病原生物學(xué)實驗指導(dǎo)

內(nèi)容概要

　　本書將原屬于醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實驗教學(xué)的內(nèi)容和人體寄生蟲學(xué)實驗教學(xué)的內(nèi)容進行了合理、科學(xué)的歸并和融合，在注重驗證基本原理，培養(yǎng)基本技能的基礎(chǔ)上，進一步密切結(jié)合臨床實際，刪除了部分已經(jīng)被臨床檢驗淘汰的實驗，做到了基礎(chǔ)結(jié)合臨床。補充了病原微生物實驗室生物安全的內(nèi)容，有助于從源頭上培養(yǎng)醫(yī)科大學(xué)生樹立生物安全的觀念。

書籍目錄

第1篇 醫(yī)學(xué)微生物學(xué)
第1章 病原微生物實驗室生物安全
一、病原微生物分類及安全防護級別
二、病原微生物實驗室生物安全防護
三、生物安全標(biāo)識
第2章 細(xì)菌的形態(tài)檢查
一、普通光學(xué)顯微鏡油鏡的使用和保護
二、細(xì)菌不染色標(biāo)本檢查法
三、細(xì)菌的革蘭染色
四、細(xì)茵的基本形態(tài)和特殊結(jié)構(gòu)觀察
思考題
第3章 細(xì)菌的生長與代謝
一、細(xì)菌培養(yǎng)基及制備
二、細(xì)菌的接種技術(shù)及培養(yǎng)物的觀察
三、細(xì)菌的培養(yǎng)方法
四、細(xì)菌的代謝產(chǎn)物檢查
五、數(shù)字編碼鑒定技術(shù)
思考題
第4章 外界因素對細(xì)菌代謝的影響
一、微生物分布檢查
二、物理因素對細(xì)菌代謝的影響
三、化學(xué)因素對細(xì)菌代謝的影響
四、噬菌體裂菌試驗
思考題
第5章 細(xì)菌的遺傳與變異
一、細(xì)菌的形態(tài)變異
二、細(xì)菌的H-O變異
三、細(xì)菌的S-R變異
四、細(xì)菌的耐藥性變異（R質(zhì)粒接合傳遞試驗）
思考題
第6章 病原菌致病作用及動物實驗
一、實驗動物的選擇原則及接種
二、肺炎鏈球菌致病性
三、細(xì)菌侵襲性酶的侵襲作用觀察
四、內(nèi)毒素的致熱作用及內(nèi)毒素檢測
五、外毒素致病和抗毒素中和試驗
思考題
第7章 病原性球菌
一、病原性球菌的形態(tài)觀察
二、病原性球菌血平板培養(yǎng)物觀察
三、血漿凝固酶試驗
四、抗鏈球菌溶血素“O”測定
五、膿汁標(biāo)本中病原性球菌的分離與鑒定
思考題
第8章 胃腸道感染細(xì)菌
一、常見胃腸道定居或感染細(xì)菌的形態(tài)觀察
二、腸道桿菌的主要生化反應(yīng)及茵落觀察
三、糞便標(biāo)本中致病性腸道茵的分離和鑒定
四、肥達(dá)反應(yīng)
第9章 厭氧性細(xì)菌
一、厭氧培養(yǎng)法
二、厭氧芽胞梭茵和無芽胞厭氧菌的形態(tài)觀察
三、破傷風(fēng)梭茵和產(chǎn)氣莢膜梭茵培養(yǎng)物觀察
四、破傷風(fēng)外毒素與抗毒素中和試驗
五、產(chǎn)氣莢膜梭茵的動物試驗
思考題
第10章 分枝桿菌
一、齊一尼（Ziehl-Neelsen）抗酸染色法和金胺“O”熒光染色法
二、結(jié)核分枝桿菌、麻風(fēng)分枝桿菌的形態(tài)觀察
三、結(jié)核分枝桿菌的培養(yǎng)
思考題
第11章 其他病原菌
一、病原菌形態(tài)觀察
二、白喉棒狀桿菌培養(yǎng)物觀察
三、白喉棒狀桿菌的毒力試驗
四、銅綠假單胞菌培養(yǎng)物觀察
五、流感嗜血桿菌培養(yǎng)時的衛(wèi)星現(xiàn)象觀察
思考題
第12章 其他原核細(xì)胞型微生物
一、螺旋體
二、支原體
三、衣原體
四、立克次體
五、放線菌
思考題
第13章 真菌學(xué)實驗
一、真菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察
二、真菌的培養(yǎng)物觀察
三、真菌性皮屑的鏡檢
四、白假絲酵母菌芽管形成試驗
五、白假絲酵母菌厚膜孢子形成試驗
思考題
第14章 病毒學(xué)實驗
一、雞胚的接種和觀察
二、病毒的細(xì)胞培養(yǎng)法
三、病毒包涵體觀察
四、血球凝集和血球凝集抑制試驗
五、ELISA法檢測患者血清乙肝表面抗原
六、PCR技術(shù)檢測乙型肝炎病毒
七、ELISA法檢測HIV抗體
思考題
第2篇 人體寄生蟲學(xué)
第15章 線蟲
一、似蚓蛔線蟲
二、毛首鞭形線蟲
三、蠕形住腸線蟲
四、十二指腸鉤口線蟲與美洲板口線蟲
……
第3篇 病原生物實驗室檢測技術(shù)
參考文獻

