分子生物學(xué)與蛋白質(zhì)化學(xué)實(shí)驗(yàn)方法

內(nèi)容概要

　　本書是一本以實(shí)驗(yàn)開發(fā)為基礎(chǔ)的指導(dǎo)性書籍，以一種大腸桿菌熱不穩(wěn)定的內(nèi)毒素亞基(LTB)為典型材料，系統(tǒng)具體地介紹了其研究中所采用的分子生物學(xué)方法和蛋白質(zhì)化學(xué)方法，包括基因重組、克隆、篩選、表達(dá)及蛋白質(zhì)的分離純化及鑒定等。本書主要以實(shí)驗(yàn)操作步驟的形式，系統(tǒng)全面地介紹常用的研究方法和手段，但在每個(gè)實(shí)驗(yàn)前都有簡練的理論說明，使理論和實(shí)踐相結(jié)合。通過本書的學(xué)習(xí)，可以使讀者將當(dāng)前的分子生物學(xué)和生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)作為一個(gè)整體進(jìn)行掌握?！　　?以讀者易于接受的方式寫作；通過科學(xué)合理地安排實(shí)驗(yàn)順序，使讀者能夠通過實(shí)際操作提高實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵技能；　　· 實(shí)用的實(shí)驗(yàn)方法可以鼓勵(lì)讀者進(jìn)行獨(dú)立的探索和實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)；　　· 本書的文獻(xiàn)資料可鼓勵(lì)讀者使用初始文獻(xiàn)對實(shí)驗(yàn)方案和方法進(jìn)行設(shè)計(jì)；　　· 本書還提供了一些必要的網(wǎng)址，使讀者便于使用圖書館查詢工具和互聯(lián)網(wǎng)查詢初始文獻(xiàn)，并幫助他們進(jìn)行實(shí)驗(yàn)調(diào)整、改進(jìn)實(shí)驗(yàn)和對實(shí)驗(yàn)故障進(jìn)行檢修，而且還對讀者如何進(jìn)行實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備和編寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告提供建議?！　”緯幻绹髮W(xué)用作蛋白質(zhì)化學(xué)和分子生物學(xué)綜合實(shí)驗(yàn)教程，進(jìn)行了成功的實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革。因此特別適合作為學(xué)生在一個(gè)學(xué)期之內(nèi)的實(shí)驗(yàn)課教程，讀者可以參照本書進(jìn)行科學(xué)研究并撰寫論文。本書也適合于生物學(xué)、生物化學(xué)、微生物學(xué)和生物醫(yī)藥專業(yè)本科生、研究生的實(shí)驗(yàn)參考書，同時(shí)對于正在學(xué)習(xí)化學(xué)、化工、動(dòng)物學(xué)、植物學(xué)的讀者希望提高實(shí)驗(yàn)技能也很有幫助。

書籍目錄

引言和背景第一部分 分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)一微量移液器使用指南實(shí)驗(yàn)二質(zhì)粒DNA模板的制備實(shí)驗(yàn)三(1)測定質(zhì)粒DNA濃度(2)PCR擴(kuò)增質(zhì)粒DNA的LTB基因?qū)嶒?yàn)四(1)瓊脂糖凝膠電泳(2)PCR產(chǎn)物回收實(shí)驗(yàn)五(1)限制性內(nèi)切酶酶切LTB插入基因和載體(2)平板制備實(shí)驗(yàn)六(1)瓊脂糖凝膠電泳法純化酶切后的插入基因片段和載體(2)酶切后插入基因片段和載體的回收實(shí)驗(yàn)七(1)DNA濃度測定(2)插入基因與載體的連接實(shí)驗(yàn)八重組體轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞實(shí)驗(yàn)九(1)挑取菌落，PCR檢測插入片段(2)用可能的重組子劃線平板(3)接種培養(yǎng)物／PCR反應(yīng)／分離質(zhì)粒實(shí)驗(yàn)十(1)瓊脂糖凝膠電泳檢測插入基因(2)用質(zhì)粒少量制備試劑盒純化pET28LTB實(shí)驗(yàn)十一(1)DNA濃度檢測(2)乙醇沉淀質(zhì)粒DNA(3)測序反應(yīng)實(shí)驗(yàn)十二(1)純化延伸反應(yīng)產(chǎn)物(2)測序凝膠示范實(shí)驗(yàn)十三一(1)分析序列數(shù)據(jù)(2)驗(yàn)證插入序列實(shí)驗(yàn)十四(1)基因表達(dá)一(2)表達(dá)宿主的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)十五誘導(dǎo)LTB基因表達(dá)：測定最大表達(dá)的時(shí)間第二部分蛋白質(zhì)化學(xué)實(shí)驗(yàn)十六(1)SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳分析誘導(dǎo)時(shí)間過程(2)用Western blot將蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移至膜上實(shí)驗(yàn)十七western Blot的顯像實(shí)驗(yàn)十八大規(guī)模培養(yǎng)物的制備實(shí)驗(yàn)十九親和層析法分離LTB實(shí)驗(yàn)二十(1)柱層析分段物的SDS_PAGE鑒定(2)免疫印跡檢驗(yàn)LTB的存在實(shí)驗(yàn)二十一蛋白質(zhì)濃縮和結(jié)晶實(shí)驗(yàn)二十二準(zhǔn)備ELISA微量滴定板來分析系列神經(jīng)苷脂配體實(shí)驗(yàn)二十三用ELISA分析系列神經(jīng)節(jié)苷脂配體實(shí)驗(yàn)二十四蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)測定：X射線衍射技術(shù)實(shí)驗(yàn)二十五用X射線衍射分析蛋白質(zhì)晶體的特征(可任選)實(shí)驗(yàn)二十六引物設(shè)計(jì)索引

編輯推薦

　　本書是一本以實(shí)驗(yàn)開發(fā)為基礎(chǔ)的指導(dǎo)性書籍，以一種大腸桿菌熱不穩(wěn)定的內(nèi)毒素亞基(LTB)為典型材料，系統(tǒng)具體地介紹了其研究中所采用的分子生物學(xué)方法和蛋白質(zhì)化學(xué)方法，包括基因重組、克隆、篩選、表達(dá)及蛋白質(zhì)的分離純化及鑒定等。本書主要以實(shí)驗(yàn)操作步驟的形式，系統(tǒng)全面地介紹常用的研究方法和手段，但在每個(gè)實(shí)驗(yàn)前都有簡練的理論說明，使理論和實(shí)踐相結(jié)合。通過本書的學(xué)習(xí)，可以使讀者將當(dāng)前的分子生物學(xué)和生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)作為一個(gè)整體進(jìn)行掌握。 本書適合于生物學(xué)、生物化學(xué)、微生物學(xué)和生物醫(yī)藥專業(yè)本科生、研究生的實(shí)驗(yàn)參考書，同時(shí)對于正在學(xué)習(xí)化學(xué)、化工、動(dòng)物學(xué)、植物學(xué)的讀者希望提高實(shí)驗(yàn)技能也很有幫助。

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