生物化學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)

前言

　　高等職業(yè)教育是高等教育發(fā)展中的一個(gè)類型，教育部［2006］16號(hào)文件確定的高等職業(yè)教育培養(yǎng)目標(biāo)如下：培養(yǎng)面向生產(chǎn)、建設(shè)、服務(wù)和管理第一線需要的高技能人才。為遵循醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)高等職業(yè)教育培養(yǎng)目標(biāo)，適應(yīng)用人單位的要求，本教材的編寫思路如下：通過充分的崗位能力調(diào)研，結(jié)合執(zhí)業(yè)考試內(nèi)容與要求，按照“工學(xué)結(jié)合”培養(yǎng)模式，使學(xué)生既有較扎實(shí)的基本理論知識(shí)，又有較強(qiáng)的專業(yè)實(shí)踐技能和一定的臨床對(duì)話能力，以滿足二級(jí)及以上醫(yī)院的用人要求?！　”窘滩膶⒔陙砩锘瘜W(xué)檢驗(yàn)的發(fā)展與我國(guó)的臨床實(shí)踐緊密結(jié)合，努力吸取近年來國(guó)內(nèi)各檢驗(yàn)教材之精華，力求充分體現(xiàn)“三基”（基礎(chǔ)理論、基本知識(shí)、基本技能）、“五性”（思想性、科學(xué)性、先進(jìn)性、啟發(fā)性、適用性），同時(shí)具備經(jīng)典性（能夠被業(yè)內(nèi)公認(rèn)，并能夠經(jīng)得住時(shí)間的考驗(yàn)）、務(wù)實(shí)性（能夠?qū)W以致用）、新穎性（新理念、新技術(shù)、新方法）和兼容性（適量介紹本專業(yè)的發(fā)展前景，以開拓學(xué)生視野）的高等職業(yè)技術(shù)教育特色?！　∪珪譃?個(gè)模塊，生物化學(xué)檢驗(yàn)基礎(chǔ)知識(shí)與基本能力、物質(zhì)代謝檢驗(yàn)和器官功能與疾病檢驗(yàn)。本書內(nèi)容共十九章，包括緒論，生物化學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室基本知識(shí)，檢驗(yàn)方法的分析性能評(píng)價(jià)與驗(yàn)證，生物化學(xué)檢驗(yàn)常用技術(shù)，自動(dòng)生化分析，酶學(xué)分析技術(shù)，體液蛋白質(zhì)檢驗(yàn)，葡萄糖代謝檢驗(yàn)，脂代謝相關(guān)檢驗(yàn)，電解質(zhì)檢驗(yàn)和血?dú)夥治觯}、磷、鎂和微量元素檢驗(yàn)，肝膽疾病檢驗(yàn)，腎臟功能檢驗(yàn)，心血管疾病檢驗(yàn)，內(nèi)分泌功能檢驗(yàn)，妊娠和新生兒疾病檢驗(yàn)，腫瘤標(biāo)志物檢驗(yàn)，治療藥物監(jiān)測(cè)和生物化學(xué)檢驗(yàn)的質(zhì)量控制。　　來自全國(guó)十五個(gè)院校生物化學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)及臨床檢驗(yàn)科的編寫人員，將教學(xué)經(jīng)驗(yàn)與臨床實(shí)踐緊密結(jié)合，經(jīng)過半年多的通力協(xié)作，完成了本書的編寫任務(wù)，在此對(duì)全體編寫人員的辛勤工作深表敬意，對(duì)華中科技大學(xué)出版社及幫助過此書編寫的朋友們表示衷心感謝?！　”窘滩碾m為高職高專教材，也適合在職人員進(jìn)行職業(yè)培訓(xùn)、執(zhí)業(yè)資格考試參考及自學(xué)者自學(xué)使用?！　”M管全體編寫人員已盡力完成編寫任務(wù)并完善編寫內(nèi)容，但由于時(shí)間及水平所限，其中難免有不足之處，真誠(chéng)歡迎廣大讀者對(duì)本教材提出寶貴意見，我們將通過教學(xué)實(shí)踐，進(jìn)一步加以修改和完善?！　≈倨滠姀埵绶肌　?012年8月

內(nèi)容概要

　　本書是全國(guó)高職高專醫(yī)藥院校藥學(xué)及醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)專業(yè)工學(xué)結(jié)合“十二五”規(guī)劃教材。
本書分為三個(gè)模塊，分別為生物化學(xué)檢驗(yàn)基礎(chǔ)知識(shí)與基本能力、物質(zhì)代謝檢驗(yàn)和器官功能與疾病檢驗(yàn)，
全書內(nèi)容共十九章，包括生物化學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室基本知識(shí)，檢驗(yàn)方法的分析性能評(píng)價(jià)與驗(yàn)證，生物化學(xué)檢驗(yàn)常用技術(shù)，自動(dòng)生化分析，酶學(xué)分析技術(shù)，體液蛋白質(zhì)檢驗(yàn)，葡萄糖代謝檢驗(yàn)，脂代謝相關(guān)檢驗(yàn)，電解質(zhì)檢驗(yàn)和血?dú)夥治?，鈣、磷、鎂和微量元素檢驗(yàn)，肝膽疾病檢驗(yàn)，腎臟功能檢驗(yàn)，心血管疾病檢驗(yàn)，內(nèi)分泌功能檢驗(yàn)，妊娠和新生兒疾病檢驗(yàn)，腫瘤標(biāo)志物檢驗(yàn)，治療藥物監(jiān)測(cè)，生物化學(xué)檢驗(yàn)的質(zhì)量控制。
本書可供高職高專醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)及相關(guān)醫(yī)學(xué)類專業(yè)學(xué)生使用。

