生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教程

前言

生物化學(xué)是生命科學(xué)、生物技術(shù)、生物工程、食品工程、應(yīng)用化學(xué)，以及農(nóng)、林、醫(yī)等專業(yè)的基礎(chǔ)學(xué)科。生物化學(xué)是以實(shí)驗(yàn)為基礎(chǔ)的學(xué)科，生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)的技術(shù)和方法直接推動(dòng)了生物化學(xué)科學(xué)的發(fā)展。相對(duì)于理論教學(xué)，生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)的教學(xué)具有實(shí)踐性、綜合性和創(chuàng)新性。生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的宗旨是讓學(xué)生掌握生物化學(xué)的基本實(shí)驗(yàn)方法和基本技能，培養(yǎng)學(xué)生觀察問(wèn)題、分析問(wèn)題和解決問(wèn)題的能力，培養(yǎng)學(xué)生嚴(yán)謹(jǐn)、務(wù)實(shí)、創(chuàng)新的科學(xué)作風(fēng)，為日后從事相關(guān)工作和研究奠定堅(jiān)實(shí)的知識(shí)基礎(chǔ)。獨(dú)立學(xué)院是我國(guó)高等教育改革的新成就，獨(dú)立學(xué)院的教材建設(shè)是獨(dú)立學(xué)院人才培養(yǎng)的重要組成部分。為適應(yīng)獨(dú)立學(xué)院“教學(xué)應(yīng)用型”的定位，華中科技大學(xué)出版社組織相關(guān)院校一線教師，結(jié)合多年的實(shí)驗(yàn)教學(xué)經(jīng)驗(yàn)，圍繞“寬口徑、應(yīng)用型、高素質(zhì)”的目標(biāo)，突出實(shí)用、適用、夠用和創(chuàng)新的“三用一新”特點(diǎn)，共同編寫了這本生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教程。本教材共分兩篇10章。第一篇是生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)，主要是規(guī)范學(xué)生實(shí)驗(yàn)行為，介紹傳統(tǒng)的、現(xiàn)代的生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)。第二篇是生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)，根據(jù)參編院校實(shí)驗(yàn)?zāi)夸浐筒糠治墨I(xiàn)，選編了62個(gè)實(shí)驗(yàn)，包括基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)、綜合性實(shí)驗(yàn)和設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)。選編這些實(shí)驗(yàn)，一是為了充分將生物化學(xué)技術(shù)應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)教學(xué)，二是為了配合本系列統(tǒng)編教材《生物化學(xué)》的編排體系，三是為了適應(yīng)應(yīng)用型本科院校學(xué)生的特點(diǎn)、適應(yīng)各地獨(dú)立學(xué)院發(fā)展的不均衡性，方便各校有選擇性地開展實(shí)驗(yàn)教學(xué)。設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)均為編者在科研或指導(dǎo)學(xué)生課題研究中據(jù)實(shí)設(shè)計(jì)的，旨在培養(yǎng)部分學(xué)生的科研、創(chuàng)新能力。最后是附錄，附以生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。本書可作為全國(guó)應(yīng)用型本科院校各類理工科專業(yè)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教材或參考書。參加本書編寫的單位有聊城大學(xué)東昌學(xué)院、湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)、湖南文理學(xué)院、華中科技大學(xué)武昌分校、吉林大學(xué)珠海學(xué)院、浙江農(nóng)林大學(xué)、山東師范大學(xué)、沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)、電子科技大學(xué)中山學(xué)院和中南民族大學(xué)工商學(xué)院。具體編寫分工如下：王金亭編寫第1、2章，方俊、周曉明、胡超編寫第3章第4、5節(jié)和實(shí)驗(yàn)4、11、16、17、18、22、25、36、50、53、59，李峰編寫第3章第1、2節(jié)和實(shí)驗(yàn)10、20、58，張小菊編寫第3章第3、6節(jié)和實(shí)驗(yàn)24、51、52、54、60，夏婷編寫實(shí)驗(yàn)3、19、28、41、55、56，周存山編寫實(shí)驗(yàn)37、38、39、40、48、49、62，吳廣慶編寫實(shí)驗(yàn)1、2、6、7、8、15、21、29、30、35、57，李雪雁編寫實(shí)驗(yàn)5、9、12、14、26，杜希華編寫實(shí)驗(yàn)27、42、43、6l，林佳編寫實(shí)驗(yàn)23、44、45、46、47，劉鵬舉編寫實(shí)驗(yàn)13、31、32、33、34。附錄部分由王金亭、杜希華和方俊提供。最后由王金亭負(fù)責(zé)全書的統(tǒng)稿，王金亭和方俊共同定稿，吳廣慶也參與了部分校正工作。華中科技大學(xué)出版社對(duì)本教材的編寫給予了大力支持與幫助，在此表示感謝。同時(shí)對(duì)選用的參考文獻(xiàn)及有關(guān)材料的作者也表示衷心的感謝。

