(shí)驗(yàn)二  草莓莖尖脫毒  實(shí)驗(yàn)三  馬鈴薯莖尖脫毒第五章  植物單倍體細(xì)胞培養(yǎng)  實(shí)驗(yàn)一  甘藍(lán)型油菜小孢子培養(yǎng)及植株再生  實(shí)驗(yàn)二  煙草花藥培養(yǎng)及植株再生  實(shí)驗(yàn)三  水稻花藥培養(yǎng)及植株再生  實(shí)驗(yàn)四  甜菜雌性單倍體的離體誘導(dǎo)  實(shí)驗(yàn)五  大麥小孢子培養(yǎng)及植株再生第六章  原生質(zhì)體培養(yǎng)、融合及植株再生  實(shí)驗(yàn)一  芥菜原生質(zhì)體培養(yǎng)及植株再生  實(shí)驗(yàn)二  水稻原生質(zhì)體培養(yǎng)及植株再生  實(shí)驗(yàn)三  石竹科植物細(xì)胞融合及植株再生  實(shí)驗(yàn)四  普通小麥和簇毛麥細(xì)胞融合及植株再生  實(shí)驗(yàn)五  煙草葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體的游離與融合第七章  植物細(xì)胞培養(yǎng)與次生代謝  實(shí)驗(yàn)一  煙草愈傷組織的誘導(dǎo)和培養(yǎng)  實(shí)驗(yàn)二  植物懸浮細(xì)胞系的建立  實(shí)驗(yàn)三  植物細(xì)胞生長(zhǎng)量的測(cè)定  實(shí)驗(yàn)四  植物細(xì)胞活力的測(cè)定  實(shí)驗(yàn)五  植物細(xì)胞系的篩選與保存  實(shí)驗(yàn)六  植物培養(yǎng)物次生代謝產(chǎn)物的含量分析與分離純化  實(shí)驗(yàn)七  植物細(xì)胞培養(yǎng)合成次生代謝產(chǎn)物的調(diào)節(jié)  實(shí)驗(yàn)八  植物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)生產(chǎn)次生代謝產(chǎn)物第八章  植物遺傳轉(zhuǎn)化  實(shí)驗(yàn)一  根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的煙草葉盤(pán)遺傳轉(zhuǎn)化  實(shí)驗(yàn)二  基因槍法轉(zhuǎn)化小麥未成熟胚  實(shí)驗(yàn)三  花粉管通道法介導(dǎo)棉花基因轉(zhuǎn)化第九章  植物種質(zhì)離體保存  實(shí)驗(yàn)一  蘋(píng)果低溫離體保存技術(shù)  實(shí)驗(yàn)二  馬鈴薯試管苗保存技術(shù)  實(shí)驗(yàn)三  大蒜莖尖玻璃化法超低溫保存技術(shù)第十章  植物人工種子  實(shí)驗(yàn)一  煙草人工種子制作  實(shí)驗(yàn)二  胡蘿卜人工種子制作附錄一  附錄一  元素原子質(zhì)量表  附錄二  常用化合物分子質(zhì)量表  附錄三  常用英文縮寫(xiě)  附錄四  植物組織培養(yǎng)常用培養(yǎng)基成分表  附錄五  植物組織培養(yǎng)中經(jīng)常使用的熱不穩(wěn)定物質(zhì)  附錄六  常用緩沖溶液的配制  附錄七  常用酸堿摩爾濃度的近似配制表  附錄八  培養(yǎng)基植物激素濃度換算表  附錄九  常見(jiàn)植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)及主要性質(zhì)  附錄十  溫濕度換算表  附錄十一  細(xì)胞篩孔徑(μm)與目數(shù)換算表  附錄十二  離心機(jī)轉(zhuǎn)數(shù)與離心力的列線圖及公式  附錄十三  計(jì)量單位前綴參考文獻(xiàn)

