高等院校實(shí)驗(yàn)教材

內(nèi)容概要

《高等院校實(shí)驗(yàn)教材:細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》主要從基礎(chǔ)性、綜合性、設(shè)計(jì)與創(chuàng)新性三個(gè)不同層次進(jìn)行設(shè)計(jì)編寫，基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)部分主要包括顯微及制片技術(shù)以及細(xì)胞結(jié)構(gòu)、組分、生命活動(dòng)分析等幾方面的內(nèi)容，這部分實(shí)驗(yàn)的目的是為了鞏固學(xué)生對(duì)細(xì)胞生物學(xué)理論知識(shí)、基本概念的理解和認(rèn)識(shí)，綜合性實(shí)驗(yàn)部分特別設(shè)計(jì)了動(dòng)植物細(xì)胞培養(yǎng)、單克隆抗體的制備、基因?qū)?、基因鑒定等細(xì)胞工程及與細(xì)胞生物學(xué)相關(guān)的分子生物學(xué)技術(shù)，強(qiáng)調(diào)細(xì)胞操作技術(shù)和綜舍實(shí)驗(yàn)技能；設(shè)計(jì)與創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)則強(qiáng)調(diào)對(duì)各項(xiàng)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的靈活應(yīng)用。

書籍目錄

細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室規(guī)則 實(shí)驗(yàn)一普通光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造與使用 實(shí)驗(yàn)二特殊顯微鏡的原理和使用 實(shí)驗(yàn)三光學(xué)顯微標(biāo)本的制作技術(shù) 實(shí)驗(yàn)四細(xì)胞的基本形態(tài)與結(jié)構(gòu) 實(shí)驗(yàn)五細(xì)胞的化學(xué)成分 實(shí)驗(yàn)六線粒體和液泡系的超活染色與觀察 實(shí)驗(yàn)七葉綠體的分離與熒光觀察 實(shí)驗(yàn)八線粒體的分離與觀察 實(shí)驗(yàn)九細(xì)胞器的分離 實(shí)驗(yàn)十細(xì)胞有絲分裂 實(shí)驗(yàn)十一生殖細(xì)胞減數(shù)分裂 實(shí)驗(yàn)十二動(dòng)物染色體標(biāo)本的制備與觀察 實(shí)驗(yàn)十三染色體核仁組織區(qū)的銀染色法 實(shí)驗(yàn)十四動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)——原代細(xì)胞培養(yǎng) 實(shí)驗(yàn)十五動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)——傳代細(xì)胞培養(yǎng) 實(shí)驗(yàn)十六動(dòng)物細(xì)胞的凍存、復(fù)蘇與運(yùn)輸 實(shí)驗(yàn)十七雞血細(xì)胞的體外融合 實(shí)驗(yàn)十八細(xì)胞電融合 實(shí)驗(yàn)十九膜蛋白質(zhì)的分離 實(shí)驗(yàn)二十脂質(zhì)體的制備 實(shí)驗(yàn)二十一凋亡細(xì)胞的生化分析 實(shí)驗(yàn)二十二誘變物質(zhì)的微核測(cè)試 實(shí)驗(yàn)二十三細(xì)胞電泳 參考文獻(xiàn)

章節(jié)摘錄

版權(quán)頁(yè)：   插圖：   簡(jiǎn)單固定劑即單一的固定劑，常用的有乙醇、甲醛、冰醋酸、升汞、苦味酸、鉻酸、重鉻酸鉀和鋨酸。其中，苦味酸、升汞、鉻酸既能凝固細(xì)胞清蛋白，又能凝同核蛋白；乙醇只能凝固清蛋白，而醋酸只能凝固核蛋白；甲醛、鋨酸和重鉻酸鉀對(duì)這兩種蛋白質(zhì)都不凝固。簡(jiǎn)單固定劑的局限性較大，如將其適當(dāng)混合，制成復(fù)合固定劑可以取得更好的效果。常用的混合固定劑有： Bouin液（70份苦味酸飽和水溶液+25份4％甲醛+5份冰醋酸）、Zenker液（升汞5g+重鉻酸鉀2.5g+硫酸鈉1.0q+5mL冰醋酸+100mL蒸餾水）、Carnoy改良液（3份無(wú)水乙醇+1份冰醋酸）等。固定劑的種類甚多，我們必須依據(jù)各種固定劑的性能及制片的不同要求來(lái)加以選擇。 固定時(shí)，須注意以下幾點(diǎn)： （1）固定劑應(yīng)有足夠的量，一般為組織塊體積的10～15倍。 （2）如所固定的材料外表有不易穿透的物質(zhì)，可將材料先在含乙醇的溶液中固定幾分鐘，再移入水溶性的固定液。 （3）材料固定后如不立即下沉，可將其中氣泡抽出。 （4）固定時(shí)間依材料大小、固定劑種類而異，可從1h到幾十小時(shí)，有時(shí)中間需要更新固定劑。某些固定劑對(duì)組織的硬化作用較強(qiáng)，作用時(shí)間應(yīng)嚴(yán)加控制，不能過(guò)長(zhǎng)。 （5）一般固定劑都以新配制的為好，用過(guò)的不能再用。有些混合固定劑由甲、乙兩液合并者，一定要在使用前才混合。 （6）固定完畢，根據(jù)所用固定劑的不同，用水或乙醇沖掉殘留的固定劑，以免同定劑形成沉淀，影響以后組織塊的染色。 3.脫水 生物組織中含有大量的水分，它和石蠟是不能相溶的，致使在包埋時(shí)石蠟無(wú)法滲入組織內(nèi)部，因此須使用脫水劑將水分除盡，這就是脫水的作用。 脫水劑必須能與水以任何比例相混合。脫水劑有兩類：一類是非石蠟溶劑，如乙醇、丙酮等，脫水后必須再經(jīng)過(guò)透明才能透蠟包埋；另一類是兼石蠟溶劑，如正丁醇，脫水后即可直接透蠟。 常用的脫水劑是乙醇，因?yàn)樗鼉r(jià)格便宜，易于得到。為了避免劇烈擴(kuò)散引起的組織強(qiáng)烈收縮，脫水步驟應(yīng)從低到高以一定的濃度梯度來(lái)進(jìn)行，一般組織從30％乙醇開(kāi)始，經(jīng)過(guò)50％、70％、80％、95％、100％至完全脫水，對(duì)于一些柔軟的組織應(yīng)從15％開(kāi)始。脫水時(shí)間依據(jù)組織的類型和大小而定，一般在各級(jí)乙醇中放置45～60min，如果中間需停頓，應(yīng)使材料停留在70%乙醇中，因?yàn)榈蜐舛纫掖家资菇M織變軟、解體，高濃度乙醇有脆化組織作用，放置時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)，另外，脫水必須在有蓋瓶中進(jìn)行，以防止高濃度乙醇吸收空氣中水分導(dǎo)致濃度降低而使脫水不徹底。需要保存的材料可脫水至70%乙醇時(shí)停留其中，如需長(zhǎng)期保存，可加入等量的甘油。

編輯推薦

《高等院校實(shí)驗(yàn)教材:細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》使學(xué)生掌握細(xì)胞生物學(xué)的基本實(shí)驗(yàn)技能和操作方法，通過(guò)實(shí)驗(yàn)的實(shí)施，初步培養(yǎng)學(xué)生從事科學(xué)研究和論文寫作的能力。

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