免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)

前言

　　前言　　近年來，隨著免疫化學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的不斷發(fā)展，以及各種高新技術(shù)在免疫學(xué)中的應(yīng)用，許多微量、快速、高度特異和靈敏，并能自行自動(dòng)化檢測和數(shù)據(jù)分析處理的新實(shí)驗(yàn)方法得以建立。以抗原抗體反應(yīng)為基礎(chǔ)的現(xiàn)代免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)不斷更新、發(fā)展和充實(shí)，成為生命科學(xué)各個(gè)領(lǐng)域中實(shí)驗(yàn)研究的重要手段。運(yùn)用免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)對抗原性物質(zhì)的定性、定量檢測不僅推動(dòng)了對免疫學(xué)現(xiàn)象的研究，而且擴(kuò)大了免疫學(xué)與醫(yī)學(xué)各個(gè)領(lǐng)域的聯(lián)系。目前，免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)已廣泛用于各種傳染病、免疫缺陷病、超敏反應(yīng)、自身免疫病、移植排斥反應(yīng)及腫瘤等疾病的診斷、療效評價(jià)及發(fā)病機(jī)制的研究?！　≡摻滩囊曰A(chǔ)性實(shí)驗(yàn)為主，以綜合性實(shí)驗(yàn)作為提高，以設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)作為擴(kuò)展。本書共分為9章，主要介紹目前應(yīng)用較為廣泛的免疫學(xué)新技術(shù)，內(nèi)容包括非特異性免疫實(shí)驗(yàn)、特異性抗體制備、抗原抗體反應(yīng)、免疫標(biāo)記技術(shù)、免疫細(xì)胞分離、免疫細(xì)胞功能測定、HLA分型技術(shù)、超敏反應(yīng)實(shí)驗(yàn)、流式細(xì)胞術(shù)在免疫學(xué)中的應(yīng)用以及設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)選題實(shí)施等內(nèi)容。在編寫的過程中，力求內(nèi)容完整、系統(tǒng)、科學(xué)，強(qiáng)調(diào)實(shí)用性和可操作性，注重能力培養(yǎng)。各章節(jié)內(nèi)容的劃分并不是絕對的，而是相互交叉和融合的。在實(shí)際教學(xué)中，各校可根據(jù)不同專業(yè)、不同層次的學(xué)生和實(shí)驗(yàn)條件靈活安排、優(yōu)化組合和設(shè)計(jì)，以達(dá)到最佳教學(xué)效果和培養(yǎng)目標(biāo)為準(zhǔn)。各實(shí)驗(yàn)和內(nèi)容所占比例和學(xué)時(shí)也應(yīng)根據(jù)專業(yè)特點(diǎn)和層次而確定。每一實(shí)驗(yàn)技術(shù)所選標(biāo)本、實(shí)驗(yàn)步驟和方法，可根據(jù)各校實(shí)驗(yàn)條件和常規(guī)做法而加以修改和完善?！　”緯木幷呔蔷哂胸S富經(jīng)驗(yàn)的教學(xué)一線教師，書中介紹的實(shí)驗(yàn)基本上是編者十分熟悉或親自操作的內(nèi)容，因此具有較大的參考價(jià)值。本書既有利于讀者對免疫學(xué)理論知識的認(rèn)識和鞏固，又有利于對其臨床思維能力、科研創(chuàng)新能力及分析問題、解決問題能力的培養(yǎng)。本教材適用于五年制和八年制各專業(yè)醫(yī)學(xué)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué),?？茖哟慰蛇x學(xué)部分內(nèi)容,也供研究生、醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科、防疫站、科研人員和從事免疫學(xué)研究的技術(shù)人員參考。

內(nèi)容概要

　　《免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)》是全國高等醫(yī)藥院校國家級實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心十二五規(guī)劃教材。
　　該教材以基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)為主，以綜合性實(shí)驗(yàn)為提高，以設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)為擴(kuò)展。本書共9章，主要介紹目前應(yīng)用較為廣泛的免疫學(xué)新技術(shù)，內(nèi)容包括：非特異性免疫實(shí)驗(yàn)，特異性抗體的制備，抗原抗體反應(yīng)，免疫標(biāo)記技術(shù)，免疫細(xì)胞的分離，純化和鑒定、免疫細(xì)胞檢測技術(shù)，人類白細(xì)胞抗原分型技術(shù)，超敏反應(yīng)實(shí)驗(yàn)，以及設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)的選題、設(shè)計(jì)和實(shí)施等內(nèi)容。
　　本書適用于五年制本科和八年制各專業(yè)醫(yī)學(xué)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)，也可供醫(yī)院檢驗(yàn)科、疾控中心和從事免疫學(xué)研究的相關(guān)技術(shù)人員參考。