章節(jié)摘錄

版權(quán)頁：   插圖：   一、細(xì)菌培養(yǎng)基及制備 培養(yǎng)基（culture meditma）是將適合于細(xì)菌生長繁殖的各種營養(yǎng)物質(zhì)用人工的方法配制成的營養(yǎng)基質(zhì)。培養(yǎng)基含有所培養(yǎng)細(xì)菌必需的各種營養(yǎng)物質(zhì)以及合適的pH，而且是無菌的。根據(jù)培養(yǎng)基的性質(zhì)和用途可分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基、營養(yǎng)培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基和厭氧培養(yǎng)基。 培養(yǎng)基按物理性狀可分為液體、半固體和固體3大類。在液體培養(yǎng)基中加入賦形劑瓊脂（agar）可改變培養(yǎng)基的物理性狀。加入2％瓊脂，可制備成固體平板或斜面培養(yǎng)基。加入0.3％～0.5％瓊脂可制備成半固體培養(yǎng)基。 培養(yǎng)基的制備原則 （1）充足的營養(yǎng)物質(zhì)：培養(yǎng)基必須含有細(xì)菌生長繁殖所需要的營養(yǎng)物質(zhì)，有時候還需要根據(jù)培養(yǎng)細(xì)菌的特性加入特定的營養(yǎng)物質(zhì)。 （2）合適的pH：培養(yǎng)基的pH應(yīng)符合細(xì)菌生長要求，多數(shù)細(xì)菌生長的適宜pH值為7.2～7.6。有的細(xì)菌例外，如霍亂弧菌最適宜生長的pH值為8.8～9.2，結(jié)核分枝桿菌最適宜生長的pH值為6.5～6.8。 （3）培養(yǎng)基必須是的無菌的：所有培養(yǎng)基在制備結(jié)束時需要進行滅菌。不同的培養(yǎng)基滅菌的時間和溫度不同，既要保證滅菌效果，又要保證不損失培養(yǎng)基的必需營養(yǎng)成分。 （4）培養(yǎng)基的質(zhì)量檢驗：培養(yǎng)基經(jīng)滅菌后，必須要求置37℃溫箱中培養(yǎng)24小時無菌生長。同時將已知的標(biāo)準(zhǔn)參考菌株接種于相應(yīng)的培養(yǎng)基上，經(jīng)過37℃培養(yǎng)后細(xì)菌的生長繁殖狀況和生化反應(yīng)與預(yù)期的結(jié)果相符。 （5）所用器皿須潔凈，忌用鐵或鋼質(zhì)器皿。所用的化學(xué)試劑必須純凈，稱取的分量務(wù)必準(zhǔn)確。 培養(yǎng)基制備的基本程序：稱量各種物質(zhì)→溶解→測定及調(diào)整pH→濾過→分裝→滅菌后備用。 常用基礎(chǔ)培養(yǎng)基的制備。 （材料） 1.牛肉膏、氯化鈉、蛋白胨、蒸餾水、氫氧化鈉（1mol／L）、瓊脂。 2.高壓滅菌器、試管、天平、量筒、錐形瓶、pH計或試紙、平皿、電爐或微波爐、吸管、37℃培養(yǎng)箱、烤箱、超凈工作臺、酒精燈。 （方法） 1.肉湯培養(yǎng)基：稱取牛肉膏3g，蛋白胨10g，氯化鈉5g至錐形瓶，用量筒量取蒸餾水1000ml加入錐形瓶。攪拌或稍加熱使之完全溶解后，用1mol／L NaOH調(diào)整液體pH值至7.6。用吸管分裝至試管，加塞后置高壓滅菌器滅菌（121.3℃，20分鐘）。冷卻后取出。