細(xì)胞與分子生物學(xué)常用實(shí)驗(yàn)技術(shù)

前言

　　在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究中，基本上都要涉及細(xì)胞和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)。對于多數(shù)實(shí)驗(yàn)原理，即使剛接觸實(shí)驗(yàn)的人，也會了解得比較透徹。然而在實(shí)驗(yàn)技術(shù)上，即使專業(yè)的研究技術(shù)人員，也有很多實(shí)驗(yàn)技巧需要注意，更別提初學(xué)者了。縱觀整個(gè)圖書市場，關(guān)于細(xì)胞和分子生物學(xué)的參考書很多，但往往側(cè)重于實(shí)驗(yàn)原理與最新進(jìn)展，對實(shí)驗(yàn)技術(shù)和技巧的講解不夠深入和透徹。為了改變這一現(xiàn)狀，更利于初學(xué)者順利地完成研究計(jì)劃，我們組織了一群年富力強(qiáng)的博士研究生們站在初學(xué)者的角度編寫了這本《細(xì)胞與分子生物學(xué)常用實(shí)驗(yàn)技術(shù)》?！　∪珪卜?1章。第一章講述了細(xì)胞

內(nèi)容概要

全書共分11章。第一章講述了細(xì)胞學(xué)常用的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，第二章至第十一章則重點(diǎn)闡述了分子生物學(xué)常用的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。本書有以下幾個(gè)特點(diǎn)：一是編寫人員大部分為在讀的博士研究生，對所寫的實(shí)驗(yàn)技術(shù)非常熟悉，而且對實(shí)驗(yàn)技術(shù)有著自己獨(dú)特的見解；二是所涉及內(nèi)容均是最常用而且成熟的實(shí)驗(yàn)方法；三是側(cè)重于實(shí)驗(yàn)的具體操作、注意事項(xiàng)以及個(gè)人的體會；四是從初學(xué)者的角度出發(fā)，符合初學(xué)者的需要，也可為從事基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究的人員提供幫助；五是在本書中，每一章節(jié)都附有作者的聯(lián)系方式，若遇到相關(guān)問題，可以與作者進(jìn)行交流。

書籍目錄

第一章 細(xì)胞及組織學(xué)常用實(shí)驗(yàn)技術(shù)　第一節(jié) 細(xì)胞凍存　第二節(jié) 細(xì)胞復(fù)蘇　第三節(jié) 細(xì)胞計(jì)數(shù)法測定生長曲線　第四節(jié) MTT法測定生長曲線　第五節(jié) 平板克隆形成實(shí)驗(yàn)　第六節(jié) 軟瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn)　第七節(jié) Transwell　第八節(jié) 細(xì)胞周期的測定　第九節(jié) 細(xì)胞凋亡檢測　第十節(jié) 裸鼠移植瘤動(dòng)物模型　第十一節(jié) 真核轉(zhuǎn)染　第十二節(jié) 免疫組織化學(xué)及免疫細(xì)胞化學(xué)　第十三節(jié) 福爾馬林固定石蠟包埋組織的原位熒光雜交方法　第十四節(jié) 臨床標(biāo)本收集方法第二章 PCR技術(shù)　　第一節(jié) RT—PCR　第二節(jié) 熒光定量PCR第三章 分子克隆常用技術(shù)　第一節(jié) 感受態(tài)的制備　第二節(jié) 轉(zhuǎn)化　第三節(jié) 質(zhì)粒提取　第四節(jié) 瓊脂糖凝膠電泳　第五節(jié) 凝膠回收　第六節(jié) 重組DNA的構(gòu)建第四章 病毒載體的構(gòu)建　第一節(jié) 復(fù)制缺陷型腺病毒載體的構(gòu)建　第二節(jié) 慢病毒載體的包裝第五章 RNAi技術(shù)第六章 蛋白原核表達(dá)與純化第七章 酵母雙雜交篩選相互作用蛋白及驗(yàn)證　第一節(jié) 基本原理及應(yīng)用　第二節(jié) 酵母雙雜交實(shí)驗(yàn)的基本流程　第三節(jié) 酵母雙雜交實(shí)驗(yàn)具體實(shí)驗(yàn)步驟第八章 western—blot第九章 轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)制研究的策略第十章 基因組DNA提取及甲基化分析第十一章 實(shí)驗(yàn)研究中基本的生物信息學(xué)技術(shù)

章節(jié)摘錄

　　第一章　細(xì)胞及組織學(xué)常用實(shí)驗(yàn)技術(shù)　　第一節(jié)　細(xì)胞凍存　　一、基本原理及實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹　〖?xì)胞凍存是通過向培養(yǎng)液中加入保護(hù)劑，減少凍存過程中細(xì)胞內(nèi)冰晶形成，來保護(hù)細(xì)胞，是保存細(xì)胞的最基本方法。二、主要儀器及試劑　　1.0.25％胰蛋白酶：稱取胰蛋白酶粉末0.259，加入100ml PBS，充分溶解后過濾除菌備用，4℃保存?！　?.含20％胎牛血清的培養(yǎng)液：將培養(yǎng)液和胎牛血清按4：1比例混合，過濾除菌備用，4℃保存?！　?.細(xì)胞凍存液：含20％胎牛血清的培養(yǎng)液和DMSO按照9：1比例混合，

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