書籍目錄

編委　
前言　
第一章　非特異性免疫　實(shí)驗(yàn)　
　　實(shí)驗(yàn)一、唾液溶菌酶活性測定　
　　實(shí)驗(yàn)二、CH50　法血清總補(bǔ)體活性測定　
第二章　特異性抗體的制備　
　　實(shí)驗(yàn)一、免疫血清的制備　
　　實(shí)驗(yàn)二、免疫血清的鑒定和保存　
　　實(shí)驗(yàn)三、單克隆抗體的制備　
第三章　抗原抗體反應(yīng)　
　第一節(jié)　凝集反應(yīng)　
　　實(shí)驗(yàn)一、細(xì)菌的玻片凝集試驗(yàn)　
　　實(shí)驗(yàn)二、ABO　血型鑒定試驗(yàn)　
　　實(shí)驗(yàn)三、細(xì)菌的試管凝集試驗(yàn)　
　　實(shí)驗(yàn)四、類風(fēng)濕因子免疫膠乳試驗(yàn)　
　　實(shí)驗(yàn)五、反向間接凝集法檢測AFP　
　　實(shí)驗(yàn)六、抗“O”試驗(yàn)　
　　實(shí)驗(yàn)七、Coombs　試驗(yàn)　
　第二節(jié)　沉淀反應(yīng)　
　　實(shí)驗(yàn)八、單向瓊脂擴(kuò)散　實(shí)驗(yàn)　
　　實(shí)驗(yàn)九、雙向瓊脂擴(kuò)散　實(shí)驗(yàn)　
　　實(shí)驗(yàn)十、對流免疫電泳　
　　實(shí)驗(yàn)十一、免疫電泳　
　　實(shí)驗(yàn)十二、免疫透射比濁試驗(yàn)　
　　實(shí)驗(yàn)十三、免疫印跡技術(shù)　
第四章　免疫標(biāo)記技術(shù)　
　第一節(jié)　免疫酶技術(shù)　
　　實(shí)驗(yàn)一、ELISA：雙抗體夾心法測HBsAg　
　　實(shí)驗(yàn)二、生物素-親和素技術(shù)：BAS-ELISA　測定抗-HBs　
　　實(shí)驗(yàn)三、酶免疫組織化學(xué)技術(shù)：酶免疫組化測定EBV-VCA-IgA　
　第二節(jié)　免疫熒光技術(shù)　
　　實(shí)驗(yàn)四、間接免疫熒光法檢測抗核抗體　
　　實(shí)驗(yàn)五、細(xì)胞膜免疫球蛋白測定　
　第三節(jié)　化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)　
　　實(shí)驗(yàn)六、酶標(biāo)記化學(xué)發(fā)光法測AFP　
　第四節(jié)　免疫膠體金標(biāo)記技術(shù)　
　　實(shí)驗(yàn)七、膠體金法檢測早早孕試驗(yàn)　
第五章　細(xì)胞的分離、純化和鑒定　
　　實(shí)驗(yàn)一、Ficol-Hypaque　密度梯度離心法分離人PBMC　
　　實(shí)驗(yàn)二、Percoll　不連續(xù)密度梯度沉淀法分離、純化NK　細(xì)胞　
　　實(shí)驗(yàn)三、免疫磁珠法分離淋巴細(xì)胞　
　　實(shí)驗(yàn)四、小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的分離　
　　實(shí)驗(yàn)五、小鼠胸腺細(xì)胞的制備　
　　實(shí)驗(yàn)六、小鼠骨髓樹突狀細(xì)胞的制備　
　　實(shí)驗(yàn)七、尼龍毛法分離人外周血T、B　淋巴細(xì)胞　
第六章　免疫細(xì)胞檢測技術(shù)　
　第一節(jié)　淋巴細(xì)胞亞群的檢測　
　　實(shí)驗(yàn)一、E花環(huán)試驗(yàn)　
　　實(shí)驗(yàn)二、T細(xì)胞亞群測定　
　第二節(jié)　免疫細(xì)胞功能檢測　
　　實(shí)驗(yàn)三、淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)　
　　實(shí)驗(yàn)四、B淋巴細(xì)胞溶血空斑試驗(yàn)　
　　實(shí)驗(yàn)五、中性粒細(xì)胞吞噬試驗(yàn)　
　　實(shí)驗(yàn)六、巨噬細(xì)胞吞噬試驗(yàn)　
　　實(shí)驗(yàn)七、NK細(xì)胞自然殺傷活性的測定　
　　實(shí)驗(yàn)八、LAK/NK　細(xì)胞的制備和活性測定　
　　實(shí)驗(yàn)九、細(xì)胞因子的檢測　
第七章　HLA分型技術(shù)　
　第一節(jié)　血清學(xué)分型技術(shù)　
　　實(shí)驗(yàn)一、HLA抗原血清學(xué)分型　
　第二節(jié)　細(xì)胞學(xué)分型技術(shù)　
　　實(shí)驗(yàn)二、雙向MLC（mixed　lymphocyte　culture）方法　
　　實(shí)驗(yàn)三、單向MLC方法　
　第三節(jié)　DNA分型技術(shù)　
　　實(shí)驗(yàn)四、基因組DNA的提取　
　　實(shí)驗(yàn)五、PCR/SSP技術(shù)　
　　實(shí)驗(yàn)六、PCR/SSCP技術(shù)　
　　實(shí)驗(yàn)七、PCR/SSO技術(shù)（正向雜交）　
第八章　超敏反應(yīng)試驗(yàn)　
　　實(shí)驗(yàn)一、豚鼠過敏試驗(yàn)　
　　實(shí)驗(yàn)二、皮膚過敏　實(shí)驗(yàn)　
　　實(shí)驗(yàn)三、血清總IgE　測定　
第九章　設(shè)計(jì)性　實(shí)驗(yàn)的選題、設(shè)計(jì)與實(shí)施　
　第一節(jié)　設(shè)計(jì)性　實(shí)驗(yàn)的選題和設(shè)計(jì)　
　第二節(jié)　設(shè)計(jì)性　實(shí)驗(yàn)舉例　
　例1.Balb/c小鼠SLE模型的建立　
　例2.海藻多糖對樹突狀細(xì)胞功能的影響　
　例3.卡介苗對小鼠細(xì)胞免疫功能影響的　實(shí)驗(yàn)研究　
　例4.肺結(jié)核患者外周血輔助性T細(xì)胞亞群變化與結(jié)核病的關(guān)系　
　例5.地塞米松對腫瘤細(xì)胞凋亡的影響

