出版時間:2006年03月 出版社:化學(xué)工業(yè)出版社 作者:C.W.迪芬巴赫,G.S.德弗克斯勒 頁數(shù):421 譯者:種康,瞿禮嘉
內(nèi)容概要
本書由美國冷泉港實(shí)驗(yàn)室出版社組織國際權(quán)威實(shí)驗(yàn)室的專家共同研討并撰稿,是對其10年前廣受贊譽(yù)的第一版的全新修訂。全書共8篇,分別介紹了PCR方法(包括RT-PCR方法)基本原理,樣品制備,引物設(shè)計(jì),PCR產(chǎn)物的檢測,PCR介導(dǎo)的克隆,PCR法制備突變體,以及利用PCR進(jìn)行基因的差異表達(dá)分析,RNA樣品的PCR方法等。書后還附有方便實(shí)用的附錄和索引。 對于分子生物學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、醫(yī)學(xué)等生命科學(xué)基礎(chǔ)學(xué)科以及分子流行病學(xué)、臨床檢驗(yàn)、法醫(yī)鑒定等應(yīng)用領(lǐng)域,無論是PCR的初學(xué)者,還是有經(jīng)驗(yàn)的科研人員,都將會發(fā)現(xiàn)這本手冊是一部詳盡、可靠的實(shí)驗(yàn)指南。
書籍目錄
第1篇 PCR導(dǎo)論1 建立一個PCR實(shí)驗(yàn)室2 PCR殘留污染的處理:一種酶學(xué)策略3 高保真PCR酶4 PCR的最優(yōu)化和常見問題解析5 富含GC片段的PCR擴(kuò)增6 精確擴(kuò)增大片段的技巧7 PCR引物設(shè)計(jì)8 PCR擴(kuò)增DNA的非放射性循環(huán)測序第2篇 樣品的制備9 DNA的純化10 RNA的純化11 激光捕獲微分離技術(shù)原位定位基因表達(dá)12 克服PCR受抑制的策略第3篇 RT-PCR方法13 相對定量RT-PCR和競爭定量RT-PCR內(nèi)對照的使用14 四種實(shí)時PCR檢測系統(tǒng)的比較:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler15 定量PCR的新技術(shù)16 RNA的擴(kuò)增:用鎂激活的熱穩(wěn)定DNA聚合酶進(jìn)行高溫反轉(zhuǎn)錄和DNA擴(kuò)增第4篇 PCR產(chǎn)物的檢測:專門應(yīng)用17 雜合性的丟失:一種鑒定腫瘤基因組上染色體區(qū)段缺失的多重PCR方法18 單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析19 逆轉(zhuǎn)錄酶原位PCR20 靈敏快速的突變檢測方法——錯配位點(diǎn)的固相化學(xué)切割法第5篇 用PCR分析基因的差異表達(dá)21 PCR在基于微陣列的基因表達(dá)分析中的應(yīng)用22 利用抑制性消減雜交技術(shù)鑒定差異表達(dá)的基因23 基因表達(dá)分析中的熒光mRNA差異顯示技術(shù)第6篇 用PCR進(jìn)行克隆24 以PCR為基礎(chǔ)的文庫篩選方法25 經(jīng)典RACE(cDNA末端快速擴(kuò)增)法的改進(jìn)26 用PCR合成和分析DNA文庫第7篇 PCR產(chǎn)物的克隆27 克隆PCR產(chǎn)物的策略28 PCR產(chǎn)物雙向和定向克隆29 核糖克?。河煤幸粋€核糖核苷酸末端的PCR引物進(jìn)行DNA克隆和基因構(gòu)建第8篇 利用PCR進(jìn)行誘變30 誘變PCR31 快速PCR定點(diǎn)突變32 利用PCR來突變和合成新的重組基因33 流線型基因裝配PCR附錄1 專利附錄2 在PCR中使用的寡核苷酸的修飾附錄3 注意事項(xiàng)附錄4 供應(yīng)商索引
圖書封面
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