出版時(shí)間:2012-12 出版社:清華大學(xué)出版社 作者:劉娜 等編著 頁數(shù):129 字?jǐn)?shù):161000
內(nèi)容概要
《環(huán)境生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)》在汲取國內(nèi)外眾多優(yōu)秀教材、文獻(xiàn)資料的基礎(chǔ)上,系統(tǒng)地介紹了當(dāng)前環(huán)境生物技術(shù)領(lǐng)域涉及的一些基本實(shí)驗(yàn)原理和前沿性研究方法。全書分5部分共28個(gè)實(shí)驗(yàn),主要包括環(huán)境生物技術(shù)的基本實(shí)驗(yàn)技術(shù)、綜合實(shí)驗(yàn)技術(shù)、研究性實(shí)驗(yàn)技術(shù)、應(yīng)用實(shí)驗(yàn)及現(xiàn)代分子實(shí)驗(yàn)技術(shù)。本書內(nèi)容全面,文字簡明,概念清晰,可幫助讀者有效地掌握環(huán)境生物技術(shù)這一新興學(xué)科的基本知識、操作技能及研究思路與方法。
《環(huán)境生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)》可作為高等院校環(huán)境工程、環(huán)境科學(xué)、給水與排水工程、資源與環(huán)境等專業(yè)的實(shí)驗(yàn)課教材,也可供相關(guān)專業(yè)科技人員參考。
書籍目錄
第1部分 基礎(chǔ)微生物學(xué) 實(shí)驗(yàn) 方法與技術(shù)
實(shí)驗(yàn) 1 光學(xué)顯微鏡的使用方法及注意事項(xiàng)
實(shí)驗(yàn) 2 細(xì)菌染色技術(shù)與形態(tài)觀察
實(shí)驗(yàn) 3 細(xì)菌生長曲線的測定
實(shí)驗(yàn) 4 細(xì)菌鑒定中的生理生化 實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn) 5 微生物菌種的保藏
第2部分 環(huán)境污染物降解菌株的分離、鑒定
實(shí)驗(yàn) 6 微生物絮凝劑菌株篩選及其性能測定
實(shí)驗(yàn) 7 工業(yè)廢水苯酚高效降解菌的馴化和篩選
實(shí)驗(yàn) 8 連續(xù)處理系統(tǒng)中紫外誘變菌降解有機(jī)污染物
實(shí)驗(yàn) 9 有機(jī)磷農(nóng)藥厭氧降解菌株篩選與鑒定
實(shí)驗(yàn) 10 農(nóng)藥阿特拉津降解菌的馴化和篩選
第3部分 現(xiàn)代微生物學(xué) 實(shí)驗(yàn) 技術(shù)
實(shí)驗(yàn) 11 細(xì)菌總dna的提取
實(shí)驗(yàn) 12 質(zhì)粒dna的分離純化和鑒定
實(shí)驗(yàn) 13 一種簡便、快速的大腸桿菌質(zhì)粒轉(zhuǎn)化方法
實(shí)驗(yàn) 14 污染土壤總dna的提取
實(shí)驗(yàn) 15 微生物總dna中的16s rdna pcr擴(kuò)增技術(shù)
實(shí)驗(yàn) 16 dna瓊脂糖凝膠電泳
實(shí)驗(yàn) 17 瓊脂糖凝膠中dna的回收、測序及系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建
實(shí)驗(yàn) 18 微生物的固定化技術(shù)
第4部分 微生物多樣性的測定
實(shí)驗(yàn) 19 biolog分析方法
實(shí)驗(yàn) 20 plfa分析方法
實(shí)驗(yàn) 21 pcr?dgge分析方法
第5部分 污染物微生物處理與資源化技術(shù)
實(shí)驗(yàn) 22 固定化微生物處理含腈廢水
實(shí)驗(yàn) 23 殼聚糖固定化真菌漆酶及其用于處理酚類污染物
實(shí)驗(yàn) 24 廢物乙醇化處理 實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn) 25 測定廢水bod降解生化穩(wěn)定速率常數(shù)和可生化性
實(shí)驗(yàn) 26 微生物吸附法去除重金屬
