出版時(shí)間:2006-10 出版社:國(guó)家環(huán)境保護(hù)總局 作者:王伯瑤,黃寧主編 頁(yè)數(shù):296
內(nèi)容概要
全書共13章,第1章盡可能全面地?cái)⑹隽朔肿由飳W(xué)基本的實(shí)驗(yàn)技術(shù),內(nèi)容包括凝膠電泳、質(zhì)粒的制備、基因組DNA的制備和分析、總RNA的提取和分析、cDNA文庫(kù)的構(gòu)建、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)、目的基因片段的克隆、Southern印跡、Northern印跡、Western印跡等。其余各章對(duì)一些特殊的實(shí)驗(yàn)技術(shù)或新技術(shù)進(jìn)行了經(jīng)驗(yàn)性質(zhì)的介紹,包括哺乳動(dòng)物細(xì)胞和組織基因表達(dá)分析、報(bào)告基因技術(shù)、基因上游調(diào)控序列的分析、重組基因大腸桿菌表達(dá)產(chǎn)物的制備、重組基因酵母菌表達(dá)產(chǎn)物的制備、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)誘導(dǎo)的基因定點(diǎn)突變、酵母雙雜交技術(shù)、噬菌體展示技術(shù)、哺乳動(dòng)物轉(zhuǎn)基因、RNA干擾技術(shù)等。
書籍目錄
第1章 分子生物學(xué)常規(guī)實(shí)驗(yàn)技術(shù) 第1節(jié) 凝膠電泳 第2節(jié) 質(zhì)粒DNA的制備 第3節(jié) 真核細(xì)胞DNA的制備與定量 第4節(jié) 總RNA的提取和分析 第5節(jié) cDNA文庫(kù)的構(gòu)建 第6節(jié) 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR) 第7節(jié) 重組DNA的構(gòu)建、篩選與鑒定 第8節(jié) Southern雜交 第9節(jié) Northern雜交 第10節(jié) Western免疫印跡第2章 蛋白質(zhì)提取與純化技術(shù) 第1節(jié) 蛋白質(zhì)制備的基本步驟 第2節(jié) 層析法分離純化蛋白質(zhì)第3章 哺乳動(dòng)物細(xì)胞和組織基因表達(dá)分析 第1節(jié) 逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR) 第2節(jié) 實(shí)時(shí)定量RT—PCR 第3節(jié) 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)方法(ELISA)第4章 報(bào)告基因技術(shù)第5章 基因調(diào)控序列分析第6章 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)引導(dǎo)的基因定點(diǎn)突變第7章 重組基因大腸桿菌表達(dá)產(chǎn)物的制備 第1節(jié) 大腸桿菌表達(dá)的策略 第2節(jié) 細(xì)菌裂解方法和包涵體復(fù)性技術(shù) 第3節(jié) 融合蛋白的酶解和化學(xué)裂解方法 第4節(jié) 實(shí)用舉例第8章 酵母菌遺傳學(xué)方法 第1節(jié) 酵母菌的培養(yǎng) 第2節(jié) 酵母菌DNA分離 第3節(jié) 酵母菌RNA的制備 第4節(jié) 酵母菌蛋白質(zhì)的提取 第5節(jié) 外源DNA導(dǎo)入酵母細(xì)胞的方法第9章 酵母雙雜交技術(shù)第10章 噬菌體展示技術(shù) 第1節(jié) 噬菌體展示技術(shù)簡(jiǎn)介 第2節(jié) 噬菌體隨機(jī)肽庫(kù)的構(gòu)建與篩選 第3節(jié) 噬菌體抗體庫(kù)技術(shù)第11章 轉(zhuǎn)基因小鼠模型的建立第12章 哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的RNA干擾技術(shù)第13章 細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路檢測(cè)技術(shù) 第1節(jié) 概述 第2節(jié) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的基本研究思路和方法 第3節(jié) 蛋白激酶的檢測(cè)附錄 通用試劑與緩沖液的配制主要參考文獻(xiàn)
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