章節(jié)摘錄

  養(yǎng)的需要是不同的,離體根培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基多為無(wú)機(jī)鹽濃度較低的White、Ns等培養(yǎng)基,其他常用的培養(yǎng)基如1/2MS,B2等也可采用,但大量元素一般將其濃度稀釋到2/3或1/2,以降低培養(yǎng)基中的無(wú)機(jī)鹽濃度。  2.離體根培養(yǎng)的外植體的選擇:選擇和確定合適的外植體是進(jìn)行離體根培養(yǎng)的基礎(chǔ),而根是受到植物種類(lèi)限制的,因此必須分析不同植物類(lèi)型的根離體生長(zhǎng)狀況,尋找確定滿足培養(yǎng)目的的植物離體根。因此,在生產(chǎn)實(shí)踐中必須選取最易實(shí)現(xiàn)離體根發(fā)生的植物種類(lèi),使用離體根組織培養(yǎng)的方法開(kāi)展植物繁殖的工作,同時(shí)在組織培養(yǎng)中通過(guò)觀察、分析、比較最終確定最適合的植物類(lèi)型,以利于降低生產(chǎn)成本。不同植物、不同基因型、同一植物不同部位和不同年齡對(duì)根的發(fā)生都有影響。一般情況下,木本植物比草本植物難、成年樹(shù)比幼年樹(shù)難、喬木比灌木難。不同植物的根在培養(yǎng)過(guò)程中的反應(yīng)不同:具有大量強(qiáng)壯的側(cè)根的植物,例如番茄、煙草、馬鈴薯、黑麥、小麥、三葉草和曼陀羅等,這些材料在培養(yǎng)中可進(jìn)行連續(xù)繼代培養(yǎng)而無(wú)限生長(zhǎng);有些植物,例如向日葵、蘿卜、芥菜、旋花、豌豆、百合、矮牽牛等的根能進(jìn)行較長(zhǎng)時(shí)間的培養(yǎng),但由于只長(zhǎng)出稀疏的側(cè)根以致于常常失去生長(zhǎng)能力;有些植物,例如一些木本植物的離體根則很難生長(zhǎng)?! 楂@取適合離體培養(yǎng)的根外植體,可以采用兩種方法:一是對(duì)所選取的植物種子采用飽和漂白粉或過(guò)氧化氫等消毒劑進(jìn)行表面消毒,接種到MS無(wú)激素培養(yǎng)基(MSO)上,在無(wú)菌條件下萌發(fā),待根伸長(zhǎng)后切取根段作為外植體,也就是采用無(wú)菌苗的根作為培養(yǎng)材料;二是選擇自然生長(zhǎng)的生長(zhǎng)良好的植物根?! ?.離體根的消毒和接種:在離體根培養(yǎng)中,首先要解決外植體消毒問(wèn)題,因?yàn)樵谧匀粭l件下,根生長(zhǎng)在土壤中,要進(jìn)行徹底的表面消毒是比較困難的。為獲取適合離體培養(yǎng)的根外植體,也可以采用根的無(wú)性繁殖系。根無(wú)性繁殖系的建立同樣也有兩種方法:一是來(lái)自無(wú)菌種子發(fā)芽產(chǎn)生的幼根切段,二是植株根系經(jīng)滅菌處理后的切段。  4.愈傷組織形成及植株再生:在根形成愈傷組織的過(guò)程中,需指出一點(diǎn)的是;愈傷組織如果先形成根則往往抑制芽的形成。離體根的發(fā)生是以不定根方式進(jìn)行的。不定根的形成可分為兩個(gè)階段,即根原基的形成和根原基的伸長(zhǎng)及生長(zhǎng)。根原基的啟動(dòng)和形成約歷時(shí)48h,包括三次細(xì)胞分裂,即第一次和第二次的細(xì)胞橫分裂及第三次的細(xì)胞縱分裂,然后是細(xì)胞快速伸長(zhǎng)階段,需24~48h,生長(zhǎng)素可以促進(jìn)細(xì)胞橫分裂。因此,根原基的形成與生長(zhǎng)素有關(guān),根原基的伸長(zhǎng)和生長(zhǎng)則可在無(wú)外源激素下實(shí)現(xiàn)。一般從誘導(dǎo)到不定根出現(xiàn)的時(shí)間,快的植物種類(lèi)需3~4d,慢的植物種類(lèi)需3~4周。

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