細胞生物學實驗

內容概要

細胞生物學是現(xiàn)代生命科學的主干學科之一，主要研究細胞生命活動的基本規(guī)律。細胞生物學的研究和發(fā)展離不開細胞生物學實驗技術的創(chuàng)新，因此學習和掌握細胞生物學的基本實驗技術和新興實驗方法，對于細胞生物學研究非常重要。本書是在中國科學技術大學細胞生物學實驗課程多年教學工作的基礎上，參考其他相關教材和資料編寫而成的，其內容主要包括光學顯微鏡的系統(tǒng)介紹及細胞生物學研究的相關實驗，包括細胞的形態(tài)結構、細胞化學、染色體技術、細胞及組織培養(yǎng)技術和細胞工程技術5個方面的實驗。通過學習具體實驗原理及操作，提高學生思考問題及動手的能力，為后續(xù)的實驗學習及科學研究打下堅實的基礎。
本書可作為生物學專業(yè)及相關學科本科生、研究生的細胞生物學實驗教材．也可作為相關技術工作者專業(yè)學習和研究的參考考用書。

書籍目錄

總序
前言
第1章 光學顯微鏡的原理和應用
　1.1 顯微鏡的發(fā)展歷史
　1.2　顯微鏡的構造
　1.3 常用的光學顯微鏡
　1.4 光學顯微鏡的應用
第2章 細胞的形態(tài)結構
 實驗1 線粒體和葉綠體的活體染色
 實驗2 植物細胞骨架的光學顯微鏡觀察
 實驗3 細胞骨架的免疫熒光顯示(Ⅰ)——動物細胞微管的觀察
 實驗4 細胞骨架的免疫熒光顯示(Ⅱ)——植物細胞微管的觀察
 實驗5 細胞的超微結構
第3章 細胞化學
 實驗6 DNA的細胞化學——Feulgen反應
 實驗7 RNA的細胞化學——BraChet反應
 實驗8 細胞中多糖和過氧化物酶的定位觀察
 實驗9 細胞中酸性磷酸酶的定位觀察
 實驗10 細胞中堿性磷酸酶的定位觀察
 實驗11 動物細胞基因組DNA的提取
 實驗12 植物細胞基因組DNA的提取
 實驗13 細胞和組織總RNA的提取
第4章 染色體技術與核型分析
 實驗14 植物染色體標本的制備和觀察
 實驗15 動物骨髓細胞染色體標本的制備
 實驗16 人體外周血淋巴細胞培養(yǎng)與染色體標本制備
 實驗17 人類染色體G帶技術
 實驗18 植物染色體顯帶技術
第5章　細胞和組織培養(yǎng)技術
第6章　細胞工程技術
附錄
參考文獻
參考網址
彩圖

章節(jié)摘錄

版權頁：   插圖：   ⑥溶酶體（lysosome）：溶酶體是由單位膜包圍而成的囊狀細胞器，直徑從25nm到0.8μm不等，膜厚6 nm左右，內含多種水解酶，其中酸性磷酸酶為溶酶體的標志酶。初級溶酶體（primarylysosome）所含酶尚未與底物作用，呈圓形或卵圓形，直徑為25～50nm，含有電子染色均勻而致密的細顆粒狀內容物。初級溶酶體較集中地分布在高爾基體的分泌面附近。當初級溶酶體與異噬泡（heterophagosome）、自噬泡（autophagosome）以及細胞內多余分泌顆粒融合，便形成了各種次級溶酶體（secondary lysosomo），呈現(xiàn)出多形態(tài)的結構。不能再消化物質的次級溶酶體稱為殘余小體（residual body），它由單位膜包裹，大小差別甚大，內容物多樣，常含有脂褐素、髓樣體、脂滴等，但不含水解酶，這些殘余物在電鏡下呈現(xiàn)較高電子密度。 ⑦微體（microbody）：微體又稱過氧物酶體（perixasome），是由單位膜包裹的囊狀細胞器，膜厚約6nm，直徑為0.3～0.5μm，常呈圓形或卵圓形。中央常含有電子密度較高、呈規(guī)則的結晶狀結構，稱類核體（nucleoid）。微體的形態(tài)和數(shù)量隨動物種類、細胞種類不同而有較大差異。它的特征酶是過氧化氫酶，能分解多余的過氧化氫，調節(jié)和控制過氧化氫的含量，防止細胞中毒。 ⑧微管（microtubule）：微管為不分支的均勻細管，普遍存在于真核細胞內，為非膜性結構細胞器，需用戊二醛溶液固定才能較好保存。電鏡下微管是一中空圓柱狀結構，外徑25nm，內腔直徑15 nm，管壁厚度平均為5 nm，長度變化不定，約幾微米。用X線衍射分析證明，其管壁由13根直徑為5 nm的細絲呈螺旋狀排列而成，這些細絲又是由直徑為5 nm的球形亞單位組裝而成。僅由13根細絲圍成的微管稱單微管，存在于胞質，它的結構不太穩(wěn)定，易受低溫、Ca2+和秋水仙素的影響而解聚，一旦這些外界因素消除，微管又可重組。微管的主要成分是微管蛋白，α、β微管蛋白在細胞內以異二聚體的形式存在，是組裝微管的基本單位。細胞質內有大量單管微管，參與細胞運動、維持細胞形態(tài)等功能；還可形成二聯(lián)微管、三聯(lián)微管，如中心粒、纖毛、鞭毛內的微管，與細胞器的位移、細胞運動有關。

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