內(nèi)容概要

全書包括兩篇共10章。第一篇是生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)，主要是規(guī)范學(xué)生實(shí)驗(yàn)行為，介紹傳統(tǒng)的、現(xiàn)代的生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)。第二篇是生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)，按照配套教材《生物化學(xué)》的知識(shí)體系，根據(jù)參編院校實(shí)驗(yàn)?zāi)夸浐筒糠治墨I(xiàn)，選編了62個(gè)實(shí)驗(yàn)，包括基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)、綜合性實(shí)驗(yàn)和設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)。最后是附錄，選擇了常用的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)共26個(gè)表格供參考。本書可作為全國(guó)應(yīng)用型本科院校各類理工科專業(yè)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教材或參考書。

書籍目錄

第一篇  生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)  第1章  生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)    1.1  實(shí)驗(yàn)室規(guī)范    1.2  玻璃儀器    1.3  生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)常用儀器  第2章  生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本要求    2.1  實(shí)驗(yàn)樣品的制備    2.2  實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性與誤差    2.3  實(shí)驗(yàn)記錄和實(shí)驗(yàn)報(bào)告  第3章  生物化學(xué)基本實(shí)驗(yàn)技術(shù)    3.1  層析技術(shù)    3.2  電泳技術(shù)    3.3  離心技術(shù)    3.4  膜分離技術(shù)    3.5  光譜學(xué)技術(shù)    3.6  其他生化實(shí)驗(yàn)技術(shù)第二篇  生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)  第4章  蛋白質(zhì)    實(shí)驗(yàn)1  氨基酸和蛋白質(zhì)的呈色反應(yīng)    實(shí)驗(yàn)2  蛋白質(zhì)等電點(diǎn)的測(cè)定和沉淀反應(yīng)    實(shí)驗(yàn)3  血清蛋白鹽析及分子篩層析脫鹽    實(shí)驗(yàn)4  蛋白質(zhì)含量的測(cè)定      Ⅰ  雙縮脲法測(cè)定蛋白質(zhì)含量      Ⅱ  考馬斯亮藍(lán)結(jié)合法測(cè)定蛋白質(zhì)含量(Bradford法)      Ⅲ  紫外光吸收法測(cè)定蛋白質(zhì)含量      Ⅳ  微量凱氏定氮法測(cè)定總蛋白含量    實(shí)驗(yàn)5  氨基酸的分離鑒定      Ⅰ  紙層析分離鑒定氨基酸      Ⅱ  離子交換層析分離混合氨基酸    實(shí)驗(yàn)6  血清蛋白的醋酸纖維素薄膜電泳    實(shí)驗(yàn)7  