出版時間:2012-1 出版社:北京大學(xué)醫(yī)學(xué)出版社有限公司 作者:谷鴻喜,張鳳民,凌虹 主編 頁數(shù):330
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內(nèi)容概要
醫(yī)學(xué)科學(xué)研究飛速發(fā)展,醫(yī)學(xué)研究的手段相互交叉、跨越和滲透,促進了醫(yī)學(xué)各學(xué)科的進步。細胞培養(yǎng)技術(shù)在醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域中是許多學(xué)科間交叉和系統(tǒng)研究的重要手段之一,在病毒學(xué)、免疫學(xué)、細胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、遺傳學(xué)、毒理學(xué)和藥理學(xué)等學(xué)科中得到了廣泛的應(yīng)用。細胞培養(yǎng)技術(shù)為深入探討疾病發(fā)生、發(fā)展機制,為尋找疾病有效地治療途徑提供了重要的研究技術(shù)平臺。因此,細胞培養(yǎng)技術(shù)是高等醫(yī)學(xué)院校許多基礎(chǔ)和臨床等專業(yè)的研究生在進行課題研究時希望掌握和應(yīng)用的技術(shù)。為了適應(yīng)研究生在實驗研究中的需要,我們學(xué)校從1998年就開設(shè)了“組織與細胞培養(yǎng)技術(shù)”課程,因此,在多年教學(xué)的基礎(chǔ)上,我們編寫了這本《細胞培養(yǎng)技術(shù)》。該教材適用于包括基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、預(yù)防醫(yī)學(xué)和藥學(xué)等醫(yī)學(xué)各類專業(yè)研究生的需要。
書籍目錄
緒論
第一節(jié) 細胞培養(yǎng)技術(shù)發(fā)展簡史
第二節(jié) 組織培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用
第一篇 基本理論知識
第一章 體外培養(yǎng)細胞的特征
第一節(jié) 培養(yǎng)細胞生物學(xué)特征
第二節(jié) 培養(yǎng)細胞生存條件和代謝
第三節(jié) 體外培養(yǎng)細胞成功率分析
第四節(jié) 細胞系或細胞株的建立
第二篇 細胞培養(yǎng)技術(shù)
第二章 細胞培養(yǎng)的基本條件
第一節(jié) 細胞培養(yǎng)的實驗設(shè)施及器材
第二節(jié) 實驗器材的處理
第三節(jié) 細胞培養(yǎng)常用培養(yǎng)液及試劑
第三章 細胞培養(yǎng)的基本實驗技術(shù)
第一節(jié) 無菌技術(shù)
第二節(jié) 標本采集的選擇與處理
第三節(jié) 單細胞的制備
第四節(jié) 初代細胞培養(yǎng)法
第五節(jié) 傳代細胞培養(yǎng)法
第六節(jié) 懸浮細胞培養(yǎng)法
第七節(jié) 玻片培養(yǎng)法
第八節(jié) 細胞計數(shù)法
第九節(jié) 細胞凍存、復(fù)蘇與運輸
第十節(jié) 細胞污染的檢測與排除
第四章 動物組織細胞培養(yǎng)技術(shù)
第一節(jié) 大鼠肝細胞培養(yǎng)
第二節(jié) 新生兔腎細胞培養(yǎng)
第三節(jié) 大鼠胰島細胞培養(yǎng)
第四節(jié) 動物心肌細胞培養(yǎng)
第五節(jié) 兔軟骨細胞培養(yǎng)
第六節(jié) 新生大鼠骨骼肌細胞培養(yǎng)
第七節(jié) 兔主動脈平滑肌細胞培養(yǎng)
第八節(jié) 兔主動脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)
第九節(jié) 大鼠神經(jīng)組織細胞培養(yǎng)
第十節(jié) 小鼠骨髓細胞培養(yǎng)
第十一節(jié) 雞胚成纖維細胞培養(yǎng)
第五章 人源組織細胞培養(yǎng)技術(shù)
第一節(jié) 人胚腎細胞培養(yǎng)
第二節(jié) 人胚肺二倍體細胞培養(yǎng)
第三節(jié) 人表皮角質(zhì)形成細胞的培養(yǎng)
