免疫膠體金技術(shù)臨床應(yīng)用

前言

免疫標(biāo)記學(xué)自20世紀(jì)60年代創(chuàng)立以來，隨著新理論、新方法、新材料、新工藝、新產(chǎn)品不斷開發(fā)，促使標(biāo)記免疫分析技術(shù)向縱深處發(fā)展。目前已形成有多種標(biāo)記、多種反應(yīng)模式的綜合性標(biāo)記免疫分析體系，集基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、實(shí)驗(yàn)技術(shù)和臨床應(yīng)用于一體。1971年Faulk和Faytor將膠體金引入免疫化學(xué)，此后，免疫膠體金技術(shù)成為繼酶免疫標(biāo)記、放射性免疫標(biāo)記和熒光免疫標(biāo)記三大標(biāo)記技術(shù)之后的又一較為成熟的、并且得到廣泛應(yīng)用的重要技術(shù)，且隨著單克隆技術(shù)的成熟和納米技術(shù)的興起而逐漸得到完善和發(fā)展。免疫膠體金技術(shù)是以膠體金作為示蹤標(biāo)志物應(yīng)用于抗原抗體反應(yīng)的一種免疫標(biāo)記技術(shù)。免疫膠體金技術(shù)是一種常用的標(biāo)記技術(shù)，有其獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)，具有操作方法簡(jiǎn)單快速、敏感性高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好、結(jié)果準(zhǔn)確、易于判定等優(yōu)點(diǎn)，對(duì)于從實(shí)驗(yàn)室研究到臨床疾病輔助診斷都有一定的作用。免疫膠體金技術(shù)作為一種新型免疫標(biāo)記技術(shù)，已廣泛應(yīng)用于眾多領(lǐng)域，如腫瘤、心血管疾病、感染性疾病、消化系統(tǒng)疾病、毒品檢測(cè)等。通過與電鏡／光鏡、流式細(xì)胞儀、凝集試驗(yàn)、蛋白印記技術(shù)、免疫層析等實(shí)驗(yàn)技術(shù)相結(jié)合，可定量或半定量測(cè)定內(nèi)分泌激素、蛋白質(zhì)、多糖、核酸、神經(jīng)遞質(zhì)、受體、細(xì)胞因子、細(xì)胞表面抗原、腫瘤標(biāo)志物、血藥濃度等各種生物活性物質(zhì)。目前在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用主要是免疫層析法（immunochroma-tography）和快速免疫金滲濾法（Dot-immuogold filtration assay，DIGFA），用于檢測(cè)HB-sAg、HCG和抗雙鏈DNA抗體等，具有簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確和無污染等優(yōu)點(diǎn)。而將膠體金標(biāo)記技術(shù)與床旁檢測(cè)診斷技術(shù)（pinit-of_care testing，POCT）相結(jié)合，能快速獲得結(jié)果，操作簡(jiǎn)單且設(shè)備小型化便于攜帶，能有效指導(dǎo)醫(yī)師制訂治療方案，病人也能及時(shí)了解自己的病情。這一技術(shù)適應(yīng)現(xiàn)代社會(huì)發(fā)展的需要，并為床旁檢測(cè)診斷技術(shù)開拓了新的發(fā)展空間。本書主要針對(duì)國內(nèi)外臨床實(shí)驗(yàn)室最具使用前景及目前使用比較廣泛的膠體金標(biāo)記技術(shù)，從原理、制備、應(yīng)用、產(chǎn)品研發(fā)、質(zhì)控等不同方面對(duì)其進(jìn)行詳細(xì)而全面的介紹，以期為從事臨床及實(shí)驗(yàn)室工作的人員提供參考性建議。在本書編寫過程中，各個(gè)實(shí)驗(yàn)室及在檢驗(yàn)一線工作的同道們給了我很好的啟發(fā)，也是在大家團(tuán)隊(duì)合作以及對(duì)臨床檢驗(yàn)的熱愛、對(duì)免疫標(biāo)記技術(shù)熟練掌握的基礎(chǔ)上共同撰寫完成的。

內(nèi)容概要

免疫膠體金技術(shù)是以膠體金作為標(biāo)記物應(yīng)用于抗原抗體反應(yīng)的免疫學(xué)核心技術(shù)，廣泛用于免疫學(xué)、組織學(xué)、病理學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域。本書共分4章，分別介紹了免疫膠體金技術(shù)的原理和特點(diǎn)，制備和標(biāo)記方法，主要應(yīng)用技術(shù)如滲濾技術(shù)、層析技術(shù)，以及在電鏡、光鏡水平的聯(lián)合應(yīng)用；并且著重介紹了膠體金技術(shù)在臨床實(shí)驗(yàn)診斷各領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用。本書不是單純的操作手冊(cè)，而是采用圖、文、表相結(jié)合的形式對(duì)應(yīng)用領(lǐng)域的相關(guān)原理、方法學(xué)比較、結(jié)果判定、質(zhì)量控制、關(guān)鍵技術(shù)等環(huán)節(jié)逐一說明，做到了層次清晰，表達(dá)準(zhǔn)確、系統(tǒng)、易懂、實(shí)用。本書適合從事免疫相關(guān)的生命科學(xué)領(lǐng)域廣大技術(shù)人員和大中專在校生參考，對(duì)開展膠體金實(shí)驗(yàn)的研究生也具有指導(dǎo)價(jià)值。

