現(xiàn)代生物技術(shù)試驗(yàn)指南

內(nèi)容概要

《現(xiàn)代生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)指南——分子生物學(xué)與生物化學(xué)》全面介紹了現(xiàn)代常用的分子生物學(xué)和生物化學(xué)技術(shù)的基本原理與操作規(guī)程。全書分為兩大部分：第一部分是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，共14個(gè)實(shí)驗(yàn)，包括DNA重組、DNA序列測定、cDNA文庫的構(gòu)建、外源基因在畢赤酵母中的表達(dá)和檢測等；第二部分是生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)，共
20個(gè)實(shí)驗(yàn)，包括糖的定量測定、氨基酸的分離鑒定、蛋白質(zhì)濃度測定、免疫擴(kuò)散和免疫電泳、卡那霉素的效價(jià)測定和正交法測定幾種因素對(duì)酵母發(fā)酵作用的影響等。
《現(xiàn)代生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)指南——分子生物學(xué)與生物化學(xué)》在每一個(gè)實(shí)驗(yàn)開始之前，首先對(duì)相關(guān)實(shí)驗(yàn)原理與技術(shù)進(jìn)行概括性的介紹。每個(gè)實(shí)驗(yàn)在詳細(xì)介紹相關(guān)實(shí)驗(yàn)基本原理與技術(shù)的基礎(chǔ)上，對(duì)基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和原理進(jìn)行一定程度的討論，以訓(xùn)練和提升學(xué)生的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技能。
《現(xiàn)代生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)指南——分子生物學(xué)與生物化學(xué)》內(nèi)容翔實(shí)，實(shí)用性強(qiáng)，部分實(shí)驗(yàn)后面附有實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可供讀者參照。本書可作為高等學(xué)校生物學(xué)科各專業(yè)本科生和研究生的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)教材，同時(shí)對(duì)相關(guān)領(lǐng)域的教學(xué)、科研人員來說也是一本有益的參考書。

書籍目錄

前言
分子生物學(xué) 實(shí)驗(yàn)
 實(shí)驗(yàn)1 大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備及轉(zhuǎn)化
 實(shí)驗(yàn)2 質(zhì)粒DNA的提取和檢測
 實(shí)驗(yàn)3 瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA
 實(shí)驗(yàn)4 DNA重組
 實(shí)驗(yàn)5 哺乳動(dòng)物基因組DNA的提取
 實(shí)驗(yàn)6 植物基因組DNA的提取
 實(shí)驗(yàn)7 植物總RNA的提取
 實(shí)驗(yàn)8 DNA序列測定
 實(shí)驗(yàn)9 PCR基因擴(kuò)增
 實(shí)驗(yàn)10 聚丙烯凝膠電泳檢測蛋白質(zhì)
 實(shí)驗(yàn)11 蛋白質(zhì)印跡
 實(shí)驗(yàn)12 cDNA文庫的構(gòu)建
 實(shí)驗(yàn)13 外源基因在大腸桿菌中的表達(dá)和檢測
 實(shí)驗(yàn)14 外源基因在畢赤酵母中的表達(dá)和檢測
生物化學(xué) 實(shí)驗(yàn)
 生物化學(xué) 實(shí)驗(yàn)要求
 實(shí)驗(yàn)15 大腸桿菌細(xì)胞的超聲波破碎
 實(shí)驗(yàn)16 糖的呈色反應(yīng)和還原糖的檢驗(yàn)
 實(shí)驗(yàn)17 糖的定量測定
 實(shí)驗(yàn)18 脂肪碘值的測定
 實(shí)驗(yàn)19 氨基酸的分離鑒定——紙層析法
 實(shí)驗(yàn)20 茚三酮顯色法測定氨基酸含量
 實(shí)驗(yàn)21 蛋白質(zhì)的制備——牛奶中提取酪蛋白
 實(shí)驗(yàn)22 蛋白質(zhì)溶液的凝膠層析脫鹽
 實(shí)驗(yàn)23 蛋白質(zhì)濃度測定（1）——微量凱式定氮法測定總氮量
 實(shí)驗(yàn)24 蛋白質(zhì)濃度測定（2）——雙縮脲法
 實(shí)驗(yàn)25 蛋白質(zhì)濃度測定（3）——Folin—酚測定法
 實(shí)驗(yàn)26 定磷法顯色測定RNA含量
 實(shí)驗(yàn)27 二苯胺顯色法測定DNA含量
 實(shí)驗(yàn)28 免疫擴(kuò)散和免疫電泳
雙向免疫擴(kuò)散法
單向定量免疫電泳（火箭電泳）
 實(shí)驗(yàn)29 雙向免疫擴(kuò)散法測定抗血清效價(jià)
 實(shí)驗(yàn)30 維生素B2（核黃素）的熒光測定法
 實(shí)驗(yàn)31 維生素C的定量測定（2，6—二氯酚靛酚滴定法）
 實(shí)驗(yàn)32 卡那霉素的效價(jià)測定
 實(shí)驗(yàn)33 二環(huán)素的殺菌能力測定
 實(shí)驗(yàn)34 用正交法測定幾種因素對(duì)酵母發(fā)酵作用的影響
附錄
 緩沖液的配制
 凝膠電泳部分試劑的配制
 核酸雜交用試劑的配制
參考文獻(xiàn)