DNS-氨基酸的制備和鑒定    實(shí)驗(yàn)8  DNP-氨基酸的制備和鑒定    實(shí)驗(yàn)9  用DNS法鑒定蛋白質(zhì)或多肽的N-端氨基酸    實(shí)驗(yàn)10  SDS-聚丙烯酰胺凝膠盤狀電泳分離細(xì)菌總蛋白質(zhì)    實(shí)驗(yàn)11  SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳測(cè)定蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量    實(shí)驗(yàn)12  牛乳中蛋白質(zhì)的提取與鑒定    實(shí)驗(yàn)13  大豆蛋白的提取與含量測(cè)定  第5章  核酸    實(shí)驗(yàn)14  核酸含量的測(cè)定      Ⅰ  定磷法定量測(cè)定核酸      Ⅱ  地衣酚法定量測(cè)定RNA      Ⅲ  二苯胺法測(cè)定DNA含量    實(shí)驗(yàn)15  過(guò)碘酸氧化法定量測(cè)定核苷酸    實(shí)驗(yàn)16  酵母核糖核酸的分離及組分鑒定    實(shí)驗(yàn)17  菜花(花椰菜)中核酸的分離和鑒定    實(shí)驗(yàn)18  動(dòng)物肝臟中DNA的提取    實(shí)驗(yàn)19  堿裂解法小量提取質(zhì)粒DNA    實(shí)驗(yàn)20  DNA瓊脂糖凝膠電泳    實(shí)驗(yàn)21  AMP、ADP和ATP的分離      Ⅰ  薄層層析分離AMP、ADF和ATP      Ⅱ  醋酸纖維素薄膜電泳鑒定AMP、ADP、ATP  第6章  酶學(xué)    實(shí)驗(yàn)22  酶的特性實(shí)驗(yàn)    實(shí)驗(yàn)23  米氏常數(shù)測(cè)定      Ⅰ  脲酶米氏常數(shù)的簡(jiǎn)易測(cè)定      Ⅱ  過(guò)氧化氫酶米氏常數(shù)的測(cè)定      Ⅲ  胰蛋白酶米氏常數(shù)的測(cè)定    實(shí)驗(yàn)24  酶活力的測(cè)定      Ⅰ  液化型淀粉酶活力的測(cè)定      Ⅱ  薄層層析法鑒定轉(zhuǎn)氨酶活性      Ⅲ  分光光度法測(cè)定血液中轉(zhuǎn)氨酶的活力    實(shí)驗(yàn)25  酶的制備      Ⅰ  乳酸脫氫酶粗提液的制備及活力測(cè)定      Ⅱ  枯草桿菌堿性磷酸酶的制備及酶活力的測(cè)定      Ⅲ  馬鈴薯多酚氧化酶的制備及性質(zhì)實(shí)驗(yàn)    實(shí)驗(yàn)26  酶的固定化及對(duì)酶活性的影響    實(shí)驗(yàn)27  琥珀酸脫氫酶競(jìng)爭(zhēng)性抑制    實(shí)驗(yàn)28  蔗糖酶純度和相對(duì)分子質(zhì)量測(cè)定(SDS-PAGE電泳法)  第7章  維生素和輔酶    實(shí)驗(yàn)29  紫外分光光度法測(cè)定魚肝油中維生素A的含量    實(shí)驗(yàn)30  食物中脂溶性維生素含量分析(高效液相色譜)    實(shí)驗(yàn)31  維生素B1的定性測(cè)定    實(shí)驗(yàn)32  維生素B1的含量測(cè)定    實(shí)驗(yàn)33  熒光光度法測(cè)定維生素B2的含量    實(shí)驗(yàn)34  測(cè)定維生素C的含量      Ⅰ  2，6-二氯酚靛酚滴定法測(cè)定維生素C的含量      Ⅱ  銅離子氧化法測(cè)定維生素C的含量      Ⅲ  磷鉬酸法測(cè)定維生素C的含量    實(shí)驗(yàn)35  輔酶Q10的制備和檢測(cè)    實(shí)驗(yàn)36  分離層析儀分離核黃素和血紅蛋白  第8章  