免疫膠體金技術臨床應用

前言

免疫標記學自20世紀60年代創(chuàng)立以來，隨著新理論、新方法、新材料、新工藝、新產品不斷開發(fā)，促使標記免疫分析技術向縱深處發(fā)展。目前已形成有多種標記、多種反應模式的綜合性標記免疫分析體系，集基礎醫(yī)學、實驗技術和臨床應用于一體。1971年Faulk和Faytor將膠體金引入免疫化學，此后，免疫膠體金技術成為繼酶免疫標記、放射性免疫標記和熒光免疫標記三大標記技術之后的又一較為成熟的、并且得到廣泛應用的重要技術，且隨著單克隆技術的成熟和納米技術的興起而逐漸得到完善和發(fā)展。免疫膠體金技術是以膠體金作為示蹤標志物應用于抗原抗體反應的一種免疫標記技術。免疫膠體金技術是一種常用的標記技術，有其獨特的優(yōu)點，具有操作方法簡單快速、敏感性高、特異性強、穩(wěn)定性好、結果準確、易于判定等優(yōu)點，對于從實驗室研究到臨床疾病輔助診斷都有一定的作用。免疫膠體金技術作為一種新型免疫標記技術，已廣泛應用于眾多領域，如腫瘤、心血管疾病、感染性疾病、消化系統(tǒng)疾病、毒品檢測等。通過與電鏡／光鏡、流式細胞儀、凝集試驗、蛋白印記技術、免疫層析等實驗技術相結合，可定量或半定量測定內分泌激素、蛋白質、多糖、核酸、神經遞質、受體、細胞因子、細胞表面抗原、腫瘤標志物、血藥濃度等各種生物活性物質。目前在醫(yī)學檢驗中的應用主要是免疫層析法（immunochroma-tography）和快速免疫金滲濾法（Dot-immuogold filtration assay，DIGFA），用于檢測HB-sAg、HCG和抗雙鏈DNA抗體等，具有簡單、快速、準確和無污染等優(yōu)點。而將膠體金標記技術與床旁檢測診斷技術（pinit-of_care testing，POCT）相結合，能快速獲得結果，操作簡單且設備小型化便于攜帶，能有效指導醫(yī)師制訂治療方案，病人也能及時了解自己的病情。這一技術適應現(xiàn)代社會發(fā)展的需要，并為床旁檢測診斷技術開拓了新的發(fā)展空間。本書主要針對國內外臨床實驗室最具使用前景及目前使用比較廣泛的膠體金標記技術，從原理、制備、應用、產品研發(fā)、質控等不同方面對其進行詳細而全面的介紹，以期為從事臨床及實驗室工作的人員提供參考性建議。在本書編寫過程中，各個實驗室及在檢驗一線工作的同道們給了我很好的啟發(fā)，也是在大家團隊合作以及對臨床檢驗的熱愛、對免疫標記技術熟練掌握的基礎上共同撰寫完成的。

內容概要

免疫膠體金技術是以膠體金作為標記物應用于抗原抗體反應的免疫學核心技術，廣泛用于免疫學、組織學、病理學和細胞生物學領域。本書共分4章，分別介紹了免疫膠體金技術的原理和特點，制備和標記方法，主要應用技術如滲濾技術、層析技術，以及在電鏡、光鏡水平的聯(lián)合應用；并且著重介紹了膠體金技術在臨床實驗診斷各領域的廣泛應用。本書不是單純的操作手冊，而是采用圖、文、表相結合的形式對應用領域的相關原理、方法學比較、結果判定、質量控制、關鍵技術等環(huán)節(jié)逐一說明，做到了層次清晰，表達準確、系統(tǒng)、易懂、實用。本書適合從事免疫相關的生命科學領域廣大技術人員和大中專在校生參考，對開展膠體金實驗的研究生也具有指導價值。

書籍目錄

第一章  免疫膠體金技術原理和特點  1  免疫標記分析技術原理  2  免疫膠體金技術基本原理及應用領域  3  免疫膠體金的制備、標記第二章  免疫膠體金技術的應用  1  免疫膠體金在電鏡水平的應用  2  免疫膠體金在光鏡水平的應用  3  免疫膠體金滲濾技術  4  免疫膠體金層析技術  5  免疫膠體金微陣列技術第三章  免疫膠體金技術在實驗診斷中的應用  1  腫瘤標志物檢測  2  自身抗體檢測  3  兒童疾病檢測  4  藥物殘留檢測  5  心血管標志物檢測  6  感染性疾病檢測  7  毒品檢測  8  早孕檢測  9  消化系統(tǒng)疾病檢測第四章  免疫膠體金產品研發(fā)及質控  1  免疫膠體金產品在POCT中的應用及研發(fā)  2  免疫膠體金產品質控現(xiàn)狀

章節(jié)摘錄

插圖：1.1.2標記免疫分析的發(fā)展現(xiàn)狀自從Berson和Yalow創(chuàng)立放射免疫分析（RIA）法以來，標記免疫分析即進入了蓬勃發(fā)展的時期，20世紀60年代中期建立了固相抗體分離方法的概念，60年代末期創(chuàng)立了免疫放射分析（IRMA），這一方法中典型的模式是雙位點夾心法，其靈敏度、特異性、線性范圍均優(yōu)于液相競爭的放射免疫分析。70年代中期，雜交瘤技術問世，體外合成單克隆抗體成功；可以制備許多特異性強的單克隆抗體，使免疫放射分析進入了實用化階段，80年代中后期在許多醫(yī)學科研院所和各級醫(yī)院的應用范圍已經達到相當普及的程度。放射免疫分析的發(fā)展還與固相材料的研究，如試管固相RIA和IRMA技術、雙位點夾心固相技術等有關。生物素和親和素系統(tǒng)（BAS）與試管固相抗原技術相結合，建成新型BAS-IRMA固相抗原競爭法，利用生物素～親和素系統(tǒng)的高親和力和放大效應，使RIA具有更好的分離效果和更高的靈敏度。20世紀80年代末90年代初期由于基因克隆與DNA重組技術的應用，使標記免疫分析獲得更多高質量的單克隆抗體。酶標記免疫分析（E1A）自20世紀70年代初建立以來，由于標記物來源豐富、價格低廉、檢測方便、無放射性污染，另一重要優(yōu)點是酶標記物的有效期長，正常保存期可超過一年，因此發(fā)展迅速。1 975年雜交瘤技術產生大量的各種單抗，大大促進了EIA的發(fā)展，90年代后期在EIA中引進放大系統(tǒng)，主要是生物素一親和素系統(tǒng)的應用，使測定的靈敏度趕上或超過RIA，目前EIA是標記免疫分析發(fā)展的重要組成部分。

編輯推薦

《免疫膠體金技術臨床應用》是國家“十一五”重點圖書出版項目·生物醫(yī)學實驗技術系列叢書。

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