實(shí)用流式細(xì)胞術(shù)

前言

流式細(xì)胞術(shù)作為一種高科技、敏感而快速分析細(xì)胞及微粒的技術(shù)，自中國(guó)引進(jìn)第一臺(tái)流式細(xì)胞儀以來(lái)，已經(jīng)走過(guò)30余年的歷程。在這期間，隨著流式細(xì)胞儀結(jié)構(gòu)和功能的改進(jìn)和提高，流式細(xì)胞儀的應(yīng)用范圍越來(lái)越廣，目前國(guó)內(nèi)已經(jīng)有越來(lái)越多的醫(yī)療和研究機(jī)構(gòu)擁有了流式細(xì)胞儀。流式細(xì)胞儀在血液學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤、干細(xì)胞和細(xì)胞治療等領(lǐng)域發(fā)揮著重要的作用。流式細(xì)胞術(shù)在血液學(xué)中的應(yīng)用是一個(gè)極好的范例，其中對(duì)血液淋巴系統(tǒng)腫瘤的診斷、分期和療效的評(píng)定已經(jīng)成為不可缺少的依據(jù)。流式免疫分型的應(yīng)用使白血病和淋巴瘤的診斷進(jìn)入一個(gè)嶄新的階段，使得形態(tài)學(xué)不典型、診斷分型困難疾病的診斷變得容易了，而且還發(fā)現(xiàn)了一些形態(tài)學(xué)不能診斷的疾病。對(duì)目前診斷困難的骨髓增生異常綜合征，免疫表型在診斷中的作用也凸顯出來(lái)，其意義會(huì)越來(lái)越明確。由于血液系統(tǒng)疾病的復(fù)雜性，使得流式細(xì)胞術(shù)在血液病中的應(yīng)用掌握起來(lái)比較困難，問題較多。本書針對(duì)這些問題進(jìn)行了系統(tǒng)和詳細(xì)的介紹。并針對(duì)目前免疫分型抗體使用不規(guī)范、報(bào)告形式混亂等問題介紹了國(guó)際上的先進(jìn)經(jīng)驗(yàn)、指南及編者的實(shí)際范例。

內(nèi)容概要

本書以2008版WHO血液和淋巴組織腫瘤分類為框架，對(duì)以下幾個(gè)方面進(jìn)行了重點(diǎn)闡述：    利用多色流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行急性白血病、骨髓增生異常綜合征、骨髓增殖性腫瘤和淋巴系統(tǒng)腫瘤的免疫分型。    結(jié)合目前微量殘留病水平對(duì)于評(píng)估白血病患者預(yù)后、進(jìn)行危險(xiǎn)度分層，指導(dǎo)個(gè)體化治療的新策略的需要，詳細(xì)講解了微量殘留病的檢測(cè)原則、抗體組合、檢測(cè)方法及臨床意義。    流式細(xì)胞術(shù)在造血干細(xì)胞移植、紅細(xì)胞病、血小板檢測(cè)和免疫功能檢測(cè)中的應(yīng)用。    流式細(xì)胞儀的工作原理、標(biāo)本制備、相關(guān)的儀器操作及常用的抗體、抗體組合、免疫分型報(bào)告的標(biāo)準(zhǔn)化和國(guó)際上的相關(guān)指南。    本書內(nèi)容涉及理論和實(shí)際操作，書中配以大量流式細(xì)胞分析圖和細(xì)胞形態(tài)學(xué)圖片，有助于讀者的理解和掌握。不僅適用于從事流式細(xì)胞術(shù)使用和分析的人員及臨床醫(yī)生，而且對(duì)臨床醫(yī)學(xué)院校師生和研究人員均有參考價(jià)值。