生物能學(xué)和物質(zhì)代謝    實(shí)驗(yàn)37  丙酮酸含量的測(cè)定(分光光度法)    實(shí)驗(yàn)38  發(fā)酵過(guò)程中無(wú)機(jī)磷的利用    實(shí)驗(yàn)39  肌糖原酵解作用    實(shí)驗(yàn)40  糖酵解中間產(chǎn)物的鑒定    實(shí)驗(yàn)41  脂肪酸的β-氧化    實(shí)驗(yàn)42  2，6-二氯酚靛酚顯色反應(yīng)測(cè)定電子傳遞    實(shí)驗(yàn)43  乳酸脫氫酶的遞氫作用  第9章  綜合性實(shí)驗(yàn)    實(shí)驗(yàn)44  糖的顏色反應(yīng)      Ⅰ  Moliseh反應(yīng)鑒定醛糖      Ⅱ  Seliwanoff反應(yīng)鑒定酮糖      Ⅲ  Tollen反應(yīng)鑒定戊糖    實(shí)驗(yàn)45  血糖含量的測(cè)定      Ⅰ  Folin-Wu法測(cè)定血糖含量      Ⅱ  Folin-Malmors法測(cè)定血糖含量      Ⅲ  鄰甲苯胺法測(cè)定血糖含量      Ⅳ  GOD-PAP法測(cè)定血糖含量    實(shí)驗(yàn)46  總糖和還原糖含量的測(cè)定      Ⅰ  蒽酮比色法測(cè)定糖的含量      Ⅱ  斐林試劑比色法測(cè)定糖的含量    實(shí)驗(yàn)47  脂類的測(cè)定      Ⅰ  索氏抽提法測(cè)定粗脂肪含量      Ⅱ  脂肪酸的測(cè)定      Ⅲ  血清甘油三酯簡(jiǎn)易測(cè)定法      Ⅳ  醋酸酐法測(cè)定血清中膽固醇含量    實(shí)驗(yàn)48  天然產(chǎn)物中多糖的分離、純化與鑒定      Ⅰ  多糖的提取、純化      Ⅱ  多糖的鑒定    實(shí)驗(yàn)49  血清蛋白的分離、純化與鑒定    實(shí)驗(yàn)50  凝膠層析法分離純化脲酶    實(shí)驗(yàn)51  小麥萌發(fā)前后淀粉酶活力的比較    實(shí)驗(yàn)52  質(zhì)粒DNA的分離、純化及鑒定    實(shí)驗(yàn)53  多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)擴(kuò)增目的基因片段    實(shí)驗(yàn)54  重組質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)化    實(shí)驗(yàn)55  感受態(tài)細(xì)胞的制備及轉(zhuǎn)化    實(shí)驗(yàn)56  DNA的酶切分析    實(shí)驗(yàn)57  植物總黃酮的提取與測(cè)定  第10章  設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)    實(shí)驗(yàn)58  半定量RT-PCR檢測(cè)基因的表達(dá)差異    實(shí)驗(yàn)59  卵磷脂的提取和鑒定    實(shí)驗(yàn)60  強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換樹脂在廢水處理中的應(yīng)用    實(shí)驗(yàn)61  轉(zhuǎn)基因植物的PCR鑒定    實(shí)驗(yàn)62  三聚氰胺含量的測(cè)定  附錄    附錄A  緩沖液的配制    附錄B  常用實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表    附錄C  硫酸銨飽和度常用表    附錄D  層析技術(shù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)  參考文獻(xiàn)

