生物化學實驗指導

內(nèi)容概要

《生物化學實驗指導》總共分為六章，內(nèi)容以生物大分子的鑒定分析為線索，包括糖、脂類、蛋白質(zhì)、酶學、代謝產(chǎn)物和核酸六部分，此外本書最后單獨設立一章專門介紹生物化學實驗過程中的基本常識，包括實驗室安全規(guī)則介紹、常規(guī)儀器使用方法、常用試劑配制等，方便學生在實驗過程中進行查閱。希望通過本教材的學習，學生能夠順利完成生物化學實驗，了解現(xiàn)代生物化學實驗最基本的技術(shù)，掌握實驗設計、綜合運用、宏觀思維以及邏輯分析問題的基本實驗素質(zhì)，并在今后的學習和工作中靈活應用。本書由張蕾、劉昱、蔣達和、楊明園、曹志賤編。

書籍目錄

第一章  糖類鑒定和定量測定
  第一節(jié)  糖類的鑒定和分析方法
    實驗一  糖的呈色反應和定性鑒定
    實驗二  糖類的薄層層析鑒定
    實驗三  Smith降解法測定糖鏈的序列
  第二節(jié)  糖類定量測定方法
    實驗四  總糖和還原糖的測定(一)
    實驗五  總糖和還原糖的測定(二)
    實驗六  還原糖的測定(三)
    實驗七  還原糖的測定(四)
    實驗八  碘量法測定葡萄糖的含量
    實驗九  蒽酮比色法測定可溶性糖含量
    實驗十  鄰甲苯胺法測定血糖的含量
    實驗十一  糖原的測定
第二章  脂類
  第一節(jié)  脂肪提取和測定
    實驗一  粗脂肪的提取和測定
    實驗二  卵磷脂的提取及鑒定
  第二節(jié)  脂類的鑒定方法
    實驗三  薄層層析法分析膜磷脂
    實驗四  脂類染色法
  第三節(jié)  油脂的化學性質(zhì)
    實驗五  油脂酸價的測定
    實驗六  脂肪碘值的測定
    實驗七  油脂皂化值的測定
    實驗八  油脂羥值的測定
    實驗九  油脂過氧化值的測定
    實驗十  油脂總羰基價的測定
  第四節(jié)  血清中脂類的測定
    實驗十二  血清膽固醇的測定
    實驗十三  血清中甘油三酯的測定
    實驗十四  血清中磷脂的測定
    實驗十五  酶法測定血清中游離脂肪酸
第三章  蛋白質(zhì)
  第一節(jié)  蛋白質(zhì)含量的測定
    實驗一  紫外吸收法測定蛋白質(zhì)含量
    實驗二  Folin酚法(Lowry法)測定蛋白質(zhì)的含量
    實驗三  考馬斯亮藍法(Bradford法)測定蛋白質(zhì)含量
    實驗四  BCA法測定蛋白質(zhì)含量
  第二節(jié)  蛋白質(zhì)的純度和亞單位的檢測
    實驗五  連續(xù)的非變性凝膠電泳法
    實驗六  不連續(xù)SDS-PAGE垂直電泳及考馬斯亮藍染色法
    實驗七  SDS-PAGE蛋白凝膠的酸性銀染法
    實驗八  蛋白免疫印跡法
    實驗九  等電聚焦測定蛋白質(zhì)等電點
  第三節(jié)  蛋白質(zhì)的分類純化
    實驗十  蛋白質(zhì)鹽析分離
    實驗十一  分子篩法對蛋白質(zhì)脫鹽
    實驗十二  DEAE纖維素柱層析純化酶蛋白
    實驗十三  親和層析——鎳柱純化分離天然狀態(tài)的帶有His標簽的蛋白質(zhì)
    實驗十四  TCA法和丙酮法沉淀濃縮蛋白質(zhì)
第四章  酶學實驗
  第一節(jié)  常見酶活力的測定
    實驗一  水解酶活性的測定
    實驗二  氧化還原酶活性的測定
    實驗三  轉(zhuǎn)移酶活性的測定
    實驗四  異構(gòu)酶活性的測定
    實驗五  裂解酶活性的測定
  第二節(jié)  酶的動力學研究
    實驗六酵母蔗糖酶的粗酶制備過程
    實驗七  蔗糖酶活力的測定和比活力的分析
    實驗八  蔗糖酶的鹽析和凝膠層析脫鹽
    實驗九  DEAE纖維素柱層析純化蔗糖酶
    實驗十  底物濃度對催化反應速度的影響及米氏常數(shù)Km
