基因操作技術(shù)

內(nèi)容概要

本書是為高職高專院校生物技術(shù)類專業(yè)編寫的專業(yè)課教材，系統(tǒng)而簡(jiǎn)潔地介紹了基因操作技術(shù)的基本原理、基本操作和實(shí)際應(yīng)用。    全書共分為7個(gè)項(xiàng)目，內(nèi)容包括基因與基因組、基因操作的基本過程、核酸的分離純化技術(shù)、目的基因克隆技術(shù)、DNA體外重組技術(shù)、目的基因的表達(dá)與鑒定、生物信息技術(shù)。每個(gè)項(xiàng)目配有技能目標(biāo)、實(shí)訓(xùn)、項(xiàng)目小結(jié)、復(fù)習(xí)思考題，以便學(xué)生更好地學(xué)習(xí)和掌握有關(guān)技能。本書兼顧理論和應(yīng)用，內(nèi)容豐富，深入淺出，圖文并茂，旨在培養(yǎng)學(xué)生應(yīng)用知識(shí)的能力和實(shí)際操作的能力。    本書可供生物技術(shù)、生物工程、制藥工程等生物類專業(yè)作為教材使用，亦可供相關(guān)技術(shù)人員參考。

書籍目錄

項(xiàng)目1  基因與基因組  任務(wù)1.1  核酸的結(jié)構(gòu)與功能    1.1.1  核酸的化學(xué)結(jié)構(gòu)    1.1.2  DNA的結(jié)構(gòu)與功能    1.1.3  RNA的結(jié)構(gòu)與功能    1.1.4  核酸的理化性質(zhì)  任務(wù)1.2  基因與基因組    1.2.1  基因概念的發(fā)展    1.2.2  基因的結(jié)構(gòu)特征    1.2.3  染色體    1.2.4  基因組  任務(wù)1.3  遺傳信息的傳遞    1.3.1  復(fù)喇    1.3.2  轉(zhuǎn)錄    1.3.3  翻譯  任務(wù)1.4  基因表達(dá)調(diào)控原理    1.4.1  原核生物基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制    1.4.2  真核生物基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制    項(xiàng)目小結(jié)    復(fù)習(xí)思考題項(xiàng)目2  基因操作的基本過程  任務(wù)2.1  基因操作的基本概念  任務(wù)2.2  基因操作的基本過程    項(xiàng)目小結(jié)    復(fù)習(xí)思考題項(xiàng)目3  核酸的分離純化技術(shù)  任務(wù)3.1  基因組DNA的分離純化    3.1.1  植物組織基因組DNA的提取    3.1.2  動(dòng)物組織及血液中基因組DNA的提取    3.1.3  線粒體DNA的提取：堿變性法提取線粒體DNA    3.1.4  細(xì)菌基因組DNA的制備：SDS法提取細(xì)菌總DNA    3.1.5  病毒DNA的制備    3.1.6  質(zhì)粒DNA的分離純化    實(shí)訓(xùn)1  堿裂解法制備小量細(xì)菌質(zhì)粒DNA  任務(wù)3.2  RNA的分離純化    3.2.1  總RNA的分離純化    3.2.2  mRNA的分離純化：oligo(dT)纖維素拄法  任務(wù)3.3  核酸的檢測(cè)與保存    3.3.1  紫外分光光度法    實(shí)訓(xùn)2  紫外分光光度法測(cè)定核酸含量    3.3.2  凝膠電泳法    實(shí)訓(xùn)3  瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)DNA    3.3.3  核酸的保存    項(xiàng)目小結(jié)    復(fù)習(xí)思考題項(xiàng)月4  目的基因克隆技術(shù)  任務(wù)4.1  目的基因的擴(kuò)增    4.1.1  PCR基本原理    4.1.2  PCR反應(yīng)體系與編程    4.1.3  引物設(shè)計(jì)    4.1.4  常用PCR技術(shù)類型    實(shí)訓(xùn)4  PCR擴(kuò)增目的基因  任務(wù)4.2  載體及其改造    4.2.1  常用載體    4.2.2  常用工具酶    實(shí)訓(xùn)5  質(zhì)粒DNA的酶切    實(shí)訓(xùn)6  瓊脂糖凝膠中回收DNA片段    項(xiàng)目小結(jié)    復(fù)習(xí)思考題項(xiàng)目5  DNA體外重組技術(shù)  任務(wù)5.1  重組DNA的構(gòu)建    5.1.1  相同黏性末端的連接    5.1.2  平末端的連接    5.1.3  不同黏性末端的連接    5.1.4  人工黏性末端的連接    5.1.5  人工接頭法連接    5.1.6  T/A克隆連接    5.1.7  重組DNA構(gòu)建應(yīng)注意的事項(xiàng)    實(shí)訓(xùn)7  DNA片段連接  任務(wù)5.2  重組DNA的轉(zhuǎn)化    5.2.1  重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌    5.2.2  重組DNA轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞    實(shí)訓(xùn)8  大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備    實(shí)訓(xùn)9  重組質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化  任務(wù)5.3  重組子的篩選與鑒定    5.3.1  遺傳學(xué)檢測(cè)法    5.3.2  物理檢測(cè)法    5.3.3  核酸分子雜交檢測(cè)法    5.3.4  免疫學(xué)檢測(cè)法    5.3.5  核酸序列分析法    實(shí)訓(xùn)10  轉(zhuǎn)化子篩選與鑒定    項(xiàng)目小結(jié)    復(fù)習(xí)思考題項(xiàng)目6  目的基因的表達(dá)與鑒定  任務(wù)6.1  目的基因的表達(dá)    6.1.1  目的基因在原核系統(tǒng)中的表達(dá)    6.1.2  目的基因在真核系統(tǒng)中的裹達(dá)    實(shí)訓(xùn)11  目的基因在大腸桿菌中的誘導(dǎo)表達(dá)  任務(wù)6.2  目的蛋白的鑒定    6.2.1  SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳    6.2.2  Western雜交    6.2.3  等電聚焦電泳    6.2.4  雙向電泳    實(shí)訓(xùn)12  SDS-PAGE檢測(cè)表達(dá)蛋白質(zhì)    項(xiàng)目小結(jié)    復(fù)習(xí)思考題項(xiàng)目7  生物信息技術(shù)  任務(wù)7.1  生物信息學(xué)概念  任務(wù)7.2  生物信息數(shù)據(jù)庫    7.2.1  基因和基因組數(shù)據(jù)庫    7.2.2  蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫  任務(wù)7.3  數(shù)據(jù)的查詢與提交    7.3.1  數(shù)據(jù)查詢    7.3.2  向Genbank提交序列敷據(jù)    7.3.3  序列文件格式  任務(wù)7.4  序列比對(duì)與數(shù)據(jù)庫搜索    7.4.1  序列兩兩比對(duì)    7.4.2  多序列比對(duì)    7.4.3  數(shù)據(jù)庫搜索    項(xiàng)目小結(jié)    復(fù)習(xí)思考題附錄參考文獻(xiàn)

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