魚類分子生物學(xué)物種鑒定技術(shù)

前言

　　隨著水產(chǎn)品貿(mào)易的快速發(fā)展，某些貿(mào)易商為了追求經(jīng)濟(jì)利益，將一些價(jià)值低廉的海產(chǎn)品摻雜在價(jià)值高昂的海產(chǎn)品中，以次充好、魚目混珠，嚴(yán)重影響了國(guó)內(nèi)外貿(mào)易的正常秩序。針對(duì)這一現(xiàn)象，美國(guó)、加拿大和歐盟成員國(guó)等國(guó)家已陸續(xù)開始對(duì)魚類和甲殼類水產(chǎn)品實(shí)施物種DNA檢驗(yàn)，以此最大限度地預(yù)防和消除商業(yè)中的摻假和欺騙行為，打擊水產(chǎn)品標(biāo)識(shí)不實(shí)現(xiàn)象，保護(hù)消費(fèi)者的健康和利益。因此，水產(chǎn)品物種鑒定技術(shù)水平已成為水產(chǎn)品產(chǎn)業(yè)的重要保障。　　本書旨在為魚類物種鑒定的技術(shù)人員提供先進(jìn)的分子生物學(xué)技術(shù)理論指導(dǎo)和實(shí)用的檢測(cè)方法，主要內(nèi)容和材料來源于國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)資料和國(guó)家、省部級(jí)課題研究成果等。　　本書系統(tǒng)地反映了目前魚類物種鑒定中常用的分子生物學(xué)鑒定技術(shù)。全書共分八章。第一章概述魚類物種鑒定的分子生物學(xué)技術(shù)及網(wǎng)絡(luò)信息資源；第二章介紹了魚類物種鑒定的樣品處理技術(shù)；第三章是DNA條形碼技術(shù)在魚類物種鑒定中的應(yīng)用研究；第四章是指紋圖譜技術(shù)在魚類物種鑒定中的研究成果；第五章是物種特異性PCR技術(shù)在魚類物種鑒定中的應(yīng)用；第六章和第七章分別介紹了魚類物種鑒定的蛋白質(zhì)技術(shù)和芯片技術(shù)；第八章介紹了美國(guó)和歐盟關(guān)于魚類產(chǎn)品標(biāo)識(shí)管理相關(guān)的政策法規(guī)和措施。　　……

內(nèi)容概要

　　《魚類分子生物學(xué)物種鑒定技術(shù)》介紹的魚類物種鑒定技術(shù)，是以不同物種的遺傳密碼的多態(tài)性為基礎(chǔ)的分子生物學(xué)新技術(shù)，這些技術(shù)具有靈敏、準(zhǔn)確、操作簡(jiǎn)便的特點(diǎn)，在魚類物種鑒定方面有廣泛的應(yīng)用前景。
　　《魚類分子生物學(xué)物種鑒定技術(shù)》系統(tǒng)地探討了魚類物種鑒定的分子生物學(xué)技術(shù)理論和實(shí)踐操作，為魚類的物種鑒定提供了有效的技術(shù)方法參考?！遏~類分子生物學(xué)物種鑒定技術(shù)》的出版，將成為我國(guó)水產(chǎn)品檢測(cè)中難得的指導(dǎo)文獻(xiàn)，對(duì)我國(guó)食品進(jìn)出口貿(mào)易的健康發(fā)展起到積極的作用。

