酶的凝膠電泳檢測(cè)手冊(cè)

內(nèi)容概要

凝膠電泳是生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)、臨床診斷等場(chǎng)合中檢驗(yàn)酶的最常用的方法之一。本手冊(cè)是國際上酶檢測(cè)技術(shù)方面權(quán)威的工具書之一，其中的一些檢測(cè)方法被國內(nèi)外很多實(shí)驗(yàn)室所沿用。 　　本手冊(cè)在扼要介紹酶凝膠電泳檢測(cè)技術(shù)的一般原理和方法的基礎(chǔ)上，著重講述了： 　　400多種酶的900多種檢測(cè)方法； 　　每一種酶以“酶單頁”的形式講解，一目了然； 　　酶單頁中，在電泳方法的介紹方面選取了醋酸纖維素凝膠、聚丙烯酰胺凝膠和淀粉凝膠三種主要支持介質(zhì)，提供了緩沖液的配制以及問題的解決方案； 　　酶單頁按照酶的EC編號(hào)排列，附錄部分列出了酶的中英文目錄，方便讀者查閱。 　　作為一本難得的案頭工具書，本手冊(cè)的讀者既包括生命科學(xué)相關(guān)學(xué)科的研究人員，也涵蓋醫(yī)學(xué)、農(nóng)學(xué)等領(lǐng)域的專業(yè)工作者。

作者簡(jiǎn)介

G.P.曼琴科（Gennady P.Manchenko）博士是俄羅斯海參崴科學(xué)院海洋生物學(xué)院遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)室的高級(jí)研究員。
　　Manchenko博士1973年畢業(yè)于新西伯利亞大學(xué)，獲細(xì)胞遺傳學(xué)博士學(xué)位。1973年進(jìn)入海參崴的海洋生物學(xué)院，1975年晉升為副研究員。1981年在列寧格勒大學(xué)獲得博士學(xué)位。1983年起被聘為海參海洋生物學(xué)院遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)室的高級(jí)研究員。
　　Manchenko博士是美國遺傳學(xué)會(huì)1978～1983年的會(huì)員，俄羅斯瓦維洛夫（Vavilov）遺傳學(xué)和畜牧學(xué)學(xué)會(huì)會(huì)員，海參崴海洋生物學(xué)院科學(xué)委員會(huì)成員。
　　他曾經(jīng)獲得來自喬治•索羅斯（George Soros）基金、尤金•加菲爾德（Eugene Garfield）基金、國際科學(xué)基金和俄羅斯研究基金的研究支持。目前的研究興趣集中在同工酶學(xué)理論和應(yīng)用方面。

書籍目錄

第1章　簡(jiǎn)介　參考文獻(xiàn)第2章　酶凝膠電泳檢測(cè)的基本原理　2.1　顯色反應(yīng)　　2.1.1　能還原四唑鹽的產(chǎn)物　　2.1.2　能與重氮鹽偶聯(lián)的產(chǎn)物　　2.1.3　引起pH值變化的產(chǎn)物　　2.1.4　正磷酸　　2.1.5　焦磷酸　　2.1.6　過氧化氫　　2.1.7　碳酸根離子　　2.1.8　有色產(chǎn)物　　2.1.9　帶有還原型巰基的產(chǎn)物　　2.1.10　影響淀粉碘反應(yīng)的產(chǎn)物　　2.1.11　聚合酶的產(chǎn)物　　2.1.12　解聚酶的產(chǎn)物　2.2　熒光生成反應(yīng)　　2.2.1　NADH和NADPH 　　2.2.2　4-甲基傘形酮　　2.2.3　形成發(fā)光鑭系金屬螯合物的產(chǎn)物　　2.2.4　其它　2.3　放射自顯影　2.4　生物自顯影　2.5　二維凝膠光譜分析　2.6　蛋白質(zhì)印跡　　2.6.1　固定化基質(zhì)　　2.6.2　蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)移　　2.6.3　特異性的抗體和標(biāo)記的抗抗體　　2.6.4　檢測(cè)印跡中被轉(zhuǎn)移的蛋白質(zhì)　2.7　其它方法　　2.7.1　將不溶于水的底物摻入分離凝膠進(jìn)行檢測(cè)　　2.7.2　脂代謝酶的檢測(cè)　　2.7.3　通過二維電泳進(jìn)行檢測(cè)　　2.7.4　用特異性探針檢測(cè)酶蛋白　　　2.7.4.1　以標(biāo)記的適配體和適配體信標(biāo)作為特異性探針　　　2.7.4.2　以標(biāo)記的抑制劑作為特異性探針　　2.7.5　一些非酶蛋白的特異性檢測(cè)　　　2.7.5.1　用反向酶譜檢測(cè)蛋白酶和核酸酶的抑制蛋白　　　2.7.5.2　以生物素標(biāo)記的蛋白酶為特異性探針檢測(cè)蛋白酶抑制蛋白　　　2.7.5.3　生物素標(biāo)記的乙酰透明質(zhì)酸作為特異性探針檢測(cè)乙酰透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白　　　2.7.5.4　轉(zhuǎn)鐵蛋白　參考文獻(xiàn)第3章　特異性酶的檢測(cè)方法　3.1　酶單頁的結(jié)構(gòu)　參考文獻(xiàn)　3.2　一般原則、評(píng)價(jià)和建議　　3.2.1　酶電泳和檢測(cè)的支持介質(zhì)的選擇　　　3.2.1.1　醋酸纖維素凝膠　　　3.2.1.2　聚丙烯酰胺凝膠　　　3.2.1.3　淀粉凝膠　　3.2.2　凝膠染色的策略　　　3.2.2.1　酶譜方法的選擇　　　3.2.2.2　染色液的制備　　　3.2.2.3　染色液的使用方式　　　3.2.2.4　增強(qiáng)酶活性條帶染色強(qiáng)度的方式　　　3.2.2.5　酶譜方法的特異性和一些相關(guān)問題　　3.2.3　記錄和保存酶譜　　3.2.4　節(jié)省資源的策略　　　3.2.4.1　在同一塊凝膠上同時(shí)檢測(cè)幾種酶　　　3.2.4.2　在同一塊凝膠上連續(xù)檢測(cè)不同的酶　　　3.2.4.3　染色液的重復(fù)使用　　　3.2.4.4　在一塊凝膠上使用幾個(gè)原點(diǎn)　　　3.2.4.5　用電印跡法對(duì)電泳凝膠進(jìn)行多次復(fù)制　　　3.2.4.6　使用半制備凝膠產(chǎn)生連接酶制備物　　3.2.5　疑難解答　　3.2.6　安全規(guī)則　參考文獻(xiàn)　3.3　酶單頁酶單頁中常用的縮寫附錄附錄  附錄A-1　Escherichia coli的基本培養(yǎng)基  附錄A-2　Pediococcus cerevisiae的檸檬酸鹽培養(yǎng)基  附錄B-1　酶的目錄（中文）  附錄B-2　酶的目錄（英文）  附錄C　酶的電泳所用的緩沖系統(tǒng)  附錄D　非常用化合物中英文名稱對(duì)照

圖書封面

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