生物化學實驗

前言

生物化學是醫(yī)學院和各類綜合性大學生命科學的基礎課，亦是許多農(nóng)林院校大多數(shù)專業(yè)的專業(yè)基礎課，而該課程的學習必須建立在堅實的實驗基礎之上，因此，生物化學實驗是生物化學教學的重要組成部分。生物化學實驗教學不僅能加深學生對理論知識的理解，而且在培養(yǎng)學生實驗操作技能，實際分析和解決問題的能力以及培養(yǎng)獨立工作能力和嚴謹求實的科學態(tài)度等方面具有不可替代的作用。隨著生命科學的迅猛發(fā)展，各種生物實驗技術的不斷改進和更新，原有生物化學實驗教材在實驗教學的系統(tǒng)性、實用性和先進性等方面都存在不同程度的不足。為適應高等院校面向21世紀教學改革的需要，加強對學生能力、素質(zhì)和創(chuàng)新意識的培養(yǎng)，四川農(nóng)業(yè)大學生物化學課題組按照《生物化學實驗教學大綱》的要求，在總結(jié)多年開設生物化學實驗課的基礎上，廣泛汲取兄弟院校生物化學實驗教學的寶貴經(jīng)驗，參閱有關資料編纂了該《生物化學實驗》。本教程注意實驗內(nèi)容編排的實用性、科學性和先進性，并盡可能覆蓋生物化學相關實驗技術。全書分為兩部分，第一部分重點介紹生物化學實驗的基本要求與常用儀器的使用方法，使學生對生物化學實驗從理論角度上加以感知，了解各種生物化學實驗技術的基本原理、方法和應用，同時也為學生和其他讀者提供一個較為完整的實驗技術指南；第二部分為實驗，包括基礎性實驗和綜合性實驗?；A性實驗部分，本書選取了糖、蛋白質(zhì)、酶、維生素、核酸、代謝共六個系列，并分類編排。每個實驗項目包括目的、原理、器材與試劑、操作步驟、結(jié)果處理和注意事項等，力求做到簡明扼要，操作具體，充分體現(xiàn)實驗技能訓練的實用性。綜合性實驗部分，本書編撰了三個帶有設計理念的實驗內(nèi)容，有目的的通過這一部分的實驗進一步提高學生的理解能力、實踐能力和分析能力，并促進學生創(chuàng)造性思維的形成，提高學生對科學研究的興趣。最后，在本書的附錄部分，我們匯集了生物化學實驗中常用的各種緩沖溶液配方等相關數(shù)據(jù)資料，以方便讀者查閱。在本書的編撰過程中，我們參考了同行專家、學者已出版的生物化學實驗技術方面的書籍及一些網(wǎng)絡資料，在此對相關作者表示衷心感謝！參加本書編寫的人員有茍琳、單志、王曉麗、晏本菊、陳惠、吳琦、張軍杰和韓學易。本書可供高等院校生物工程、生物科學、食品工程、醫(yī)學等專業(yè)作為實驗課教材，也可供相關專業(yè)教師和科研人員參考。鑒于編者水平有限，書中不足之處在所難免，敬請讀者批評指正。

內(nèi)容概要

《生物化學實驗》教程注意實驗內(nèi)容編排的實用性、科學性和先進性，并盡可能覆蓋生物化學相關實驗技術。全書分為兩部分，第一部分重點介紹生物化學實驗的基本要求與常用儀器的使用方法；第二部分為實驗，包括基礎性實驗和綜合性實驗。