章節(jié)摘錄

插圖：第1章  生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)1.1實(shí)驗(yàn)室規(guī)范1.1.1實(shí)驗(yàn)室規(guī)則1.實(shí)驗(yàn)室守則（1）實(shí)驗(yàn)室是實(shí)驗(yàn)教學(xué)和科學(xué)研究的重要基地，要求布局科學(xué)合理，設(shè)施設(shè)備完好，電路、水路、氣路規(guī)范，通風(fēng)、照明符合要求，環(huán)境整潔、優(yōu)美、安全。（2）進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室學(xué)習(xí)、工作的學(xué)生、教師，必須遵守實(shí)驗(yàn)室各項(xiàng)規(guī)章制度。（3）建立健全各種管理制度，明確責(zé)任人，明確實(shí)驗(yàn)室工作流程。經(jīng)常開展安全教育活動(dòng)，安裝醒目的安全警示標(biāo)志，制訂應(yīng)急預(yù)案，保持安全通道暢通。（4）實(shí)驗(yàn)室的儀器設(shè)備，由專人管理維護(hù)，保證設(shè)備的完好率；使用儀器設(shè)備必須嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，違者管理人員有責(zé)任停止其使用。（5）儀器設(shè)備損壞、丟失以及實(shí)驗(yàn)耗材的正常耗損，要及時(shí)上報(bào)，按有關(guān)規(guī)定處理。（6）實(shí)驗(yàn)室的物資，應(yīng)妥善保存、管理，特別對(duì)有毒、有害、易燃、易爆物品和貴重金屬等，要求專人嚴(yán)格管理，專門存放，嚴(yán)格領(lǐng)用，嚴(yán)防意外事故的發(fā)生。（7）實(shí)驗(yàn)進(jìn)行中，實(shí)驗(yàn)人員不得擅自離開崗位，確需離開時(shí)，應(yīng)交代其他同志照管并講明注意事項(xiàng)。（8）實(shí)驗(yàn)室內(nèi)保持安靜、整潔、衛(wèi)生，嚴(yán)禁喧嘩，不得吸煙、飲食。（9）保護(hù)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境，妥善處理實(shí)驗(yàn)室“三廢”。（10）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，關(guān)閉水、電、氣閥門，切斷水源、電源、氣源。2.指導(dǎo)教師守則（1）實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)教師是指承擔(dān)實(shí)驗(yàn)課教學(xué)的教師，由課程組負(fù)責(zé)安排。（2）實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)教師進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，必須遵守實(shí)驗(yàn)室管理制度，穿戴統(tǒng)一的實(shí)驗(yàn)服裝，按照實(shí)驗(yàn)室工作流程開展實(shí)驗(yàn)教學(xué)。（3）實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)教師必須在開學(xué)初、實(shí)驗(yàn)前主動(dòng)與實(shí)驗(yàn)室管理人員聯(lián)系，提交實(shí)驗(yàn)計(jì)劃備案，以便實(shí)驗(yàn)室人員做好儀器、藥品的調(diào)配并協(xié)助工作。（4）實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)教師必須在正式實(shí)驗(yàn)前做完預(yù)備實(shí)驗(yàn)，并留存記錄。（5）實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)教師負(fù)責(zé)實(shí)驗(yàn)計(jì)劃、實(shí)驗(yàn)報(bào)告、實(shí)驗(yàn)考核和實(shí)驗(yàn)運(yùn)行記錄等實(shí)驗(yàn)教學(xué)環(huán)節(jié)的實(shí)施；指導(dǎo)教師必須現(xiàn)場(chǎng)指導(dǎo)學(xué)生開展實(shí)驗(yàn)，對(duì)學(xué)生實(shí)驗(yàn)期間的安全負(fù)責(zé)。3.學(xué)生實(shí)驗(yàn)守則（1）學(xué)生進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)，必須嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室各項(xiàng)規(guī)章制度，穿戴學(xué)校統(tǒng)一的實(shí)驗(yàn)服裝，服從教師指導(dǎo)和管理，注意安全。（2）保持實(shí)驗(yàn)室整潔、安靜，嚴(yán)禁喧嘩、打鬧，不得吸煙、飲食、隨地吐痰、亂扔紙屑和其他雜物。

編輯推薦

《全國(guó)應(yīng)用型本科院?；瘜W(xué)課程統(tǒng)編教材?生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教程》可作為全國(guó)應(yīng)用型本科院校各類理工科專業(yè)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教材或參考書。

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