第四節(jié) 人臍帶血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)
第五節(jié) 腫瘤細胞的培養(yǎng)
第六節(jié) 羊水細胞的培養(yǎng)
第七節(jié) 淋巴細胞分離培養(yǎng)
第六章 干細胞培養(yǎng)技術(shù)
第一節(jié) 飼養(yǎng)層細胞制備
第二節(jié) 胚胎干細胞的分離培養(yǎng)
第三節(jié) 成體干細胞的分離培養(yǎng)
第四節(jié) 腫瘤干細胞的分離培養(yǎng)
第五節(jié) 干細胞生物學(xué)性狀鑒定
第三篇 細胞培養(yǎng)檢測技術(shù)
第七章 細胞培養(yǎng)形態(tài)學(xué)檢查
第一節(jié) 生長狀態(tài)及一般形態(tài)檢查
第二節(jié) 倒置光學(xué)顯微鏡檢測法
第三節(jié) 熒光顯微鏡檢測法
第四節(jié) 電子顯微鏡檢測法
第八章 細胞活性和增殖的檢測
第一節(jié) 細胞計數(shù)
第二節(jié) 細胞活性的檢查
第三節(jié) 細胞生長曲線法
第四節(jié) 細胞克隆形成試驗
第五節(jié) 軟瓊脂集落形成試驗
第九章 細胞培養(yǎng)分析技術(shù)
第一節(jié) 細胞遺傳學(xué)檢測技術(shù)
第二節(jié) 細胞DNA的檢測
第三節(jié) 細胞RNA的檢測
第四節(jié) 細胞基因表達產(chǎn)物的檢測
第五節(jié) 細胞酶活性的檢定
第六節(jié) 細胞凋亡的檢測
……
第四篇 細胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用
附錄
1.中英文詞匯對照索引
2.實驗室常用的細胞系
3.實驗室常用人工合成的細胞培養(yǎng)基
4.細胞培養(yǎng)相關(guān)實驗用緩沖液
章節(jié)摘錄
版權(quán)頁:插圖:腫瘤對人類健康危害極大,但由于其發(fā)生因素復(fù)雜,包括體內(nèi)因素和環(huán)境因素,如遺傳因素,物理、化學(xué)、生物因素等,導(dǎo)致各種腫瘤的發(fā)生機制各不相同。至今尚有許多腫瘤的發(fā)病機制、準確診斷、有效治療均不明確,尚需深入研究。腫瘤細胞具有永生性,在體外可以無限傳代培養(yǎng),因此體外細胞培養(yǎng)技術(shù)則成為研究腫瘤細胞生物學(xué)特性、腫瘤發(fā)生機制以及腫瘤藥物的篩選等重要手段。本章主要介紹細胞轉(zhuǎn)化試驗、腫瘤細胞浸潤實驗、腫瘤細胞癌基因及抑癌基因檢測等方面的相關(guān)實驗。第一節(jié) 培養(yǎng)細胞轉(zhuǎn)化實驗細胞惡性轉(zhuǎn)化,即癌變,是一個發(fā)生在體內(nèi)的過程,但在細胞培養(yǎng)條件下,可以用人工方法誘發(fā)產(chǎn)生,建立體外癌變模型。因此,人工誘發(fā)體外培養(yǎng)細胞的轉(zhuǎn)化,是研究癌變原理的重要方法,其優(yōu)點不僅是重復(fù)性好,可廣泛用于研究可疑致癌因素的作用和檢測環(huán)境中的致癌物,并且在細胞發(fā)生轉(zhuǎn)化后,能夠進行直接觀察和做各種分析。為此,這一技術(shù)當前在國內(nèi)外已普遍應(yīng)用。轉(zhuǎn)化實驗的方法主要包括人工誘導(dǎo)細胞轉(zhuǎn)化、試管內(nèi)誘發(fā)癌實驗法和體內(nèi)分化誘導(dǎo)方法。一、人工誘發(fā)細胞惡性轉(zhuǎn)化在細胞培養(yǎng)條件下,用化學(xué)、物理和生物等各種致癌物可人為地誘發(fā)細胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。條件是要讓細胞直接受到致癌物的作用,從細胞受到作用后到發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化一般需兩周到三個月的時間。
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《細胞培養(yǎng)技術(shù)》是全國高等醫(yī)學(xué)院校研究生教材之一。
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