家蠶生物反應(yīng)器

內(nèi)容概要

近幾年，我們實(shí)驗(yàn)室在國內(nèi)外率先利用蠶蛹作為生物反應(yīng)器進(jìn)行蛋白藥物產(chǎn)業(yè)化研究，開拓了生物制藥的新途徑，尤其是蛋白口服化的研究成果，尤為引人注目。由于目前國際上生物技術(shù)工業(yè)界常用大腸桿菌和酵母表達(dá)制備藥物，這一技術(shù)路線從實(shí)驗(yàn)室研究到中試和產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)都比較成熟，但對于家蠶生物反應(yīng)器卻沒有現(xiàn)成的技術(shù)路線可能套用。為此，我們對家蠶表達(dá)的技術(shù)體系、規(guī)模化生產(chǎn)工藝、高純度產(chǎn)品的制備技術(shù)、產(chǎn)品質(zhì)控、家蠶表達(dá)技術(shù)體系安全性評價、制造和質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)的制定和蛋白質(zhì)口服相關(guān)的蛋白質(zhì)功能等關(guān)鍵技術(shù)均進(jìn)行了深入的研究，并取得了一定的研究成果?！　”緯卜譃槲鍌€章節(jié)，主要包括家蠶的分子生物學(xué)、核多型角體病毒為載體的昆蟲表達(dá)系統(tǒng)、家蠶胚胎細(xì)胞系的構(gòu)建、家蠶生物瓜器及其就用、家蠶生物反應(yīng)器的應(yīng)用前景五方面的內(nèi)容。實(shí)現(xiàn)對家蠶生物反應(yīng)器的系統(tǒng)論述，對推廣和推動家蠶生物反應(yīng)器產(chǎn)業(yè)化具有重要的意義。

書籍目錄

第一章  家蠶的分子生物學(xué)　第一節(jié)  家蠶的生物學(xué)特性　　1  生活史    2　蠶的外部形態(tài)    3　家蠶的生長與發(fā)育    4　養(yǎng)蠶的環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)  第二節(jié)　桿狀病毒基因組學(xué)    1  桿狀病毒及其侵染機(jī)制    2　桿狀病毒基因組學(xué)研究    3　桿狀病毒基因結(jié)構(gòu)與功能  第三節(jié)　蠶蛹的小RNA研究    1  蠶蛹小RNA的研究    2  蛹mRNA—like小RNA的研究  第四節(jié)  家蠶蛹cDNA文庫的構(gòu)建和蛋白質(zhì)組學(xué)    1　家蠶蛹cDNA文庫的構(gòu)建    2　家蠶蛹蛋白質(zhì)組學(xué)  第五節(jié)  基于家蠶桿狀病毒表面展示技術(shù)的膜蛋白組學(xué)    1  基于家蠶桿狀病毒表面展示技術(shù)分離膜蛋白的方法第二章  以核型多角體病毒為載體的昆蟲表達(dá)系統(tǒng)  第一節(jié)  昆蟲細(xì)胞/NPV表達(dá)系統(tǒng)的原理和經(jīng)典操作方法    1  原理    2　轉(zhuǎn)移載體質(zhì)粒的構(gòu)建  　3  重組病毒的組建和篩選　第二節(jié)　最新發(fā)展的改進(jìn)型操作方法  　1　NPV DNA線性化  　2　NPV DNA線性化并刪除0RF1629  　在S.cerevisiae中YAC介導(dǎo)的NPV重組  　4　在E.coli中轉(zhuǎn)座子介導(dǎo)的NPV重組  　5　體外定點(diǎn)重組  　6　Bac to Bac系統(tǒng)  　7　桿狀病毒表面展示技術(shù)　第三節(jié)　外源基因的表達(dá)、轉(zhuǎn)錄及轉(zhuǎn)譯后加工  　1  真核生物、病毒、細(xì)菌、霉菌等多種來源基因的表達(dá)  　2　轉(zhuǎn)錄后加工  　3　糖基化  　4　磷酸化、脂肪?；王０坊? 　5  蛋白水解  　6　細(xì)胞內(nèi)定位和分泌  　7　高級結(jié)構(gòu)的形成　第四節(jié)  昆蟲細(xì)胞NPV表達(dá)系統(tǒng)的優(yōu)越性和缺陷  　1  昆蟲細(xì)胞/NPV表達(dá)系統(tǒng)的優(yōu)越性  　2　家蠶/BmNPV表達(dá)系統(tǒng)相對于Sf細(xì)胞/AcMNPV表達(dá)系統(tǒng)的優(yōu)勢　第五節(jié)　BmBacPAK病毒的組建  　1　BmBacPAK病毒的組建技術(shù)  　2  BmBacPAK病毒　第六節(jié)  BmBQcPAK載體病毒在家蠶細(xì)胞中進(jìn)行報告基因的表達(dá)　1　質(zhì)粒的構(gòu)建　第七節(jié)  家蠶核型多角體病毒p26基因及同源重復(fù)l又hr3的克隆和序列分析　第八節(jié)  家蠶核型多角體病毒同源重復(fù)Nhr5的克隆和序列分析  　1  BmNPV DNA Kpn I—D片段的克隆及兩端序列分析  　2　BmNPV hr5全序列分析　第九節(jié)  BmNPV hr5的重復(fù)起始區(qū)功能  　1　含BmNPV hr5結(jié)構(gòu)的質(zhì)粒在BmNPV感染的BmN細(xì)胞中的復(fù)制  　2　pBhr5和pBhr5 3質(zhì)粒在AcMNPV感染的Sf21細(xì)胞中的復(fù)制  　3  AcMNPV的hr序列是一種增強(qiáng)子  　4　不同NPV在不同宿主細(xì)胞中功能和結(jié)構(gòu)不同　……第三章　家蠶組織細(xì)胞系的構(gòu)建第四章　家蠶生物反應(yīng)器及其應(yīng)用第五章　家蠶生物反應(yīng)器的應(yīng)用前景第六章　家蠶生物反應(yīng)器生產(chǎn)生物制品的標(biāo)準(zhǔn)參考文獻(xiàn)

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