現(xiàn)代植物細(xì)胞與分子生物學(xué)實(shí)用技術(shù)解析

出版時(shí)間:2011-6  出版社:中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社  作者:崔娜 等 著  頁數(shù):318  

內(nèi)容概要

  《現(xiàn)代植物細(xì)胞與分子生物學(xué)實(shí)用技術(shù)解析》著作是作者所在實(shí)驗(yàn)室長期以來課題研究中所涉及的實(shí)驗(yàn)技術(shù)方法匯總,主要介紹了分子生物學(xué)常用的一些基本實(shí)驗(yàn)方法和技術(shù),以及應(yīng)用這些方法和技術(shù)取得的部分成果的實(shí)例。本著作適用于生命科學(xué)各個(gè)專業(yè)的研究生學(xué)習(xí),也可供從事相關(guān)研究工作的教師、研究人員參考。

書籍目錄

基礎(chǔ)篇專題一 堿裂解法提取質(zhì)粒DNA專題二 質(zhì)粒的酶切鑒定、電泳及DNA片段回收專題三 RNA的提取專題四 基因保守序列的克隆和質(zhì)粒的提取專題五 用于Northern雜交的探針制備與標(biāo)記應(yīng)用篇專題六 Northern雜交——酸性轉(zhuǎn)化酶基因表達(dá)分析專題七 分子標(biāo)記技術(shù)——番茄耐低溫相關(guān)基因的SRAP標(biāo)記篩選專題八 半定量RT-PCR專題九 反轉(zhuǎn)錄PCR和實(shí)時(shí)熒光定量PCR法專題十 免疫印跡技術(shù)——植物總蛋白或膜蛋白的免疫印跡技術(shù)專題十一 酵母雙雜交技術(shù)專題十二 免疫熒光技術(shù)——植物細(xì)胞微管的免疫熒光染色專題十三 GUS活性測定方法——擬南芥微管結(jié)合蛋白MAPl8組織特異性的表達(dá)專題十四 兩相分配法制備質(zhì)膜及其純度鑒定成果篇The Role of OsHAL3 Protein, a Putative 4'-CPhosphopantothenoylcysteine Decarboxylase in Rice外源生長素類物質(zhì)對(duì)番茄果實(shí)蔗糖代謝關(guān)鍵酶活性及基因表達(dá)的影響Salt Tolerance Requires Cortical Microtubule Reorganization in ArabidopsisThe Microfilament Cytoskeleton Plays a Vital Role in Salt and Osmotic Stress Tolerance in Arabidopsis附錄附錄1 常用試劑、溶液及緩沖液的配制附錄2 常用培養(yǎng)基和抗生素的配制附錄3 生物樣品的貯存、郵送與實(shí)驗(yàn)室安全附錄4 常用生物學(xué)數(shù)據(jù)

章節(jié)摘錄

  2.膠液的制備  稱取0.4g瓊脂糖,置于200mL錐形瓶中,加入50mL0.5×TBE稀釋緩沖液,放入微波爐里(或電爐上)加熱至瓊脂糖全部熔化,取出搖勻,此為0.89/5瓊脂糖凝膠液。加熱過程中要不時(shí)搖動(dòng),使附于瓶壁上的瓊脂糖顆粒進(jìn)入溶液。加熱時(shí)應(yīng)蓋上封EI膜,以減少水分蒸發(fā)?! ?.膠板的制備  將有機(jī)玻璃膠槽兩端分別用橡皮膏(寬約1cm)緊密封住。將封好的膠槽置于水平支持物上,插上樣品梳子,注意觀察梳子齒下緣應(yīng)與膠槽底面保持1mm左右的間隙?! ∮靡埔浩魑∩倭咳诨沫傊悄z封橡皮膏內(nèi)側(cè),待瓊脂糖溶液凝固后將剩余的瓊脂糖小心地倒入膠槽內(nèi),使膠液形成均勻的膠層。倒膠時(shí)的溫度不可太低,否則凝固不均勻,速度也不可太快,否則容易出現(xiàn)氣泡。待膠完全凝固后拔出梳子,注意不要損傷梳底部的凝膠,然后向槽內(nèi)加入0.5×TBE稀釋緩沖液至液面恰好沒過膠板上表面。因邊緣效應(yīng)樣品槽附近會(huì)有一些隆起,阻礙緩沖液進(jìn)入樣品槽中,所以要注意保證樣品槽中注滿緩沖液。  ……

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