章節(jié)摘錄

版權(quán)頁：插圖：二、設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)的組織實(shí)施設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)通常是在學(xué)生經(jīng)過了常規(guī)的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)訓(xùn)練，有了一定的理論基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)技術(shù)基礎(chǔ)之后開設(shè)。1.設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)的開設(shè)方式（1）可在教學(xué)計(jì)劃內(nèi)的實(shí)驗(yàn)教學(xué)課中穿插進(jìn)行?？筛鶕?jù)實(shí)驗(yàn)課教學(xué)內(nèi)容和進(jìn)度，安排在學(xué)期末，在基本的驗(yàn)證性或綜合性實(shí)驗(yàn)內(nèi)容已經(jīng)完成的基礎(chǔ)上，布置1～2個(gè)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)課題。（2）與開放性實(shí)驗(yàn)相結(jié)合，安排在學(xué)生課外時(shí)間穿插進(jìn)行。2.設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)的教學(xué)組織（1）設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)的選題。設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)的選題除了要遵循前述主要原則外，還應(yīng)考慮教學(xué)大綱，兼顧學(xué)科發(fā)展現(xiàn)狀，以學(xué)生已經(jīng)掌握的基本知識為基礎(chǔ)，難度可適當(dāng)高于所學(xué)知識，有利于學(xué)生將已學(xué)過的知識進(jìn)行系統(tǒng)化和實(shí)用化，有利于啟發(fā)學(xué)生探究學(xué)科理論。也可根據(jù)條件，將設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)的選題與授課教師正在承擔(dān)的科研任務(wù)相結(jié)合，以充分體現(xiàn)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)的探索性和創(chuàng)造性。（2）查閱文獻(xiàn)。選好題后，應(yīng)安排實(shí)驗(yàn)課教師與學(xué)生進(jìn)行充分的溝通和探討，使學(xué)生有目的地查閱文獻(xiàn)，授課教師在此過程中應(yīng)給予必要的指導(dǎo)。（3）實(shí)驗(yàn)方案的確定。這一階段教師應(yīng)要求并指導(dǎo)學(xué)生對所查閱的文獻(xiàn)資料進(jìn)行歸納和總結(jié)，通過對各種實(shí)驗(yàn)方案的比較和論證，確定最佳實(shí)驗(yàn)方案，列出實(shí)驗(yàn)藥品和儀器清單，據(jù)此進(jìn)行充分的實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備。（4）實(shí)驗(yàn)操作。學(xué)生根據(jù)自己提出的實(shí)驗(yàn)方案，利用已準(zhǔn)備好的儀器和藥品，獨(dú)立進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作，在實(shí)驗(yàn)過程中遇到的反?，F(xiàn)象和問題，由學(xué)生自己思考，在整個(gè)過程中學(xué)生是主體，教師起指導(dǎo)作用，一般不直接回答和解決學(xué)生的問題。（5）總結(jié)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，書寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告。這一階段學(xué)生已完成了實(shí)驗(yàn)操作過程，有了相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。在此基礎(chǔ)上，教師應(yīng)指導(dǎo)學(xué)生進(jìn)行原始數(shù)據(jù)的整理、實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析和實(shí)驗(yàn)過程的總結(jié)，討論影響實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵因素。按照科研論文的要求和格式書寫完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告，要求學(xué)生將報(bào)告制成Powe Point文件。（6）舉行設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)報(bào)告會(huì)。安排開展設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)報(bào)告會(huì)，讓學(xué)生在多媒體教室中講解自己的實(shí)驗(yàn)報(bào)告，解答同學(xué)和教師的提問，相互交流和溝通，擴(kuò)展知識面，開闊視野。

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《免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)》供臨床醫(yī)學(xué)、基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)、護(hù)理學(xué)等專業(yè)使用。

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