作者簡(jiǎn)介

仲其軍，男，副教授，廣州醫(yī)學(xué)院從化學(xué)院學(xué)科帶頭人、資深教學(xué)骨干。

書籍目錄

第一章　緒論
第二章　生物化學(xué)檢驗(yàn)基本知識(shí)
第一節(jié)　生物化學(xué)檢驗(yàn)的標(biāo)本
第二節(jié)　實(shí)驗(yàn)用純水
第三節(jié)　實(shí)驗(yàn)室信息系統(tǒng)
第三章　檢驗(yàn)方法的分析性能評(píng)價(jià)與驗(yàn)證
第一節(jié)　檢驗(yàn)方法分析性能評(píng)價(jià)的應(yīng)用范圍
第二節(jié)　檢驗(yàn)方法分析性能的評(píng)價(jià)與驗(yàn)證
第三節(jié)　檢驗(yàn)診斷結(jié)果的診斷性能評(píng)價(jià)與驗(yàn)證
第四章　生物化學(xué)檢驗(yàn)常用技術(shù)
第一節(jié)　光譜分析技術(shù)
第二節(jié)　電化學(xué)分析技術(shù)
第三節(jié)　電泳技術(shù)
第四節(jié)　分子生物學(xué)常用技術(shù)
第五章　自動(dòng)生化分析技術(shù)
第一節(jié)　概述
第二節(jié)　自動(dòng)生化分析方法和校準(zhǔn)
第三節(jié)　自動(dòng)生化分析儀的參數(shù)設(shè)置
第四節(jié)　檢測(cè)系統(tǒng)性能的核實(shí)、確認(rèn)與評(píng)價(jià)
第五節(jié)　生化檢測(cè)系統(tǒng)環(huán)境及儀器要求
第六節(jié)　生化分析儀試劑盒的選擇與性能評(píng)價(jià)
第六章　酶學(xué)分析技術(shù)
第一節(jié)　概述
第二節(jié)　酶活性測(cè)定技術(shù)
第三節(jié)　代謝物酶學(xué)法測(cè)定
第四節(jié)　酶質(zhì)量測(cè)定技術(shù)
第五節(jié)　同工酶測(cè)定
第六節(jié)　診斷酶學(xué)在臨床中的應(yīng)用
第七章　體液蛋白質(zhì)檢驗(yàn)
第一節(jié)　概述第二節(jié)　體液蛋白質(zhì)檢驗(yàn)
第八章　糖代謝相關(guān)檢驗(yàn)
第一節(jié)　血糖測(cè)定
第二節(jié)　血清糖基化蛋白測(cè)定
第三節(jié)　胰島素釋放及C肽釋放試驗(yàn)
第四節(jié)　糖代謝產(chǎn)物測(cè)定
第五節(jié)　其他糖測(cè)定
第九章　脂代謝相關(guān)檢驗(yàn)
第一節(jié)　血 脂 測(cè) 定
第二節(jié)　血清脂蛋白測(cè)定
第三節(jié)　血清載脂蛋白測(cè)定
第十章　電解質(zhì)檢驗(yàn)和血?dú)夥治?br />第一節(jié)　電解質(zhì)檢驗(yàn)
第二節(jié)　血?dú)夥治鱿嚓P(guān)檢驗(yàn)
第十一章　鈣、磷、鎂和微量元素檢驗(yàn)
第一節(jié)　鈣、磷、鎂檢驗(yàn)
第二節(jié)　微量元素檢驗(yàn)
第十二章　肝膽功能檢驗(yàn)
第一節(jié)　肝臟結(jié)構(gòu)和生物化學(xué)功能
第二節(jié)　肝膽疾病的生化改變
第三節(jié)　肝膽功能檢驗(yàn)
第四節(jié)　肝功能試驗(yàn)選擇原則
第十三章　腎臟功能檢驗(yàn)
第一節(jié)　腎小球功能檢驗(yàn)
第二節(jié)　腎小管功能檢驗(yàn)
第三節(jié)　早期腎損傷檢驗(yàn)
第四節(jié)　腎功能檢驗(yàn)項(xiàng)目選擇與組合
第十四章　心血管疾病檢驗(yàn)
第一節(jié)　心血管疾病概述
第二節(jié)　心肌損傷的酶學(xué)標(biāo)志物
第三節(jié)　心肌損傷的蛋白標(biāo)志物
第四節(jié)　心力衰竭和高血壓病標(biāo)志物
第十五章　內(nèi)分泌疾病檢驗(yàn)
第一節(jié)　概述
第二節(jié)　甲狀腺功能檢測(cè)
第三節(jié)　腎上腺功能檢測(cè)
第十六章　妊娠和新生兒的生物化學(xué)檢驗(yàn)
第一節(jié)　妊娠期的生物化學(xué)
第二節(jié)　妊娠期相關(guān)疾病及生物化學(xué)檢驗(yàn)
第三節(jié)　新生兒相關(guān)疾病及檢驗(yàn)
第十七章　腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)
第一節(jié)　概述
第二節(jié)　腫瘤標(biāo)志物檢驗(yàn)
第十八章　治療藥物濃度監(jiān)測(cè)
第一節(jié)　概述
第二節(jié)　治療藥物濃度監(jiān)測(cè)的臨床應(yīng)用
第十九章　生物化學(xué)檢驗(yàn)的質(zhì)量控制
第一節(jié)　分析前質(zhì)量控制
第二節(jié)　分析過程中質(zhì)量控制
第三節(jié)　分析后質(zhì)量控制
參考文獻(xiàn)