實(shí)驗(yàn) 27 含有降解pcb基因質(zhì)粒的菌株治理土壤pcb污染
實(shí)驗(yàn) 28 酶法催化微藻油脂制備生物柴油
參考文獻(xiàn)
章節(jié)摘錄
版權(quán)頁: 插圖: 3.操作方法及步驟 (1)菌體的培養(yǎng) 將釀酒酵母斜面菌種接種至種子培養(yǎng)基中,28℃蕩培養(yǎng)24h,然后轉(zhuǎn)接至液體培養(yǎng)基中,28℃震蕩培養(yǎng)48h。棄上清液,收集菌體待用。 (2)菌體的預(yù)處理 以蒸餾水洗滌3次然后離心(5 000r/min離心10min,下同)將0.085g的微生物菌體分別浸泡于0.1mol/L的10mL NaOH、0.1mol/L的10mL HCl或30%的乙醇中40min(28。C);然后用蒸餾水洗滌3次,離心備用,以不經(jīng)處理的菌體為對照。 (3)吸附實(shí)驗(yàn)方法 分別稱取200g干重經(jīng)預(yù)處理的生物材料于各瓶中,加入100mL 50mg/L的Pb(NO3)2溶液,然后置于振蕩器上震蕩24h(室溫21℃)。通過滴加0.1mol/L HCl或NaOH調(diào)節(jié)在吸附平衡期間變化的pH值,使溶液的pH值保持在5.0。用0.45μm膜濾紙過濾,用原子吸收分光光度計(jì)測定溶液中剩余的重金屬離子濃度。 (4)重金屬解析實(shí)驗(yàn) 將吸附了重金屬的微生物菌體投加到0.1mol/L Na。CO2、0.1mol/LCH3COOK、0.1mol/L EDTA或HCl水溶液中,調(diào)節(jié)pH值為2.0,在30℃下解析1h,使用蒸餾水對解析后的菌體洗滌3次,離心后備用。 (5)再生菌體和回用實(shí)驗(yàn) 重復(fù)步驟(3)和步驟(4),進(jìn)行回用實(shí)驗(yàn)。 4.注意事項(xiàng) 菌體培養(yǎng)時(shí)間不同會影響到對重金屬的吸附效果,所以菌體培養(yǎng)時(shí)間應(yīng)嚴(yán)格控制不可過長。 5.實(shí)驗(yàn)報(bào)告 (1)比較不同處理方法的菌體在重金屬去除效率上的差異,為什么會有這種差異? (2)比較再生菌體和原菌體在去除效率上的差異,為什么會有這種差異? 6.思考題 (1)舉例說明現(xiàn)實(shí)生活中利用微生物吸附重金屬的例子,并說明其原理。 (2)哪些條件影響菌體對重金屬的吸附效果? 構(gòu)建含目的基因具有高度競爭力的基因工程菌(genetic engineeringmicrooranism,GEM)是現(xiàn)代環(huán)境生物技術(shù)的重要目標(biāo)之一。GEM引入現(xiàn)場環(huán)境與土著菌群產(chǎn)生激烈競爭必須有足夠的存活時(shí)間,其目的基因方可穩(wěn)定表達(dá)出特定的基因產(chǎn)物。如果GEM無足夠能源和碳源,就需要外加基質(zhì)來促進(jìn)增殖并表達(dá)其產(chǎn)物。引入土壤的大多數(shù)外源微生物GEM,在無外加碳源條件下,則不能在其中生存與增殖。目的基因表達(dá)產(chǎn)物對微生物本身活力并無益處,還會降低GEM競爭力。土壤微生物具有多樣性特點(diǎn),任何一個(gè)種群只占整個(gè)微生物區(qū)系的一小部分,競爭優(yōu)勢種可能隨土壤的溫度、濕度等條件變化而變化。 現(xiàn)已分離出以聯(lián)苯為唯一碳源和能源的多株菌,它們對多種多氯聯(lián)苯類化合物有著共代謝功能(Bedard,1986;Furukawa,1983)。有關(guān)的四個(gè)酶由bph的ABCD四個(gè)基因編碼。這些酶將多氯聯(lián)苯轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的氯苯酸(Furukawa,1989;Mondello,1989)。由PCB至CO2的限速步驟是在共代謝氧化的最初階段(Focht,1985)。通過添加聯(lián)苯的模擬共代謝活動的實(shí)驗(yàn),已觀察到氯苯酸的積累現(xiàn)象。而這些氯苯酸可以逐步被土著菌降解(Focht,1985;Hakness,1993;Hernandez,1991;Hickey,1990)。
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