書籍目錄

第一章 魚類物種鑒定的分子生物學(xué)技術(shù)概況
第一節(jié) 魚類物種鑒定的分子生物學(xué)技術(shù)
一、蛋白質(zhì)檢測(cè)技術(shù)
二、DNA檢測(cè)技術(shù)
第二節(jié) 魚類物種鑒定的遺傳物質(zhì)選擇
一、線粒體DNA
二、核DNA
三、衛(wèi)星DNA
第三節(jié) PCR引物
一、通用引物
二、物種特異性引物
第四節(jié) 網(wǎng)絡(luò)信息資源在魚類物種鑒定中的應(yīng)用
第二章 魚類物種鑒定的樣品處理技術(shù)
第一節(jié) DNA的提取和純化
一、DNA的提取
二、DNA的純化
第二節(jié) 蛋白質(zhì)的提取和純化
一、細(xì)胞的破碎
二、蛋白質(zhì)的提取
三、蛋白質(zhì)的分離純化
四、魚肌肉蛋白的提取實(shí)例
第三章 魚類物種鑒定的DNA條形碼技術(shù)
第一節(jié) DNA條形碼技術(shù)的基本原理
一、DNA條形碼
二、DNA條形碼技術(shù)的靶基因
三、DNA條形碼技術(shù)的基本原理
第二節(jié) DNA條形碼技術(shù)的基本操作流程
一、試劑和設(shè)備
二、基本操作流程
第三節(jié) DNA條形碼在魚類物種鑒定中的應(yīng)用
一、DNA條形碼在魚類研究中的應(yīng)用概況
二、DNA條形碼對(duì)于魚類分類學(xué)的意義及可行性
三、DNA條形碼在中國(guó)魚類分類學(xué)研究中的應(yīng)用實(shí)例
四、DNA條形碼技術(shù)的問題與展望
五、16S rRNA基因和COI基因序列分析在石斑魚物種鑒定中的應(yīng)用
第四章 魚類物種鑒定的DNA指紋圖譜技術(shù)
第一節(jié) 基于PCR的DNA指紋圖譜技術(shù)概述
一、DNA指紋圖譜技術(shù)的發(fā)展
二、DNA指紋圖譜技術(shù)的特點(diǎn)
第二節(jié) PCR-RFLP技術(shù)
一、PCR-RFLP技術(shù)鑒定魚種的基本原理
二、PCR-RFLP技術(shù)的基本操作流程
三、Lab-on-a-chip毛細(xì)管電泳（Lab-on-a-chip capillary
electrophoresis,Lab-on-a-chip CE）
四、PCR-RFLP技術(shù)在主要經(jīng)濟(jì)魚類物種鑒定中的應(yīng)用
五、PCR-RFLP商業(yè)化魚種鑒定試劑盒
六、臺(tái)灣海峽常見石斑魚的PCR-RFLP鑒定方法
七、渤海地區(qū)常見經(jīng)濟(jì)魚類的PCR-RFLP鑒定方法
第三節(jié) PCR-SSCP技術(shù)
一、PCR-SSCP技術(shù)的基本原理
二、PCR-SSCP技術(shù)的基本操作流程
三、PCR-SSCP技術(shù)的注意事項(xiàng)
四、PCR-SSCP技術(shù)在魚種鑒定中的應(yīng)用
第四節(jié) PCR-RAPD技術(shù)
一、 PCR-RAPD技術(shù)的基本原理
……
第五章 魚種鑒定的定性PCR檢測(cè)技術(shù)
第六章 魚種鑒定的蛋白質(zhì)檢測(cè)技術(shù)
第七章 魚種鑒定的生物芯片技術(shù)
第八章 水產(chǎn)品標(biāo)簽的管理和措施
附Ⅰ 魚類分類系統(tǒng)
附Ⅱ FDA海產(chǎn)品名錄（2011）
參考文獻(xiàn)

章節(jié)摘錄

　　一、蛋白質(zhì)檢測(cè)技術(shù)　　蛋白質(zhì)檢測(cè)方法主要采用等電聚焦電泳、毛細(xì)管電泳、酶聯(lián)免疫吸附和高效液相色譜等技術(shù)。蛋白質(zhì)檢測(cè)方法通常適用于新鮮的或冰凍的組織，而通過加熱、高壓和輻射加工過的魚組織，由于蛋白質(zhì)的生化特性及結(jié)構(gòu)完整性被破壞，因此通常不使用蛋白檢測(cè)方法進(jìn)行鑒定。酶聯(lián)免疫吸附法可以分析經(jīng)過高溫處理的樣品，但該方法的不足是需要開發(fā)更多特異性高的抗體用于區(qū)分親緣關(guān)系較近的魚類，而且檢測(cè)靈敏度較低?！　《NA檢測(cè)技術(shù)　　DNA檢測(cè)方法由于其特異性好、靈敏度高、操作簡(jiǎn)便等原因已成為物種鑒定的主要檢測(cè)方法。首先，DNA在細(xì)胞中含量相對(duì)穩(wěn)定，比蛋白質(zhì)耐熱，在產(chǎn)品的加工過程中也相對(duì)不容易被破壞，從加工產(chǎn)品中仍能提取出足夠可供分析的小片段DNA;其次，DNA信息量大，物種的差異直接反映在DNA序列的差異上?？梢愿鶕?jù)DNA上不同區(qū)域、基因、片段的進(jìn)化特點(diǎn)選擇適合的靶基因進(jìn)行檢測(cè)；第三，DNA的序列穩(wěn)定，不同組織類型、年齡和狀態(tài)影響不大；第四，由于基因技術(shù)的發(fā)展，目前的DNA檢測(cè)技術(shù)可以發(fā)現(xiàn)含量低至幾個(gè)拷貝的基因，使分析水平從常量水平發(fā)展到痕量水平；第五，各類高精尖儀器的研發(fā)使得檢測(cè)時(shí)間大大縮短，操作也更為便捷。自動(dòng)化檢測(cè)更是有助于提高操作的精確度，防止交叉污染和有害有毒物質(zhì)的損害?！　◆~種鑒定常用的DNA檢測(cè)方法主要包括兩類，一類是直接通過物種特異性聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerasechainreaction，PCR）或?qū)崟r(shí)熒光PCR技術(shù)進(jìn)行物種鑒定；另一類則是先用通用引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，然后對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行DNA序列分析及指紋分析以鑒定物種。　　具體的檢測(cè)步驟是首先提取DNA，利用PCR擴(kuò)增目標(biāo)DNA片段，然后分析PCR擴(kuò)增產(chǎn)物?！　　?/pre>








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