書籍目錄

第一章  流式細(xì)胞儀的工作原理(吳煦  楊海霞)  第一節(jié)  流式細(xì)胞儀的發(fā)展史  第二節(jié)  流式細(xì)胞儀的基本原理  第三節(jié)  流式細(xì)胞儀的結(jié)構(gòu)組成    一、激光及光束成形系統(tǒng)    二、液流系統(tǒng)    三、流式細(xì)胞儀中的光信號(hào)收集系統(tǒng)    四、電子系統(tǒng)    五、FCM測(cè)量數(shù)據(jù)的存貯、顯示與分析  第四節(jié)  流式細(xì)胞儀的檢測(cè)信號(hào)及意義    一、散射光信號(hào)的檢測(cè)    二、熒光信號(hào)的檢測(cè)  第五節(jié)  流式細(xì)胞儀的主要分析技術(shù)指標(biāo)    一、熒光靈敏度    二、儀器分辨率    三、前向散射光靈敏度    四、細(xì)胞分析速度  第六節(jié)  細(xì)胞分選    一、電荷式細(xì)胞分選    二、捕獲管分選    三、FCM分選指標(biāo)  第七節(jié)  高端流式細(xì)胞儀的簡(jiǎn)介和展望    一、FACSCantoⅡ流式細(xì)胞儀    二、LSRⅡ高端生命科學(xué)研究型流式細(xì)胞儀    三、FACSAriaⅡ高速流式細(xì)胞分選儀    四、Influx高端流式細(xì)胞分選儀    五、MACSQuantTM流式細(xì)胞儀——細(xì)胞分析的里程碑第二章  流式細(xì)胞儀的標(biāo)本制備、檢測(cè)及質(zhì)量控制(王亞哲)  第一節(jié)  標(biāo)本的制備及保存    一、標(biāo)本的準(zhǔn)備    二、細(xì)胞計(jì)數(shù)    三、熒光染色……第三章  正常血細(xì)胞發(fā)育過(guò)程的抗原表達(dá)規(guī)律第四章  急性白血病的免疫表型第五章  髓細(xì)胞增殖性疾病的免疫表型分析第六章  流式細(xì)胞術(shù)在淋巴增殖性腫瘤中的應(yīng)用第七章  慢性淋巴細(xì)胞白血病和多發(fā)性骨髓瘤的免疫表型特點(diǎn)第八章  急性白血病微量殘留病的流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)第九章  慢性淋巴細(xì)胞增殖性疾病的微量殘留病檢測(cè)第十章  流式細(xì)胞術(shù)分析造血干細(xì)胞第十一章  流式細(xì)胞術(shù)在造血干細(xì)胞移植中的應(yīng)用第十二章  常見紅細(xì)胞病的流式分析第十三章  流式細(xì)胞術(shù)與血小板分析第十四章  免疫功能檢測(cè)第十五章  免疫分型的抗體組合原則及報(bào)告標(biāo)準(zhǔn)化附錄

章節(jié)摘錄

插圖：流式細(xì)胞儀安裝有一根或多根激光器，一些低端的流式細(xì)胞儀還采用汞光燈作為光源。絕大多數(shù)流式細(xì)胞儀都配有氬離子氣態(tài)激光器作為第一根激光，其發(fā)射波長(zhǎng)為488nm。待測(cè)樣本中的細(xì)胞經(jīng)液流系統(tǒng)傳送，形成單細(xì)胞流，依次通過(guò)流式細(xì)胞儀的流動(dòng)室，在激光照射區(qū)域，細(xì)胞上標(biāo)記的熒光染料受到激光的激發(fā)，產(chǎn)生熒光信號(hào)。在不同的實(shí)驗(yàn)體系中，根據(jù)細(xì)胞標(biāo)記的熒光素不同，在不同波長(zhǎng)的激光激發(fā)下，發(fā)射出不同波長(zhǎng)的熒光，這些熒光信號(hào)可以反映不同的細(xì)胞生物學(xué)特性。細(xì)胞受到激光照射后產(chǎn)生的這些光信號(hào)被相應(yīng)接收器（光電倍增管）接收并放大，轉(zhuǎn)換為與光強(qiáng)度相關(guān)的電子信號(hào)，然后經(jīng)計(jì)算機(jī)儲(chǔ)存和處理分析，以圖形形式（如直方圖、點(diǎn)圖、密度圖等）直觀地顯示出細(xì)胞的分布情況。流式細(xì)胞儀產(chǎn)生的信號(hào)主要有散射光信號(hào)和熒光信號(hào)。這些信號(hào)可以反映相應(yīng)的細(xì)胞特征，如反映細(xì)胞相對(duì)大小的前向散射光（FSC）、反映細(xì)胞內(nèi)部復(fù)雜程度的側(cè)向散射光（SSC）以及反映各種細(xì)胞功能和抗原表達(dá)的熒光信號(hào)。將圖形和數(shù)據(jù)直接輸入聯(lián)機(jī)專用的計(jì)算機(jī)，或存人磁盤以備分析。計(jì)算機(jī)快速而精確地將所測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)計(jì)算，結(jié)合多參數(shù)分析，從而實(shí)現(xiàn)了細(xì)胞定量分析。一些流式細(xì)胞儀還配有細(xì)胞分選系統(tǒng)，通過(guò)細(xì)胞分選系統(tǒng)，還可以將具有相同光信號(hào)特征，即某些特定特征的細(xì)胞群體分選出來(lái)。

編輯推薦

《實(shí)用流式細(xì)胞術(shù):血液病篇》由北京大學(xué)醫(yī)學(xué)出版社出版。

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