章節(jié)摘錄

版權(quán)頁：插圖：DNA序列測定是詳細(xì)分析基因結(jié)構(gòu)和功能的基礎(chǔ)。了解DNA核酸序列對(duì)從分子水平研究基因的結(jié)構(gòu)與功能以及克隆DNA片段的操作方向都有著十分重要的理論意義和實(shí)用價(jià)值。只有在詳盡地掌握DNA的核苷酸序列之后，我們才能標(biāo)定出有關(guān)基因所包含的全部核酸內(nèi)切限制酶的識(shí)別位點(diǎn)，據(jù)此構(gòu)建出精確完整的限制酶圖譜。在對(duì)目的基因進(jìn)行克隆時(shí)，這類信息極為重要。利用計(jì)算機(jī)輔助分析首先確定在DNA序列中蛋白編碼區(qū)，隨后在DNA或蛋白質(zhì)序列庫中進(jìn)行相似性查詢，就能對(duì)克隆化基因及表達(dá)產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)和功能有深入的了解。另外，DNA序列測定是詳細(xì)分析基因非編碼區(qū)的前提。DNA序列分析是進(jìn)行基因定點(diǎn)突變的基礎(chǔ)。少量的DNA序列信息是對(duì)克隆于酵母人工染色體或黏粒載體的大片段DNA序列進(jìn)行定點(diǎn)和排序的基礎(chǔ)。DNA序列測定也是我們檢驗(yàn)諸如定點(diǎn)突變、PCR等基因操作的結(jié)果正確與否的重要方法。因此DNA序列測定是分子生物學(xué)研究中的一種重要方法。DNA序列測定的工作基礎(chǔ)是在含有變性劑的聚丙烯酰胺凝膠上進(jìn)行高分辨率的電泳。測序膠能在長達(dá)500bp的單鏈寡核苷酸中分辨出一個(gè)脫氧核糖核苷酸的差異。在測序工作中，相應(yīng)于待測DNA片段，產(chǎn)生一套標(biāo)記的寡核苷酸單鏈。它們有固定的起點(diǎn)，另一端按模板序列連續(xù)終止于各不相同的核苷酸。確定每一個(gè)脫氧核糖核苷酸序列的關(guān)鍵，是在4個(gè)獨(dú)立酶學(xué)或化學(xué)反應(yīng)中產(chǎn)生終止于所有不同的A、T、G、C位點(diǎn)的寡核苷酸鏈。這4個(gè)反應(yīng)的寡核苷酸產(chǎn)物在測序膠上進(jìn)行高分離度的電泳，這4個(gè)反應(yīng)的寡核苷酸產(chǎn)物在測序膠的相鄰泳道中都能被一一分辨出來。由于在4個(gè)泳道中再現(xiàn)了所有可能的寡核苷酸鏈，DNA的序列便可從圖譜中所示的寡核苷酸的“梯子”中直接讀出。

編輯推薦

《現(xiàn)代生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)指南:分子生物學(xué)與生物化學(xué)》由中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)出版社出版。

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