土壤微生物生物量測定方法及其應(yīng)用

內(nèi)容概要

　　土壤是人類社會賴以生存和發(fā)展的重要物質(zhì)基礎(chǔ)。在全世界范圍內(nèi)，土壤退化仍在加劇，土壤污染也日益嚴(yán)峻，嚴(yán)重威脅到農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、人類健康和全球生態(tài)安全。我國土壤資源極其匱乏，遏止土壤退化，提高土壤質(zhì)量是保障我國糧食安全與生態(tài)安全的百年大計。土壤微生物生物量是土壤最活躍的成分，與土壤資源可持續(xù)利用密切關(guān)聯(lián)。《土壤微生物生物量測定方法及其應(yīng)用》對土壤微生物生物量的有關(guān)研究方法進行了較系統(tǒng)的介紹，同時對各種方法的應(yīng)用范圍及局限性加以了討論，為讀者在研究過程中選擇合適的方法提供借鑒?！锻寥牢⑸锷锪繙y定方法及其應(yīng)用》的第2章介紹土壤微生物生物量計數(shù)測定方法，第3、4章和5章分別介紹土壤微生物細胞膜、細胞壁和細胞質(zhì)成分分析法，第6、7、8、9章分別介紹土壤微生物生物量碳、氮、磷、硫測定方法，第10章介紹底物誘導(dǎo)法，第11章介紹土壤酶活性分析法，第12章介紹其他有關(guān)分析方法。　　《土壤微生物生物量測定方法及其應(yīng)用》可作為農(nóng)業(yè)、林業(yè)、相關(guān)大專院校和科研機構(gòu)從事土壤學(xué)、植物營養(yǎng)學(xué)、環(huán)境科學(xué)、生態(tài)學(xué)等研究和教學(xué)人員的工具書和參考書。

書籍目錄

前言第1章 概述第2章 土壤微生物計數(shù)法2.1 培養(yǎng)計數(shù)法2.2 直接鏡檢計數(shù)法2.3 多步離心分離法第3章 細胞膜成分分析法3.1 麥角甾醇分析法3.2 磷脂分析法第4章 細胞壁成分分析法4.1 幾丁質(zhì)分析方法4.2 胞壁酸和2，6－二氨基庚二酸分析方法4.3 脂多糖分析方法第5章 細胞質(zhì)成分分析法5.1 三磷酸腺苷（ATP）分析法5.2 DNA和RNA分析法第6章 土壤微生物生物量碳6.1 熏蒸培養(yǎng)法6.2 熏蒸提取法6.3 應(yīng)用第7章 土壤微生物生物量氮7.1 熏蒸培養(yǎng)法7.2 熏蒸提取一全氮測定法7.3 熏蒸提取一茚三酮比色法7.4 應(yīng)用第8章 土壤微生物生物量磷8.1 熏蒸提取--全磷測定法8.2 熏蒸提取--無機磷測定法8.3 應(yīng)用第9章 土壤微生物生物量硫9.1 熏蒸提取法9.2 應(yīng)用第10章 底物誘導(dǎo)法10.1 底物誘導(dǎo)呼吸法（SIR）10.2 精氨酸氨化方法第11章 土壤微生物生物量的其他分析方法11.1 熱釋放法11.2 二甲基亞砜還原法11.3 BIOLOG方法11.4 免疫探針方法11.5 絮凝分離法11.6 細胞伸長法測定活細菌數(shù)第12章 土壤酶活性分析法12.1 土壤酶活性的測定條件12.2 水解酶12.3 氧化還原酶活性12.4 轉(zhuǎn)移酶和裂解酶附錄一附錄二常用染色液附錄三最大或然數(shù)統(tǒng)計表鳴謝

章節(jié)摘錄

　　一般認為熒光染色僅能使活細胞著色，而土壤礦質(zhì)顆粒和腐殖物質(zhì)不會著色，從而能夠測定出活體微生物數(shù)量，并且易于鏡檢。但熒光染色常常具有專一性，并且熒光停留時間也比較短，從而限制了鏡檢計數(shù)時間。因此，應(yīng)根據(jù)研究需要選擇適當(dāng)?shù)娜旧珓！　＄R檢時一般根據(jù)微生物的形態(tài)，將其分為球形和圓柱狀兩組，并對每組進行分級，在不同的放大倍數(shù)下鏡檢。土壤中絕大多數(shù)細菌單個細胞的直徑為0.5～2.0／μm（Gray，williams，1971；Jenkinson et al，1976；Lin，1994）。林啟美（1997 a）將直徑為0.4～3.13μm的球形微生物視為細菌，而大于3.13μm球形微生物視為真菌胞子，所有圓柱形微生物都視為真菌菌絲。據(jù)此可測定出細菌和真菌的生物量，與采用選擇性呼吸抑制方法所得的結(jié)果十分接近。　　放大倍數(shù)對鏡檢的結(jié)果影響較大（Baath，Soderstrom，1980），高倍下能測到更多的菌絲（Skinner et a1，1972），F(xiàn)rankland（1974）指出相差顯微鏡比普通顯微鏡能夠檢測出更多的菌絲，Lundgren（1984）發(fā)現(xiàn)對細菌進行分組比鏡檢單個細胞獲得的細菌數(shù)量多25％。　　直接鏡檢計數(shù)方法是直接利用顯微鏡進行觀察計數(shù)，理論上應(yīng)該能夠測定出土壤微生物總數(shù)，反映土壤微生物的現(xiàn)狀。但由于受土壤礦物、有機質(zhì)、染色方法等的干擾和影響，直接鏡檢計數(shù)方法也不能非常準(zhǔn)確地測定土壤微生物的總數(shù)，而且所測定的微生物主要是生長比較緩慢的微生物類群。另外，直接鏡檢方法影響因素較多，尤其是在鏡檢時對菌體的分辨和判斷，在很大程度上依賴經(jīng)驗，且費時費力，作為常規(guī)土壤微生物生物量分析方法，顯然有許多有待改進和規(guī)范之處?！　〔捎猛科〞r，由于土壤顆粒與微生物細胞分布不均勻，不能準(zhǔn)確計量所用的土壤質(zhì)量以及微生物數(shù)量，因而測定結(jié)果的精確度比較低。有人采用將已知濃度的色素微粒懸浮液與土壤懸浮液按照一定的比例混合（Thornton-Gray比率法，或Ratio法），根據(jù)色素顆粒與微生物細胞的比例計算所用的懸浮液的土壤質(zhì)量。盡管這樣對測定結(jié)果的精確度有所提高，但也不可能準(zhǔn)確地測定出土壤微生物總量。　　Jenkinson等人（1976）采用瓊脂薄片法測定土壤微生物總數(shù)，并將其換算為生物量，發(fā)現(xiàn)與熏蒸培養(yǎng)法所測定的值相吻合。Vance等人（1987）也得到類似的結(jié)果。Lin和Brookes（1999）對該方法進行了改進，所測定的土壤微生物生物量與用熏蒸提取法測到的結(jié)果具有極顯著的相關(guān)性?！　∥⒖啄み^濾方法也可用于測定土壤真菌菌絲長度，并且較為簡單快速（Hanssen et al，1974），林啟美（1997 b）報道微孔膜過濾方法與瓊脂薄片直接鏡檢法所測定的菌絲量非常接近。近幾年已開發(fā)出能夠自動計數(shù)的計算機軟件，使鏡檢計數(shù)自動化，但仍有一些問題有待解決（Morgan et al，1991；Bloem et al，1992）。

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