臨床微生物學檢驗實驗指導

前言

隨著臨床醫(yī)學和生命科學技術的不斷發(fā)展，要求新時代的醫(yī)學檢驗人才應具備與時俱進的知識結構體系。《臨床微生物學檢驗》是醫(yī)學檢驗專業(yè)的主干課程之一，其中基本技能的教學和訓練、基礎知識和基本理論與臨床的密切結合是學好該課程的關鍵。為此，全國高等醫(yī)藥院校醫(yī)學檢驗專業(yè)規(guī)劃教材建設委員會在醫(yī)學檢驗專業(yè)第二輪規(guī)劃教材編寫時，新增了《臨床微生物學檢驗實驗指導》。本教材以培養(yǎng)實際操作能力為目的，依據教學大綱要求，與《臨床微生物學檢驗》配套，共同完成課程的教學目標。教材以實驗技術為主線，圍繞驗證性實驗、設計性實驗和綜合性實驗3大類，由實驗室規(guī)則和常用儀器設備、細菌學檢驗基本技術、常見病原菌的檢驗、常見病原性真菌的培養(yǎng)和鑒定、抗菌藥物敏感性試驗與耐藥性檢測、常見病毒檢測技術、常見臨床標本的細菌學檢驗等7個部分，共32個實驗組成。旨在通過驗證性實驗使學生掌握最基本的臨床微生物學理論和檢驗技術，通過設計性實驗培養(yǎng)學生科研創(chuàng)新的基本素養(yǎng)，通過綜合性實驗培養(yǎng)學生運用所學知識分析問題和解決問題的能力。教材內容突出理論聯系實際，注重基礎與臨床緊密結合，兼顧基礎性、系統(tǒng)性和實用性，以期在有限的實驗教學時數內達到較好的教學效果。教材的編寫格式包括實驗目的、實驗器材、實驗方法、實驗結果、注意事項和思考題等，涉及的實驗原理部分，為避免與理論教材重復，原則上不再編入，重點突出實驗方法和技術。為了方便教學，特別在教材的第一部分介紹了微生物實驗室常用儀器設備，在附錄中列舉了常見培養(yǎng)基、常用染色液與試劑的配方和用途，并增加了臨床標本檢驗實驗記錄表等。由于我們的學術水平和編寫能力有限，盡管全體編者做了很大的努力，但缺點和錯誤仍在所難免，敬請廣大師生在使用過程中批評指正。

內容概要

本書為全國高等醫(yī)藥院校醫(yī)學檢驗專業(yè)規(guī)劃教材之一，是《微生物學檢驗》的配套用書。全書分7單元，共32個實驗。介紹了實驗室規(guī)則和常用儀器設備，詳細講解了細菌學檢驗基本技術、常見病原菌的檢驗、常見病原性真菌的培養(yǎng)和鑒定、抗菌藥物敏感性試驗與耐藥性檢測、常見病毒檢測技術以及常見臨床標本的細菌學檢驗。書中配有操作示意圖及微生物形態(tài)彩圖，直觀而實用；書末附有常用培養(yǎng)基、染液和試劑的配制方法及用途，便于查閱。    本書可供高等院校醫(yī)學檢驗專業(yè)本科、專科師生實驗使用，也可供從事臨床檢驗工作和醫(yī)學研究的技術人員參考使用。

