細(xì)胞與分子生物學(xué)實驗指南

內(nèi)容概要

　　《細(xì)胞與分子生物學(xué)實驗指南》主要包括兩個部分。第一部分即前十個實驗是細(xì)胞生物學(xué)實驗部分，主要是根據(jù)編者多年的實驗教學(xué)經(jīng)驗以及實驗教學(xué)課程目標(biāo)的設(shè)置而選擇了具有代表性的十個實驗。它們涵蓋了細(xì)胞各種常用顯微鏡的使用技術(shù)，細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，細(xì)胞免疫組化技術(shù)，細(xì)胞轉(zhuǎn)化技術(shù)，等等。這些實驗?zāi)哿司幷叨嗄陮嶒灲虒W(xué)的實踐經(jīng)驗與體會，所以操作性較強(qiáng)。這些實驗不但包括細(xì)胞生物學(xué)基本的技術(shù)訓(xùn)練，而且還注重在基本實驗中融入綜合性、探索性的設(shè)計，使學(xué)生在科學(xué)思維方法和獨(dú)立解決問題的能力方面得到提高。第二部分即后十個實驗是分子生物學(xué)實驗技術(shù)，主要是根據(jù)編者長年從事分子生物學(xué)科學(xué)研究而積累的豐富的科研經(jīng)歷，選擇了近些年來發(fā)展起來的較為實用而前沿的分子生物學(xué)技術(shù)，它們包括免疫共沉淀、GST Pull-down Assay、DNA甲基化、凝膠遷移實驗、RNA干涉等等。而分子生物學(xué)基本的實驗技術(shù)也通過編者用心的實驗設(shè)計而很好地融入了這些前沿的實驗技術(shù)中，這一點和絕大多數(shù)已出版的只介紹分子生物學(xué)基本的傳統(tǒng)技術(shù)的實驗指導(dǎo)是不同的。而這些前沿技術(shù)已在現(xiàn)代分子生物學(xué)研究中越來越普遍地被使用。這些較為前沿的實驗技術(shù)中很多內(nèi)容在現(xiàn)有的出版物中是很難找到的，無疑《細(xì)胞與分子生物學(xué)實驗指南》是了解這些前沿技術(shù)的有意義的參考資料，同時所設(shè)置的實驗訓(xùn)練不但開闊了學(xué)生的視野，而且也使學(xué)生能夠更好地適應(yīng)生命科學(xué)技術(shù)發(fā)展的需要。

書籍目錄

實驗一 細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的光學(xué)顯微鏡觀察實驗二 動物細(xì)胞微絲、中間纖維的顯微觀察實驗三 植物細(xì)胞染色體標(biāo)本的制作與觀察實驗四 動物細(xì)胞染色體標(biāo)本的制作及G帶顯帶技術(shù)實驗五 動物細(xì)胞的傳代培養(yǎng)實驗六 動物細(xì)胞的原代培養(yǎng)實驗七 動物培養(yǎng)細(xì)胞生長曲線的測定實驗八 植物的組織培養(yǎng)技術(shù)實驗九 細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)觀察及流式細(xì)胞技術(shù)檢測實驗十 電擊法轉(zhuǎn)化GFP基因于鹽藻細(xì)胞實驗十一Western blot實驗檢測p53蛋白在不同分裂時期的細(xì)胞中的表達(dá)實驗十二 RNA的提取及Northern雜交實驗十三 免疫共沉淀檢測p2l和PCNA兩種蛋白的相互作用實驗十四 GST Pull-down Assay檢測ISL-1與BETA2兩種蛋白的相互作用實驗十五 亞硫酸氫鈉法檢測DNA甲基化實驗十六 動物細(xì)胞脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染及熒光素酶檢測實驗十七 利用凝膠遷移實驗(EMSA)分析基因表達(dá)調(diào)控作用元件實驗十八 染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)實驗十九 RBP-Pull Down技術(shù)實驗二十 RNA干涉實驗技術(shù)附錄參考文獻(xiàn)

章節(jié)摘錄

版權(quán)頁：插圖：1實驗背景與原理植物組織培養(yǎng)是指將離體的植物器官（根、莖、葉、花藥等），組織（胚乳、花藥組織），細(xì)胞（包括花粉）等在模擬機(jī)體自然生理條件下在體外進(jìn)行培養(yǎng)，使之生存或生長成為完整植株的技術(shù)。這種組織培養(yǎng)的植物又叫試管植物。植物組織培養(yǎng)的理論依據(jù)是植物細(xì)胞的全能性。植物細(xì)胞的全能性是指任何具有完整的細(xì)胞核的植物細(xì)胞，都擁有形成一個完整個體所必需的全部遺傳信息，理論上，它們?nèi)缡芫岩粯?，都具有?jīng)過分裂、分化形成各種組織和細(xì)胞，最終發(fā)育成一個完整的個體的能力。全能性說明的是一種可能性，而全能性的表達(dá)是需要一定條件的。細(xì)胞只有在適當(dāng)條件下才能表達(dá)出全能性來，這種全能性表達(dá)的難易程度在不同的細(xì)胞之間也有很大的差別。一般說來，高度分化的動物細(xì)胞通常是不可逆的，很難再表達(dá)這種全能性。而植物分化組織中的靜止細(xì)胞在適當(dāng)?shù)拇碳l件下，會改變原來的發(fā)育途徑，逐步逆轉(zhuǎn)其原有的分化狀態(tài)，轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂蟹稚芰Φ呐咝约?xì)胞，這個過程就稱為脫分化。已經(jīng)脫分化的細(xì)胞在一定條件下，又可經(jīng)過愈傷組織或胚狀體，再分化出根和芽，形成完整植株，這一過程叫做再分化。組織培養(yǎng)的過程，就是植物細(xì)胞的脫分化和再分化的過程。愈傷組織就是在植物細(xì)胞脫分化和再分化這一過程中衍生的能迅速增殖，無特定結(jié)構(gòu)和功能的薄壁組織細(xì)胞團(tuán)。植物細(xì)胞全能性的實現(xiàn)途徑有直接和間接的途徑。一般從含有腋芽的莖段外植體上，可直接誘導(dǎo)腋生芽，分化為完整植株。這也是最常用的途徑之一，可保持品種的原有特性，特別適合于苗木的快速繁殖。從不含腋芽的器官，如葉片、莖段上，需誘導(dǎo)細(xì)胞經(jīng)過脫分化，再誘導(dǎo)出不定芽，間接分化形成完整植株。

編輯推薦

《細(xì)胞與分子生物學(xué)實驗指南》是由大連理工大學(xué)出版社出版的。

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