    實驗十一  用正交法測定幾種因素對蔗糖酶活力的影響
第五章  代謝產(chǎn)物的鑒定和測量
  第一節(jié)  代謝產(chǎn)物的定性鑒定
    實驗一  糖酵解中間產(chǎn)物的鑒定
    實驗二  肌糖原的酵解作用
    實驗三  ATP的生物合成的測定
    實驗四  紙層析法定性檢測氨基移換反應
    實驗五  生物氧化的電子傳遞實驗
    實驗六  脂肪轉(zhuǎn)化為糖的定性實驗
    實驗七  激素對血糖濃度的調(diào)控作用
  第二節(jié)  代謝產(chǎn)物的定量測定
    實驗八  脂肪酸的B-氧化——酮體測定法
    實驗九  氨基轉(zhuǎn)換作用的測定(分光光度法)
    實驗十  二乙酰-肟法測定血清尿素氮
第六章  核酸類實驗
  第一節(jié)  核酸的提取和鑒定
    實驗一  瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA
    實驗二  RNA的變性瓊脂糖凝膠電泳
    實驗三  質(zhì)粒DNA的堿裂解法提取與純化
    實驗四  植物組織申DNA的提取
    實驗五  酵母RNA的分離與鑒定
    實驗六  動物肝臟DNA的提取與純化
  第二節(jié)  核酸的定量測定
    實驗七  紫外吸收法測定核酸的含量
    實驗八  定磷法測定核酸的含量
    實驗九  二苯胺法測定DNA的含量
    實驗十  地衣酚(苔黑酚)法測定RNA的含量
附錄
  一  生物化學實驗室規(guī)則
  二  實驗誤差
  三  實驗室安全知識
  四  關(guān)于有毒化學藥品的知識
    (一)高毒性固體
    (二)毒性危險氣體
    (三)毒性危險液體和刺激性物質(zhì)
    (四)其他有毒物質(zhì)
    (五)致癌物質(zhì)
    (六)具有長期積累效應的毒物
    (七)溴化乙錠溶液的凈化處理
    (八)實驗操作中對所用的特殊化學試劑應注意的安全事項
  五  生物化學實驗室基本知識和操作
    (一)玻璃儀器的洗滌、清潔與干燥
    (二)清洗液的原理與配制
    (三)吸量管的種類和使用
    (四)容量瓶及量筒
    (五)滴定管
    (六)易變質(zhì)及需要特殊方法保存的試劑
    (七)溶液的配制
    (八)溶液的混勻
    (九)過濾
  六  生物化學實驗常用儀器的使用
    (一)722S型分光光度計的使用方法
    (二)UV/VIS-5100紫外-可見分光光度計的使用
    (三)酸度計的使用
    (四)離心機的使用
    (五)可調(diào)式微量移液器的使用
  七  生物化學實驗常用數(shù)據(jù)及參數(shù)
    (一)硫酸銨飽和度的計算表
    (二)常用酸、堿的密度和濃度
    (三)氨基酸的主要參數(shù)
    (四)常用蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量標準參照物
    (五)核酸、蛋白質(zhì)換算數(shù)據(jù)
  八  緩沖液的配制
    (一)常用緩沖溶液的配制
    (二)酸度計用的標準緩沖液的配制
  九  常用酸堿指示劑
  十  層析技術(shù)有關(guān)介質(zhì)性質(zhì)及數(shù)據(jù)
    (一)離子交換纖維素
    (二)常見離子交換樹脂的有關(guān)性質(zhì)
    (三)葡聚糖凝膠的有關(guān)技術(shù)數(shù)據(jù)
    (四)聚丙烯酰胺凝膠的有關(guān)技術(shù)數(shù)據(jù)
    (五)瓊脂糖凝膠的有關(guān)技術(shù)數(shù)據(jù)
    (六)各種凝膠所允許的最大操作壓

圖書封面

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