書籍目錄

第一章  免疫膠體金技術(shù)原理和特點(diǎn)  1  免疫標(biāo)記分析技術(shù)原理  2  免疫膠體金技術(shù)基本原理及應(yīng)用領(lǐng)域  3  免疫膠體金的制備、標(biāo)記第二章  免疫膠體金技術(shù)的應(yīng)用  1  免疫膠體金在電鏡水平的應(yīng)用  2  免疫膠體金在光鏡水平的應(yīng)用  3  免疫膠體金滲濾技術(shù)  4  免疫膠體金層析技術(shù)  5  免疫膠體金微陣列技術(shù)第三章  免疫膠體金技術(shù)在實(shí)驗(yàn)診斷中的應(yīng)用  1  腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)  2  自身抗體檢測(cè)  3  兒童疾病檢測(cè)  4  藥物殘留檢測(cè)  5  心血管標(biāo)志物檢測(cè)  6  感染性疾病檢測(cè)  7  毒品檢測(cè)  8  早孕檢測(cè)  9  消化系統(tǒng)疾病檢測(cè)第四章  免疫膠體金產(chǎn)品研發(fā)及質(zhì)控  1  免疫膠體金產(chǎn)品在POCT中的應(yīng)用及研發(fā)  2  免疫膠體金產(chǎn)品質(zhì)控現(xiàn)狀

章節(jié)摘錄

插圖：1.1.2標(biāo)記免疫分析的發(fā)展現(xiàn)狀自從Berson和Yalow創(chuàng)立放射免疫分析（RIA）法以來，標(biāo)記免疫分析即進(jìn)入了蓬勃發(fā)展的時(shí)期，20世紀(jì)60年代中期建立了固相抗體分離方法的概念，60年代末期創(chuàng)立了免疫放射分析（IRMA），這一方法中典型的模式是雙位點(diǎn)夾心法，其靈敏度、特異性、線性范圍均優(yōu)于液相競(jìng)爭(zhēng)的放射免疫分析。70年代中期，雜交瘤技術(shù)問世，體外合成單克隆抗體成功；可以制備許多特異性強(qiáng)的單克隆抗體，使免疫放射分析進(jìn)入了實(shí)用化階段，80年代中后期在許多醫(yī)學(xué)科研院所和各級(jí)醫(yī)院的應(yīng)用范圍已經(jīng)達(dá)到相當(dāng)普及的程度。放射免疫分析的發(fā)展還與固相材料的研究，如試管固相RIA和IRMA技術(shù)、雙位點(diǎn)夾心固相技術(shù)等有關(guān)。生物素和親和素系統(tǒng)（BAS）與試管固相抗原技術(shù)相結(jié)合，建成新型BAS-IRMA固相抗原競(jìng)爭(zhēng)法，利用生物素～親和素系統(tǒng)的高親和力和放大效應(yīng)，使RIA具有更好的分離效果和更高的靈敏度。20世紀(jì)80年代末90年代初期由于基因克隆與DNA重組技術(shù)的應(yīng)用，使標(biāo)記免疫分析獲得更多高質(zhì)量的單克隆抗體。酶標(biāo)記免疫分析（E1A）自20世紀(jì)70年代初建立以來，由于標(biāo)記物來源豐富、價(jià)格低廉、檢測(cè)方便、無放射性污染，另一重要優(yōu)點(diǎn)是酶標(biāo)記物的有效期長(zhǎng)，正常保存期可超過一年，因此發(fā)展迅速。1 975年雜交瘤技術(shù)產(chǎn)生大量的各種單抗，大大促進(jìn)了EIA的發(fā)展，90年代后期在EIA中引進(jìn)放大系統(tǒng)，主要是生物素一親和素系統(tǒng)的應(yīng)用，使測(cè)定的靈敏度趕上或超過RIA，目前EIA是標(biāo)記免疫分析發(fā)展的重要組成部分。

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《免疫膠體金技術(shù)臨床應(yīng)用》是國家“十一五”重點(diǎn)圖書出版項(xiàng)目·生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)系列叢書。

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