動物生物化學實驗教程

內(nèi)容概要

　動物生物化學實驗課是動物科學和動物醫(yī)學等專業(yè)學生的必修課之一，是培養(yǎng)相關(guān)專業(yè)大學生實驗技能的重要課程之一。近年來，隨著生物技術(shù)的迅猛發(fā)展、教學評估要求條件的變化，各高校動物生物化學實驗課程的教學均進行了一定程度的調(diào)整。在這種情況下，本著內(nèi)容適合現(xiàn)今教學、滿足課程建設(shè)、人才培養(yǎng)需要的宗旨，作者著手編寫了這本實驗教材。
　　該教材共九章，第一章為學生應該了解的動物生物化學實驗常識。第二章為生物化學常用技術(shù)的原理和應用，包括離心技術(shù)、電泳技術(shù)、分光光度技術(shù)、層析技術(shù)。介紹過程中，作者力求語言精練，容易理解。同時作者還介紹了一些新的儀器和方法，如自動生化分析儀、核酸重組技術(shù)等。其他章節(jié)均為具體的實驗項目，所選大部分實驗內(nèi)容是目前多所農(nóng)業(yè)高校開設(shè)的實驗，代表性強、經(jīng)費使用較少、涉及范圍較寬。
　該教材編寫主要特點是：
　
（1）定位明確，主要針對動物科學、動物醫(yī)學專業(yè)的本科生編寫。實驗設(shè)計均以動物為試材，而且涵蓋了全國大多數(shù)農(nóng)業(yè)院校動物科學、動物醫(yī)學專業(yè)開設(shè)動物生物化學實驗內(nèi)容，針對性較強、內(nèi)容相對集中。
（2）緊密與理論教材配套，根據(jù)理論內(nèi)容的講授順序安排實驗內(nèi)容，讓學生易學好用。該書共選擇了26個實驗項目，分為酶學、糖類、脂類、蛋白質(zhì)、核酸、維生素和綜合性實驗，學生更容易理解。
（3）既有驗證性實驗項目，也有綜合性實驗內(nèi)容，能夠滿足各校教改和教學評估的要求。綜合性實驗將蛋白質(zhì)、酶等生物活性分子的初級制備、分離純化和系統(tǒng)的分析鑒定方法有機地結(jié)合起來，體現(xiàn)了生物化學實驗技術(shù)的特點。
（4）強調(diào)了關(guān)鍵技術(shù)及容易失敗的地方，便于學生自己獨立完成實驗。
（5）有選擇的空間，大部分綜合性實驗項目均包含了相關(guān)的系列內(nèi)容，教師可以根據(jù)不同實驗室的條件進行選擇，也可以讓學生自行設(shè)計、綜合，便于發(fā)揮學生能動性與創(chuàng)造性。