書籍目錄

第一部分  生物化學實驗基本要求與常用儀器使用方法　第一章  生物化學實驗基本操作　第二章  生物活性成分的制備　第三章  分光光度技術　第四章  熒光光譜技術　第五章  層析技術　第六章  電泳技術　第七章  離心技術第二部分  實驗　第八章 糖　  實驗一  總糖和還原糖測定(3，5-二硝基水楊酸法)　  實驗二  蒽酮比色定糖法　  實驗三  血液葡萄糖含量的測定(Folin-Wu法)　第九章  蛋白質(zhì)　  實驗四  蛋白質(zhì)含量的測定　  Ⅰ．凱氏定氮法測定蛋白質(zhì)含量　  Ⅱ．紫外吸收法測定蛋白質(zhì)含量　  Ⅲ．雙縮脲(Biuret)法測定蛋白質(zhì)含量　  Ⅳ．Folin-酚法測定蛋白質(zhì)含量　  Ⅴ．考馬斯亮藍G-250法測定蛋白質(zhì)含量　  實驗五  醋酸纖維薄膜電泳分離血清蛋白質(zhì)　  實驗六  不連續(xù)聚丙烯酰胺凝膠電泳分離預染的血清脂蛋白　  實驗七  SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳測定蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量　  實驗八  凝膠層析法測定蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量　  實驗九  植物組織中游離氨基酸的分離鑒定　  實驗十  蛋白質(zhì)兩性解離及等電點的測定　第十章 酶　  實驗十一  影響酶作用的因素　  實驗十二  過氧化氫酶活力的測定　  實驗十三  淀粉酶活力的測定?　  實驗十四  植酸酶活性的測定　  實驗十五  蛋白酶活性的測定　  實驗十六  血清堿性磷酸酶活性的測定　第十一章  維生素　  實驗十七  維生素C的定量測定　  實驗十八  維生素B1的定量測定　第十二章  核酸　  實驗十九  植物組織中DNA的提取和純度鑒定　  實驗二十  肝臟DNA的提取及純度鑒定　  實驗二十一  質(zhì)粒DNA的小量提取(堿裂解法)　  實驗二十二  納米磁性粒子法小量提取細菌質(zhì)粒DNA　  實驗二十三  植物葉片總RNA小量制備(Trizol法)　  實驗二十四  紫外吸收法測定核酸含量　  實驗二十五  二苯胺法測定DNA含量　  實驗二十六  定磷法測定RNA含量　  實驗二十七  瓊脂糖凝膠電泳分離鑒定DNA　第十三章  體內(nèi)代謝　  實驗二十八  酶促轉(zhuǎn)氨基作用及其鑒定　  實驗二十九  胰島素和腎上腺素對血糖濃度的影響　  實驗三十  血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(SGPT)活力測定　  實驗三十一  植物總黃酮的提取與測定　第十四章  生物化學綜合實驗　  實驗三十二  SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳及蛋白印跡　  實驗三十三  豬血超氧化物歧化酶的分離純化、活性測定及同工酶鑒定　  實驗三十四  目的基因的PCR擴增附錄一  常用緩沖溶液的配制方法附錄二  硫酸銨飽和度的常用表附錄三  常用指示劑的配制參考文獻

章節(jié)摘錄

插圖：2.毛細管電泳檢測技術的發(fā)展就毛細管電泳而言，極細的毛細管內(nèi)徑帶來了很高的分離效能，但同時也給樣品組分的檢測帶來困難，對檢測技術相應提出了較高的要求，如何增加檢測器的靈敏度，同時又不造成明顯的區(qū)帶展寬，一直是CE技術發(fā)展中的一個至關重要的問題。迄今為止，已有許多檢測技術與CE聯(lián)用，在不同的實際應用領域中發(fā)揮作用。（1）紫外可見光吸收檢測。通過紫外可見光吸收進行檢測是毛細管電泳中應用最廣泛的方法。石英毛細管因可透過20nm波長以下的紫外光，因此不僅允許從紫外到可見光這一波長范圍內(nèi)對樣品組分進行檢測。而且可將透光窗口直接開在毛細管上，進行“在柱”檢測。（2）熒光檢測法。熒光檢測法也是毛細管電泳中一種常見的“在柱”檢測法，因?qū)M分區(qū)帶不會引起額外展寬，而且檢測靈敏度很高，尤其是激光誘導熒光檢測法（LIF），其靈敏度可高達1×10-12～1×10-16mol／L-1，是目前毛細管電泳中最靈敏的一種檢測方法。（3）電化學檢測方法。電導檢測、電位檢測、安培檢測是電化學檢測常用的三種方法，該檢測模式可避免光學類檢測器遇到的光程太短的問題，對電活性組分的檢測具有靈敏度高、線性范圍寬、選擇性好以及價格低廉等特點。安培檢測是三種電化學檢測模式中最易實現(xiàn)，應用較廣的一種檢測技術，為微體積環(huán)境中電活性物質(zhì)的測定提供了高靈敏度的檢測方法。（4）集成毛細管電泳芯片。該項技術以晶體硅、玻璃、塑料（指有機玻璃）、陶瓷和硅橡膠為基本材料，借助毛細管電泳技術，將樣品進樣、反應、分離、檢測等過程集成到一起的多功能化的技術，該項工作與分析儀器的微型化、小型化和集成化緊密相連，使得其能符合現(xiàn)代生物化學、制藥工業(yè)的低成本和高產(chǎn)出的需求。3.毛細管電泳分離模式的發(fā)展按分離介質(zhì)和分離原理不同，毛細管電泳有多種操作模式，而各種模式的分離機理是不相同的。如今的毛細管電泳不再僅僅局限于分離帶電荷的大分子，也適合分離陽離子、陰離子以及中性分子。常見的毛細管電泳的分離模式如下：（1）毛細管區(qū)帶電泳（CZE）。CZE又稱毛細管自由電泳，毛細管內(nèi)只充入緩沖溶液，在直流高壓驅(qū)動下，溶質(zhì)以不同的速率在分立的區(qū)帶內(nèi)進行遷移而被分離。CZE的應用范圍很寬，包括對氨基酸、多肽、離子、對映體等物質(zhì)的分析。

編輯推薦

《生物化學實驗》是由西南交通大學出版社出版的。

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