書籍目錄

第一單元  實驗室規(guī)則和常用儀器設備    一、微生物學實驗室規(guī)則    二、微生物學實驗室常用儀器設備第二單元  細菌學檢驗基本技術  實驗一  細菌的形態(tài)學檢查    一、不染色標本的檢查    二、革蘭染色和細菌基本形態(tài)觀察    三、細菌的特殊結構染色和觀察  實驗二  細菌的分布與消毒滅菌    一、細菌的分布    二、物理消毒滅菌法(設計性實驗)    三、化學消毒法(設計性實驗)    四、消毒滅菌效果的評價  實驗三  細菌的分離培養(yǎng)    一、培養(yǎng)基的制備    二、細菌的接種與分離技術    三、細菌的培養(yǎng)方法    四、細菌生長現象的觀察    五、傾注培養(yǎng)  實驗四  細菌的鑒定    一、生物化學鑒定    二、數字編碼鑒定及自動化鑒定    三、血清學鑒定    四、分子生物學鑒定  實驗五  動物實驗性感染與細菌毒素的檢測    一、動物實驗性感染模型的制作    二、實驗動物采血技術    三、細菌內毒素的檢測    四、細菌外毒素毒性檢測  實驗六  細菌的遺傳與變異第三單元  常見病原菌的檢驗  實驗七  球菌    一、葡萄球菌屬    二、鏈球菌屬和腸球菌屬    三、奈瑟菌屬和布蘭漢菌屬  實驗八  腸桿菌科    一、埃希菌屬    二、志賀菌屬和沙門菌屬    三、枸櫞酸桿菌屬、克雷伯菌屬、腸桿菌屬和沙雷菌屬    四、變形桿菌屬、摩根菌屬和普羅威登斯菌屬    五、耶爾森菌屬及哈夫尼亞菌屬  實驗九  弧菌屬、氣單胞菌屬、彎曲菌屬和螺桿菌屬    一、弧菌屬    二、氣單胞菌屬    三、彎曲菌屬    四、螺桿菌屬  實驗十  非發(fā)酵菌    一、假單胞菌屬和產堿桿菌屬    二、不動桿菌屬和窄食單胞菌屬  實驗十一  苛養(yǎng)菌    一、軍團菌屬    二、嗜血桿菌屬  實驗十二  需氧革蘭陽性桿菌    一、棒狀桿菌屬    二、需氧芽孢桿菌屬    三、李斯特菌屬    四、加特納菌屬    五、需氧放線菌屬和諾卡菌屬  實驗十三  分枝桿菌屬    一、結核分枝桿菌    二、非結核分枝桿菌  實驗十四  厭氧菌    一、厭氧芽孢梭菌    二、無芽孢厭氧菌  實驗十五  螺旋體和支原體    一、鉤端螺旋體    二、梅毒螺旋體    三、支原體  實驗十六  衣原體和立克次體    一、衣原體    二、立克次體第四單元  常見病原性真菌的培養(yǎng)和鑒定  實驗十七  真菌檢驗的基本技術    一、真菌染色技術和形態(tài)結構觀察    二、真菌分離培養(yǎng)和鑒定  實驗十八  單細胞真菌的培養(yǎng)和鑒定    一、假絲酵母菌屬    二、隱球菌屬    三、毛孢子菌屬  實驗十九  多細胞絲狀真菌的培養(yǎng)和鑒定    一、常見淺部多細胞絲狀真菌的培養(yǎng)和鑒定    二、常見深部多細胞絲狀真菌的培養(yǎng)和鑒定  實驗二十  雙相型真菌的培養(yǎng)與鑒定第五單元  抗菌藥物敏感性試驗與耐藥性檢測  實驗二十一  紙片擴散法藥物敏感性試驗和聯合藥敏試驗    一、紙片擴散法藥物敏感性試驗    二、聯合藥敏試驗  實驗二十二  稀釋法藥物敏感性試驗和E試驗    一、瓊脂稀釋法    二、肉湯稀釋法    三、E試驗  實驗二十三  特殊耐藥菌及耐藥酶的表型檢測    一、β-內酰胺酶的檢測    二、超廣譜β-內酰胺酶(ESBL)的檢測    三、碳青霉烯酶的檢測    四、耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的檢測    五、葡萄球菌誘導性克林霉素耐藥的檢測(D-Test)    六、耐萬古霉素腸球菌的檢測    七、耐青霉素肺炎鏈球菌的檢測第六單元  常見病毒檢測技術  實驗二十四  病毒培養(yǎng)技術    一、雞胚接種    二、動物接種    三、組織細胞培養(yǎng)  實驗二十五  病毒快速檢測技術    一、電鏡負染觀察病毒    二、生物素-鏈霉親和素系統(tǒng)ELISA檢測抗巨細胞病毒抗體    三、PCR法檢測HPV-DNA第七單元  常見臨床標本的細菌學檢驗  實驗二十六  血液及骨髓液標本的細菌學檢驗——綜合性實驗  實驗二十七  尿液標本的細菌學檢驗——綜合性實驗  實驗二十八  生殖道標本的細菌學檢驗——綜合性實驗  實驗二十九  腸道標本的細菌學檢驗——綜合性實驗  實驗三十  呼吸道標本的細菌學檢驗——綜合性實驗  實驗三十一  腦脊液標本的細菌學檢驗——綜合性實驗  實驗三十二  膿液、創(chuàng)傷感染分泌物、胸腹水及穿刺液的細菌學檢驗——綜合性實驗附錄  附錄一  常用培養(yǎng)基(按拼音排序)  附錄二  常用染液和試劑(按拼音排序)  附錄三  臨床標本檢驗實驗記錄表彩圖

章節(jié)摘錄

插圖：一、微生物學實驗室規(guī)則微生物學實驗的對象大多為病原微生物，具有傳染性，在實驗中必須嚴格掌握無菌概念，防止實驗中自身感染和污染環(huán)境，因此要求嚴格遵守以下規(guī)則：1.實驗前復習相關理論知識，并預習當次實驗內容。書包、外衣等物品放于室外，請勿帶人實驗室內。必須帶入的書籍和文具等請放在非操作區(qū)，以免污染。2.進入實驗室時必須穿好白大衣，必要時要配戴口罩和帽子。3.認真進行各項實驗，嚴格掌握無菌技術。各種實驗物品按指定地點存放，如吸過菌液的吸管、毛細滴管應投入消毒缸內；用過的玻片、L形棒等放人裝有消毒液的搪瓷缸中，不得亂放在桌面上或沖洗于水槽中。4.實驗室內保持安靜，不得高聲談笑或隨便走動，以免影響他人實驗。禁止在實驗室內飲食、吸煙或用嘴濕潤標簽等物品。5.實驗中發(fā)生差錯或意外事故時，應立即報告教師進行及時處理，切勿隱瞞或自作主張不按規(guī)定處理。如發(fā)生有菌材料污染桌面、衣物等，應立即用抹布浸沾2％～3％來蘇（或5％石炭酸液）泡在污染部位，經半小時后方可除去；如手上沾有活菌，用上述來蘇爾消毒液浸泡10min左右后，再用肥皂及自來水反復洗凈；如吸入菌液，應立即吐出后，以大量0.5g／L高錳酸鉀及清水漱口，必要時根據菌類不同，使用其他藥物以預防感染。6.愛護實驗室內各種儀器設備，按使用規(guī)則操作；未經老師許可，不得擅自搬動示教、器材或其他室內設施；實驗用過的器材，必須放在指定地點或按要求處理，不能隨便亂丟亂放。培養(yǎng)箱、冰箱等開門后應及時關好；顯微鏡用后要擦凈，各功能部件復位，登記使用情況后放入顯微鏡柜內。7.節(jié)約使用實驗材料，如不慎損壞器材，應報告教師進行登記。8.實驗完畢后整理桌面，關好水、電等開關。需培養(yǎng)的材料要做好標記如學號、姓名等，送入孵箱培育。培養(yǎng)物在結果觀察完畢后放污物筒，送消毒室處理。9.實驗完畢，脫下白大衣和帽子，按要求將白大衣反折、疊好，按座號放入柜內。再用消毒液及自來水洗手后方可離開實驗室。

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