書籍目錄

第一章 動物生物化學實驗常識
　第一節(jié) 動物生化實驗技術(shù)發(fā)展簡史
　第二節(jié) 動物生化實驗室常識與規(guī)則
　　一、實驗室規(guī)則
　　二、實驗室安全及防護知識
　第三節(jié) 生化實驗基本操作
　　一、玻璃儀器的洗滌
　　二、刻度吸管的使用
　　三、微量移液器的使用
　　四、試管中液體的混勻法
　第四節(jié) 常用實驗樣品的處理
　　一、血液樣品的采集
　　二、血清的制備
　　三、全血及血漿的制備
　　四、無蛋白血濾液的制備
　　五、生物大分子的基本制備技術(shù)
　第五節(jié) 實驗報告的撰寫規(guī)范
　　一、實驗記錄
　　二、定性實驗報告書寫格式
　　三、定量實驗報告書寫格式
第二章 常用生化實驗技術(shù)原理及應用
　第一節(jié) 離心技術(shù)的原理及應用
　　一、離心技術(shù)的基本原理
　　二、離心機的主要類型
　　三、常用的離心分離方法
　　四、離心操作的注意事項
　第二節(jié) 光度測定法的原理及應用
　　一、分光光度法的基本原理
　　二、光度法的計算
　　三、使用分光光度計的注意事項
　　四、自動生化分析技術(shù)
　第三節(jié) 電泳技術(shù)的原理及應用
　　一、影響電泳遷移率的因素
　　二、幾種常用的電泳法
　第四節(jié) 層析技術(shù)的原理及應用
　　一、層析技術(shù)的常用術(shù)語
　　二、層析技術(shù)的分類
　　三、常用的層析方法
　　四、柱層析的基本裝置
　　五、柱層析的基本操作
　第五節(jié) DNA重組技術(shù)
　　一、多聚酶鏈式反應（PolymeraseChainReaction，PCR）的基本過程
　　二、DNA重組技術(shù)（RecombinantDNATechnology）
　　三、DNA重組技術(shù)的基本步驟
第三章 酶學實驗內(nèi)容
　實驗一　唾液淀粉酶活性觀察
　實驗二　轉(zhuǎn)氨酶活性測定——King氏法
　實驗三　琥珀酸脫氫酶的作用及競爭性抑制的觀察
第四章 糖類實驗內(nèi)容實驗四血糖的測定
　1.福林一吳憲氏法
　2.葡萄糖氧化酶法
　實驗五　肝糖原的提取和鑒定
第五章 脂類實驗內(nèi)容
　實驗六　血清總脂含量測定（香草醛法）
　實驗七　肝組織的生酮作用
　實驗八　血清游離脂肪酸測定（一次提取比色法）
　實驗九　血清總膽固醇測定（膽固醇氧化酶法）
第六章 蛋白質(zhì)實驗內(nèi)容
　實驗十　醋酸纖維薄膜電泳法分離血清蛋白質(zhì)
　實驗十一　蛋白質(zhì)的含量測定
　?、?雙縮脲法
　　Ⅱ.Folin-酚試劑法
　?、?紫外光吸收法
　　Ⅳ.考馬斯亮藍結(jié)合法
　實驗十二　血清尿素氮（BUN）的測定（二乙酰一肟法）
　實驗十三　氨基酸紙上層析
第七章 核酸實驗內(nèi)容
　實驗十四　動物組織DNA提取
　實驗十五　DNA的定量測定（二苯胺法）
　實驗十六　動物肝臟總RNA的制備
　實驗十七　RNA的定量測定（地衣酚法）
　實驗十八　紫外吸收法測定核酸的含量
第八章 維生素實驗內(nèi)容
　實驗十九　維生素B2的定量測定（熒光法）
　……
第九章 綜合性實驗內(nèi)容
附錄
參考文獻

章節(jié)摘錄

插圖：（二）全血的制備全血是指抗凝的血液，即在血液取出后立即與適量的抗凝劑充分混合，以免血液凝固?？鼓齽╊A加于準備承接血液的容器中?？鼓齽┑姆N類可以根據(jù)實驗的需要進行選擇。將剛采取的血液注入預先加有適合要求的抗凝劑試管中，輕輕搖動，使抗凝劑完全溶解并分布于血液中。（三）血漿的制備血漿是指抗凝血漿。游離血紅蛋白、變性血紅蛋白、纖維蛋白原的測定須用血漿。將已抗凝的全血放置一段時間或于2000r／rain離心10min，沉降血細胞，上層清液即為血漿。分離較好的血漿應為淡黃色。為避免產(chǎn)生溶血，必須采用干燥清潔的采血器具和容器，盡量少振蕩。血漿比血清分離的快而且量多。兩者的差別，主要是血漿比血清多含一種纖維蛋白原，其他成分基本相同。（四）血液的量取已制備好的抗凝血液放置后紅血細胞將自然下沉，往往造成量取全血時的誤差。因此量取全血時，血液必須充分混合，以保證血細胞和血漿分布均勻。其操作如下：1．血液混勻法若血液裝在試管中，可用玻璃塞或潔凈干燥的橡皮塞，塞嚴管口。緩慢上下顛倒數(shù)次，使血細胞、血漿均勻混合。顛倒時切不可用力過猛，以免溶血。也可用一彎成腳形的小玻璃棒插入管內(nèi)，上下移動若干次，使完全混勻。血液混勻后應立即量取，且每次量取前都必須重復此操作。2．準確量取法用吸管量取血液時，要將已充分混勻的血液吸至需要量取血液容量的稍上方處，用濾紙片擦凈吸管外壁黏著的血液，而后使血液慢慢流至刻度，放出多余血液。再次擦凈管尖血液。然后運用食指壓力控制著流出速度，慢慢把血液放入容器內(nèi)，將最后一滴吹入容器內(nèi)（若是不應吹的吸管，則將管尖貼在接受容器的壁上轉(zhuǎn)動幾秒鐘，使液體盡量流出即可）。血液流出后，管壁應清明而看不到血液薄層附著。

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《動物生物化學實驗教程》：普通高等教育“十一五”國家級規(guī)劃教材

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