出版時間:2012-5 出版社:第二軍醫(yī)大學(xué)出版社 作者:曲萌,孫立偉,王艷雙 著 頁數(shù):168
內(nèi)容概要
《分子生物學(xué)實驗技術(shù)》深入淺出地介紹了分子生物學(xué)相關(guān)技術(shù)的理論基礎(chǔ),同時每個章節(jié)后編有與技術(shù)理論相關(guān)的實驗方法,詳細(xì)介紹了實驗原理,試劑的配制,所需儀器、材料,操作步驟及注意事項。在滿足基本教學(xué)需要的基礎(chǔ)上,擴展了蛋白質(zhì)組學(xué)、基因芯片及流式細(xì)胞等前沿技術(shù)?! 斗肿由飳W(xué)實驗技術(shù)》具有較強的實用性和針對性,可以滿足醫(yī)學(xué)院校本科生及研究生的教學(xué)需要,同時也可作為廣大實驗人員的參考書。
書籍目錄
第一章 核酸的分離與純化第一節(jié) 核酸分離與純化的技術(shù)路線與原則第二節(jié) DNA的分離制備第三節(jié) 質(zhì)粒的分離與純化第四節(jié) RNA的分離制備第五節(jié) 實驗方法實驗一 真核細(xì)胞染色體DNA的制備實驗二 細(xì)菌的培養(yǎng)、保存和收集實驗三 質(zhì)粒DNA的提取實驗四 組織和細(xì)胞總RNA提取(TRIzol法)實驗五 核酸的定量第二章 蛋白質(zhì)的分離與純化第一節(jié) 生物材料的前處理第二節(jié) 蛋白質(zhì)分離與純化的方法第三節(jié) 蛋白質(zhì)的鑒定第四節(jié) 實驗方法實驗一 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法測定蛋白質(zhì)的分子量實驗二 Western印跡法檢測表達(dá)蛋白實驗三 免疫熒光法檢測重組蛋白第三章 電泳技術(shù)第一節(jié) 概述第二節(jié) 電泳基本原理第三節(jié) 影響電泳遷移率的因素第四節(jié) 核酸電泳的指示劑與染色劑第五節(jié) 不同波長紫外線對EB-DNA復(fù)合物的影響第六節(jié) 實驗方法實驗一 瓊脂糖凝膠電泳法檢測DNA實驗二 DNA聚丙烯酰胺凝膠電泳第四章 DNA重組技術(shù)第一節(jié) DNA限制性內(nèi)切酶酶切技術(shù)第二節(jié) DNA重組方法第三節(jié) 質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化與細(xì)胞轉(zhuǎn)染的方法第四節(jié) DNA重組體的篩選與鑒定第五節(jié) 克隆化基因的表達(dá)第六節(jié) 實驗方法實驗一 DNA限制性內(nèi)切酶消化法實驗二 DNA分子的體外連接實驗三 感受態(tài)細(xì)胞的制備實驗四 細(xì)菌的轉(zhuǎn)化實驗五 重組質(zhì)粒的α互補篩選第五章 核酸分子雜交第一節(jié) 核酸分子雜交基本原理及分類第二節(jié) 核酸分子雜交的基本方法第三節(jié) 探針的種類及標(biāo)記第四節(jié) 核酸分子雜交第五節(jié) 雜交信號的檢測第六節(jié) 實驗方法實驗一 地高辛標(biāo)記DNA探針實驗二 放射性核素32P隨機引物延伸標(biāo)記法實驗三 Souther印跡雜交檢測HBV-DNA實驗四 Northern印跡雜交檢測HCV-RNA第六章 聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)第一節(jié) PCR的反應(yīng)體系第二節(jié) PCR的基本步驟第三節(jié) PCR的衍生技術(shù)第四節(jié) PCR技術(shù)在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用第五節(jié) 實驗方法實驗一 PCR檢測病原體(試劑盒法)實驗二 PCR檢測遺傳疾病的相關(guān)基因?qū)嶒炄?RT-PCR檢測基因的表達(dá)第七章 蛋白質(zhì)組學(xué)研究技術(shù)第一節(jié) 蛋白質(zhì)組學(xué)概論第二節(jié) 細(xì)胞及亞細(xì)胞樣品制備方法第三節(jié) 雙向電泳技術(shù)第四節(jié) 蛋白質(zhì)鑒定技術(shù)第五節(jié) 實驗方法實驗一 大腸埃希菌雙向凝膠電泳圖譜的建立實驗二 真核酵母細(xì)胞雙向圖譜的建立第八章 生物芯片技術(shù)與應(yīng)用第一節(jié) 生物芯片技術(shù)原理第二節(jié) 芯片的構(gòu)建及操作流程第三節(jié) 芯片技術(shù)的應(yīng)用第九章 細(xì)胞凋亡與檢測技術(shù)第一節(jié) 細(xì)胞凋亡概述第二節(jié) 凋亡細(xì)胞的形態(tài)和生化特征及檢測方法第三節(jié) 流式細(xì)胞術(shù)在細(xì)胞凋亡研究中的應(yīng)用附錄一 分子生物學(xué)實驗室常用儀器的使用方法與保養(yǎng)附錄二 實驗用玻璃器皿的準(zhǔn)備附錄三 常用緩沖液的配制附錄四 常用單位的換算附錄五 常用DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)參照物附錄六 與DNA凝膠電泳有關(guān)的數(shù)據(jù)
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《分子生物學(xué)實驗技術(shù)》共由核酸的分離與純化、蛋白質(zhì)的分離與純化、電泳技術(shù)、DNA重組技術(shù)、核酸分子雜交技術(shù)、PCR技術(shù)、蛋白質(zhì)組學(xué)研究技術(shù)、生物芯片技術(shù)、細(xì)胞凋亡與檢測技術(shù)以及附錄十部分內(nèi)容組成,以核酸的分離與純化、DNA重組技術(shù)、PCR技術(shù)為核心,深入淺出地介紹了各相關(guān)技術(shù)的理論基礎(chǔ),同時每個章節(jié)后編有與技術(shù)理論相關(guān)的實驗方法,詳細(xì)介紹了實驗原理,試劑的配制,所需儀器、材料,操作步驟及注意事項。在滿足基本教學(xué)需要的基礎(chǔ)上,擴展了蛋白質(zhì)組學(xué)、基因芯片及流式細(xì)胞等前沿技術(shù),從知識的深度和廣度上來滿足不同層次學(xué)生的需要。此外,在附錄中詳細(xì)介紹了PCR擴增儀、電泳儀、電子天平等分子生物學(xué)常用儀器的使用方法和注意事項,常用緩沖液的配制方法及與凝膠電泳相關(guān)的一系列數(shù)據(jù),為初學(xué)者快速提高動手能力奠定了良好的基礎(chǔ)。
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