密度梯度離心法

書籍目錄

第一章 區(qū)帶離心法入門
1.1.離心法在生物學(xué)中的主要應(yīng)用
1.2.離心技術(shù)
1.2.1.分析超速離心法
1.2.2.差速沉淀法
1.2.3.速率區(qū)帶離心法
1.2.4.等密度區(qū)帶離心法
1.3.離心機和轉(zhuǎn)頭的發(fā)展
1.3.1.離心機
1.3.2.轉(zhuǎn)頭材料
1.3.3.轉(zhuǎn)頭形狀
1.3.4.區(qū)帶轉(zhuǎn)頭
1.4.離心技術(shù)的使用和限制
1.5.離心機實驗室的設(shè)計
1.6.離心機的安全性
1.6.1.轉(zhuǎn)頭毀壞的原因和預(yù)防辦法
1.6.1.1.過速
1.6.1.2.腐蝕
1.6.1.3.疲勞
1.6.1.4.高密度的梯度液
1.6.1.5.真空破壞
1.6.1.6.轉(zhuǎn)頭內(nèi)液體凍結(jié)
1.6.2.離心機操作中的其它注意事項
1.6.2.1.靠近運轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)頭
1.6.2.2.液霧的形成
1.6.2.3.電子線路的安全性
1.6.2.4.轉(zhuǎn)頭的平衡和組裝
1.6.2.5.離心機和轉(zhuǎn)頭的配合
1.6.2.6.漏水
1.6.2.7.可燃的溶劑
1.7.轉(zhuǎn)頭的保養(yǎng)
1.7.1.轉(zhuǎn)頭的選擇
1.7.2.制造轉(zhuǎn)頭材料的性質(zhì)和保養(yǎng)
1.7.3.轉(zhuǎn)頭的洗滌和干燥
1.7.4.組裝、拆卸和貯存
1.7.5.每個轉(zhuǎn)頭的保養(yǎng)
1.8.轉(zhuǎn)頭的保證壽命
第二章 離心分離的理論
2.1.速率區(qū)帶分離的理論
2.1.1.顆粒的沉降理論
2.1.2.樣品區(qū)帶的穩(wěn)定性
2.1.3.沉降區(qū)帶的穩(wěn)定性
2.2.等密度區(qū)帶法的理論
2.2.1.等密度區(qū)帶法分離的區(qū)帶形狀
2.2.2.密度梯度溶質(zhì)在離心場中的再分布
2.2.3.轉(zhuǎn)頭對梯度形狀的影響
2.3.密度梯度溶質(zhì)對亞細胞結(jié)構(gòu)的影響
第三章 離心分離的條件
3.1.方法的選擇
3.2.轉(zhuǎn)頭的選擇
3.3.密度梯度材料
3.3.1.堿金屬鹽
3.3.2.小的親水有機分子
3.3.3.高分子量的有機化合物
3.3.4.其它類型的密度梯度材料
3.3.5.梯度材料的選擇
3.4.梯度的選擇
3.4.1.速率區(qū)帶分離的梯度
3.4.2.等密度分離的梯度
3.4.3.復(fù)合梯度的設(shè)計
第四章 在普通轉(zhuǎn)頭中的離心
4.1.速率區(qū)帶離心
4.1.1.密度梯度的制備
4.1.2.將樣品鋪于梯度上
4.1.3.離心
4.1.4.收取梯度
4.1.5.監(jiān)測所替換的梯度
4.2.等密度區(qū)帶離心
4.2.1.密度梯度的制備
4.2.2.將樣品鋪到梯度上
4.2.3.離心
4.2.4.替換和監(jiān)測梯度
第五章 在區(qū)帶轉(zhuǎn)頭中的離心
5.1.普通的非再定向的區(qū)帶轉(zhuǎn)頭
5.1.1.轉(zhuǎn)頭的結(jié)構(gòu)
5.1.2.區(qū)帶轉(zhuǎn)頭的類型
5.1.2.1.A—Ⅻ轉(zhuǎn)頭
5.1.2.2.Z—15轉(zhuǎn)頭
5.1.2.3.HS轉(zhuǎn)頭
5.1.2.4.B—Ⅳ轉(zhuǎn)頭
5.1.2.5.B—ⅩⅣ和B—ⅩⅤ轉(zhuǎn)頭
5.1.2.6.B—ⅩⅩⅨ和B—ⅩⅩⅩ轉(zhuǎn)頭
5.1.2.7.一次型和連續(xù)流動型可互換的轉(zhuǎn)頭
5.1.2.8.連續(xù)流動轉(zhuǎn)頭
5.1.2.9.其它轉(zhuǎn)頭
5.1.3.區(qū)帶轉(zhuǎn)頭的操作
5.1.3.1.離心的準(zhǔn)備
5.1.3.2.加梯度
5.1.3.3.加樣品
5.1.3.4.加速、轉(zhuǎn)動和減速
5.1.3.5.取樣
5.1.3.6.監(jiān)測和部分收集
5.1.4.附屬裝備
5.1.4.1.梯度儀
5.1.4.2.泵
5.1.4.3.折射儀和密度計
5.1.4.4.分光光度計、比色計和紫外計
5.1.4.5.流動池
5.1.4.6.溫度計
5.1.4.7.灌注泵
5.1.4.8.閃頻光源
5.1.4.9.記錄器
5.1.4.10.冷卻裝備
5.1.4.11.次要的附件
5.1.4.12.部分收集器
5.1.4.13.積分儀
5.2.再定向區(qū)帶轉(zhuǎn)頭
第六章 密度梯度離心部分收集各級分的分析
6.1.各級分的酶和化學(xué)分析
6.2.各級分的電子顯微鏡檢測
6.3.密度梯度分離結(jié)果的分析
6.4.沉降系數(shù)的計算
第七章 密度梯度離心的應(yīng)用
7.1.活細胞的分離
7.2.哺乳動物組織細胞器的分離
7.2.1.粗制核級分的再分離和大片質(zhì)膜的分離
7.2.1.1.提純細胞核
7.2.2.線粒體級分的再分離
7.2.3.溶酶體級分的再分離
7.2.4.微粒體的再分離
7.2.5.分離核糖核蛋白體
7.2.6.染色質(zhì)的分離
7.3.分離植物細胞的亞細胞結(jié)構(gòu)
7.4.從單細胞生物分離亞細胞成分
7.5.大分子的分離
7.5.1.核酸
7.5.2.蛋白質(zhì)
7.6.密度梯度離心在生物化學(xué)中的其它應(yīng)用
7.6.1.血清脂蛋白的分離
7.6.2.分離病毒
7.7.密度梯度離心的其它應(yīng)用
第八章 離心分離時出現(xiàn)的假象
8.1.離心期間對顆粒的損傷
8.1.1.由沉淀引起的損傷
8.1.2.由高流體靜壓引起的損傷
8.1.3.由高濃度的梯度溶質(zhì)引起的損傷
8.2.影響密度梯度收集的各級分精確測定的因素
8.2.1.梯度溶質(zhì)和測定分離組分時所用試劑間的反應(yīng)
8.2.2.對分析儀器操作的影響
8.2.3.梯度溶質(zhì)對檢定靈敏度的干擾
8.3.測定顆粒密度和沉降系數(shù)中的誤差
8.3.1.顆粒密度
8.3.2.沉降系數(shù)
第九章 密度梯度離心展望
9.1.離心機設(shè)計
9.2.離心轉(zhuǎn)頭的發(fā)展
9.3.輔助系統(tǒng)的發(fā)展
附錄
9.4.離心方法的應(yīng)用
參考文獻

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無

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