將肉湯置37℃細(xì)菌培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時，確定無細(xì)菌生長后（仍然為澄清透亮液體且管底無沉淀出現(xiàn)）方可應(yīng)用。 2.固體培養(yǎng)基：在100ml pH值7.8的肉湯培養(yǎng)基中，加入2～3g瓊脂。加熱溶化，用紗布過濾，補足蒸餾水并分裝于試管和錐形瓶，試管加塞，二者同時置高壓滅菌器滅菌（121.3℃，20分鐘）。取出后趁熱斜置試管，冷凝后形成固體斜面培養(yǎng)基。錐形瓶取出后待培養(yǎng)基冷卻到50～60℃：時，在超凈工作臺中傾注于預(yù)先干烤滅菌的玻璃平皿中（每皿20ml），蓋皿蓋并在試驗臺面上輕輕移搖，使液體狀態(tài)的培養(yǎng)基均勻鋪滿皿底。冷卻后即形成固體瓊脂平板培養(yǎng)基。將固體斜面和平板培養(yǎng)基置37℃細(xì)菌培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時，確定無細(xì)菌生長后方可應(yīng)用。 瓊脂系石花菜中提取的半乳糖膠，對細(xì)菌并無營養(yǎng)作用。瓊脂具有特殊的物理性狀，在98℃以上時會由固體溶化成為液體，一旦成為液體，需要在45℃以下才能夠凝固。瓊脂是制備細(xì)菌培養(yǎng)基理想和常用的固化賦形劑。瓊脂多呈弱酸性，加入后使液體pH略下降，故一般采用pH值 7.8的肉湯培養(yǎng)基制備固體培養(yǎng)基。 3.半固體培養(yǎng)基：在100ml pH值7.8的肉湯培養(yǎng)基中，加入0.3～0.5g瓊脂。加熱溶化，用紗布過濾，補足蒸餾水并分裝于試管，每管約2～3ml，加塞包扎后置高壓滅菌器滅菌（121.3℃，20分鐘）。取出并冷凝后形成半固體培養(yǎng)基。將半固體培養(yǎng)基置37℃細(xì)菌培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時，確定無細(xì)菌生長后方可應(yīng)用。 （保存）每批培養(yǎng)基作好制備記錄并注明標(biāo)簽后，存放于陰涼暗處，最好置于普通冰箱冷藏保存。放置時間不宜超過1周。 二、細(xì)菌的接種技術(shù)及培養(yǎng)物的觀察 （一）固體平板培養(yǎng)基接種法 固體平板培養(yǎng)基主要用于分離混雜的細(xì)菌標(biāo)本，以獲得細(xì)菌純種。該法是通過在瓊脂平板表面分區(qū)畫線，使細(xì)菌分散生長形成單個菌落，有利于分離出目的菌。 （儀器和材料） 1.菌種：大腸埃希菌和金黃色葡萄球菌培養(yǎng)18～24小時肉湯培養(yǎng)物混合菌液。 2.培養(yǎng)基：普通瓊脂平板。 3.其他：接種環(huán)、酒精燈、恒溫培養(yǎng)箱、生物安全柜、記號筆。 （方法） 1.開啟生物安全柜。右手持接種環(huán)在火焰上燒灼滅菌，待冷，取菌種混合菌液一環(huán)。 2.將瓊脂平板倒放于桌面，左手持平板底部（皿蓋留在桌上），使瓊脂面盡量垂直，以減少空氣中雜菌落人，并靠近火焰附近操作。 3.右手握持蘸菌的接種環(huán)涂布于平板表面上端，用接種環(huán)來回畫線，密密涂布（約占整個平板面的1／10），形成1區(qū)。畫線時接種環(huán)與瓊脂表面約呈30°～40°輕輕接觸，用指力輕快地滑移，不可用力太大，以免劃破瓊脂。

圖書封面

評論、評分、閱讀與下載

---

    病原生物學(xué)實驗指導(dǎo) PDF格式下載

---