章節(jié)摘錄

版權(quán)頁(yè)：   插圖：   2.總RNA的分離與純化 由于RNase的影響，為獲得完整的RNA分子，就必須在總RNA分離與純化的最初階段，盡可能快地消除細(xì)胞內(nèi)RNase的活性。在β—巰基乙醇的協(xié)同作用下，高濃度的（異）硫氰酸胍可以極快地抑制RNase的活性，從胰腺等富含RNase的組織細(xì)胞中分離出完整的RNA分子，目前已成為常規(guī)使用的試劑。pH=8.0的Tris飽和酚用于DNA的制備，但在RNA純化時(shí)，應(yīng)使用pH=4.5～5.5的水飽和酸性酚，這既有利于DNA的變性又有利于RNA的分離。盡管對(duì)剪切力不敏感，但在堿性條件下，RNA可變性，需要嚴(yán)格控制pH值。另外，在DNA與RNA的提取過程中，酚與氯仿經(jīng)常結(jié)合、交替使用，主要因?yàn)閮烧吆嫌脮r(shí)去除蛋白質(zhì)的效果更好，而且氯仿還能有效抑制RNase的活性，通過使酚脫水防止mRNA的丟失，加速有機(jī)相與水相的分層，去除植物色素和蔗糖以及核酸樣品中的痕量酚。少量異戊醇的加入，其目的在于消除抽提過程中因蛋白質(zhì)變性而產(chǎn)生的泡沫。由于高濃度胍類的使用，為防止SDS的沉淀，常改用十二烷基谷氨酸鈉。對(duì)含量較低的樣品，加入糖原可以提高RNA的回收率。 總RNA提取法中最常使用的是一步法。需要指出的是，目前常用的一步法均以異丙醇沉淀RNA，由于其選擇性地沉淀大分子rRNA和mRNA，故提取的總RNA中含有的小相對(duì)分子質(zhì)量RNA較少，rRNA和mRNA所占的比例相應(yīng)增高。當(dāng)然，目前的研究重點(diǎn)不是小相對(duì)分子質(zhì)量RNA，而是相對(duì)分子質(zhì)量較高的mRNA，不必苛求真正的總RNA。 3.mRNA的分離與純化 與大小和序列明確的rRNA、tRNA及核內(nèi)小RNA不同，真核生物的mRNA在細(xì)胞中含量少、種類多、相對(duì)分子質(zhì)量大小不一。除血紅蛋白及某些組蛋白外，絕大多數(shù)mRNA在其3′末端帶有一個(gè)長(zhǎng)短不一的聚腺苷酸(polyadenylic acid)的結(jié)構(gòu)，即poly(A)尾巴。以總RNA制品為起始材料，利用核酸的堿基互補(bǔ)配對(duì)原理，通過0ligo(dT)—纖維素或poly(U)—瓊脂糖凝膠的親和層析，可以很容易地同時(shí)分離不同種類與大小的mRNA的分子群體。理論上，它們可編碼細(xì)胞內(nèi)所有的蛋白質(zhì)與多肽分子。 （三）聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù) DNA聚合酶(DNA polymerase)最早于1955年被發(fā)現(xiàn)，而較具有實(shí)驗(yàn)價(jià)值及實(shí)用性的Klenow片斷則是于20世紀(jì)70年代的初期由Dr.H.Klenow所發(fā)現(xiàn)，但由于此酶不耐高溫，高溫能使之變性，因此不適用高溫變性的聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction,PCR)?，F(xiàn)在所使用的酶（簡(jiǎn)稱為Taq polymerase），則是于1976年從溫泉中的細(xì)菌(Thermus aquaticus)分離出來的。它的特性就在于能耐高溫，是一個(gè)很理想的酶，但它被廣泛運(yùn)用于20世紀(jì)80年代之后。

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