出版時間:2012-8 出版社:同濟大學(xué)出版社 作者:汪世龍 頁數(shù):383 字?jǐn)?shù):624000
內(nèi)容概要
《蛋白質(zhì)化學(xué)》由汪世龍等編著,本書系統(tǒng)講述了蛋白質(zhì)化學(xué)的基礎(chǔ)理論和實驗技巧,同時也展示了蛋白質(zhì)研究的最新技術(shù)。本書以蛋白質(zhì)研究的過程為主線,依次介紹了與蛋白質(zhì)化學(xué)相關(guān)的基礎(chǔ)知識、蛋白質(zhì)的制備(包括生物合成和化學(xué)合成)、蛋白質(zhì)的分離與純化技術(shù)(包括層析技術(shù)、高效液相色譜、SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳、等電聚焦、毛細(xì)管電泳、連續(xù)自由流電泳)、蛋白質(zhì)的分析與鑒定(包括氨基酸序列分析、質(zhì)譜技術(shù))以及蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能表征(核磁共振技術(shù)、X射線晶體衍射技術(shù)、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的研究方法、膜片鉗技術(shù))等,是一本系統(tǒng)介紹蛋白質(zhì)研究的教科書。
《蛋白質(zhì)化學(xué)》可作為生物學(xué)、化學(xué)、醫(yī)學(xué)專業(yè)的大學(xué)生、研究生教學(xué)課奉和從事蛋白質(zhì)研究的科研人員的參考資料。
書籍目錄
前言
第1章 蛋白質(zhì)化學(xué)概論
第2章 蛋白質(zhì)的生物合成
第3章 從肽的化學(xué)合成
第4章 蛋白質(zhì)化學(xué)中的層析技術(shù)
第5章 高效液相色譜
第6章 聚丙烯酰胺凝膠電泳
第7章 蛋白質(zhì)等電聚集
第8章 毛細(xì)管電泳
第9章 連續(xù)自由電流電泳
第10章 蛋白質(zhì)和多肽的氨基酸序列分析
第11章 質(zhì)譜技術(shù)在蛋白質(zhì)、多肽化學(xué)中的應(yīng)用
第12章 核磁共振波譜在蛋白質(zhì)化學(xué)中的應(yīng)用
第13章 X射線晶體衍射技術(shù)
第14章 蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的研究方法
第15章 膜片鉗技術(shù)簡介
附錄 “蛋白質(zhì)研究”國家重大科學(xué)研究計劃
章節(jié)摘錄
版權(quán)頁: 插圖: 當(dāng)然有些生物分子本身就有特征的理化性質(zhì),因此在層析過程中就可利用這些理化性質(zhì)進行追蹤,不用衍生化。例如,在一些復(fù)合蛋白中,一些蛋白質(zhì)以外的其他組分也可作為蛋A質(zhì)檢測的依據(jù),例如血紅蛋白中的血色素,以及轉(zhuǎn)鐵蛋白配位結(jié)合的鐵離子。 蛋A質(zhì)層析過程中很少在層析前先衍生化的。但是在測定蛋白質(zhì)末端的方法中較常用的仍是先用既有熒光或有色的又能和蛋白質(zhì)中氨基反應(yīng)的試劑作用,而后,水解斷裂肽鍵,得到的水解產(chǎn)物中基本上全是游離的氨基酸,只有N—末端的氨基酸和賴氨酸等殘基的側(cè)鏈上接有熒光或有色的試劑(有時試劑的反應(yīng)專一性較差,可能還有一些其他的氨基酸殘基也會被衍生化)。水解產(chǎn)物早年進行紙層析鑒定,近年則用鋪有聚丙烯酰胺的薄膜進行層析分析。點樣后,用兩種不同的溶劑系統(tǒng)展開,不同氨基酸的衍生物在兩相層析的圖譜上的位置不同。如果有一系列已知的氨基酸衍生物在兩相層析圖譜上的位置事先已被測定,這樣從標(biāo)準(zhǔn)圖譜上就能查出所測到的結(jié)構(gòu)。 分離后再進行化學(xué)反應(yīng),進行檢測是顯示層析結(jié)果的另一類方法。這類方法較多地應(yīng)用在分子量較小的物質(zhì),因為小分子的反應(yīng)比大分子要快得多。在紙層析和薄層層析展開后,經(jīng)常是噴上顯色試劑,而后加熱,結(jié)果就顯示出來。例如,氨基酸和小肽層析后,用茚三酮顯色。對柱層析結(jié)果的顯示要有專門的裝置,諸如樣品和試劑的混合器和反應(yīng)器等,可是原理卻和紙層析或薄層層析的顯色一樣。目前所用的氨基酸自動分析儀,在氨基酸分離后,也是和茚三酮反應(yīng)顯色。 除了親和層析外,利用上述方法雖然可以檢測到在層析過程中蛋白質(zhì)所在的級分,這是必需的。然而所要研究的樣品,還要通過活性的檢測或是其他特性的鑒定,才能從諸多的蛋A質(zhì)中鑒別分離得到。盡管這一點是很顯而易見的,但是也常常被從事蛋白質(zhì)研究不久的生化工作者忽視。為此,不論用何種方法,其中包括層析技術(shù),分離純化蛋白質(zhì)樣品前,原則上說,首先應(yīng)建立所要研究的蛋白質(zhì)的活性檢測方法。活性檢測方法不僅可以從分離所得到的諸多的蛋白質(zhì)級分中,鑒別到所要研究的樣品,而且還能對所用的分離純化方法的優(yōu)劣作出評估。如果在分離純化后,研究對象的比活,即單位重量的蛋白質(zhì)所表現(xiàn)的活性,沒有提高,則說明研究的對象和其他的雜蛋白在所用的這種分離過程中沒有能分開。如果在分離純化后,盡管所需的樣品比活有所提高,但是總的活性回收卻很低。這提示了在整個分離純化過程中,所研究的樣品或是有損失,或是有失活現(xiàn)象??傊然钐岣卟幻黠@,或是總活性回收率不高,都說明了所用的分離純化方法不理想,應(yīng)該更換其他的分離方法。
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