醫(yī)學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)

內(nèi)容概要

　　本書包括16章，每一章介紹一項(xiàng)技術(shù)，并配有相應(yīng)實(shí)驗(yàn)，使學(xué)生在系統(tǒng)了解有關(guān)技術(shù)的同時(shí)，通過(guò)動(dòng)手實(shí)驗(yàn)而強(qiáng)化對(duì)生化知識(shí)的認(rèn)知?！夺t(yī)學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)》所介紹的技術(shù)包括：大分子制備技術(shù)、分光光度技術(shù)、層析技術(shù)、電泳技術(shù)、離心技術(shù)、分子雜交技術(shù)、PCR技術(shù)、測(cè)序技術(shù)、轉(zhuǎn)基因技術(shù)、基因敲除技術(shù)、蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)、EMSA和ChIP技術(shù)、酵母雙雜交等。同時(shí)還介紹了實(shí)驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展簡(jiǎn)史、技術(shù)創(chuàng)新、實(shí)驗(yàn)室管理等內(nèi)容。本教材的主要對(duì)象為醫(yī)學(xué)院校各專業(yè)的本科生，也可供其他類型院校的學(xué)生參考?！夺t(yī)學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)》既可以自成體系，獨(dú)立成課，也可以與理論教材配套使用；既可以作為實(shí)驗(yàn)教材，也可以作為考研的復(fù)習(xí)材料。

書籍目錄

第1章 如何在分子水平研究生命
  1.1 生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展簡(jiǎn)史
  1.2 生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的完整體系
    1.2.1 對(duì)生物分子進(jìn)行分析鑒定
    1.2.2 對(duì)生物分子進(jìn)行人工合成
    1.2.3 對(duì)生物分子進(jìn)行人工改造
    1.2.4 對(duì)生物分子進(jìn)行功能研究
  1.3 生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的廣泛應(yīng)用
    1.3.1 電泳技術(shù)在臨床檢驗(yàn)中的應(yīng)用
    1.3.2 DNA重組技術(shù)在醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域的擴(kuò)展
    1.3.3 基因診斷和治療技術(shù)在未來(lái)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的前景
    1.3.4 動(dòng)物模型在醫(yī)學(xué)研究申的重要地位
第2章 從組織中分離純化生物高分子——高分子制備技術(shù)
第3章 測(cè)定物質(zhì)的吸收光譜——分光光度技術(shù)
第4章 將混合物中各種組分分開——層析技術(shù)
第5章 分離帶電粒子的有效手段電泳技術(shù)
第6章 利用離心場(chǎng)沉降高分子——離心技術(shù)
第7章 利用堿基互補(bǔ)探查核酸序列——分子雜交技術(shù)
第8章 微量DNA體外擴(kuò)增——PCR技術(shù)
第9章 閱讀遺傳天書的第一步——測(cè)序技術(shù)
第10章 建立轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型——轉(zhuǎn)基因技術(shù)
第11章 去除動(dòng)物體內(nèi)某種基因——基因敲除技術(shù)
第12章 21世紀(jì)的生命科學(xué)技術(shù)——蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)
第13章 蛋白質(zhì)與核酸相互作用分析——EMSA和ChIP技術(shù)
第14章 蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)相互作用分析——酵母雙雜交等技術(shù)
第15章 科學(xué)發(fā)展的不竭源泉——技術(shù)創(chuàng)新
第16章 確保實(shí)驗(yàn)技術(shù)的最佳效果——實(shí)驗(yàn)室管理
參考文獻(xiàn)

章節(jié)摘錄

版權(quán)頁(yè)：插圖：從分子水平研究蛋白質(zhì)間的相互作用關(guān)系是相互作用蛋白質(zhì)組學(xué)研究的核心內(nèi)容，主要包括蛋白質(zhì)的兩兩相互作用，也就是兩個(gè)蛋白質(zhì)分子之間的直接相互作用，這是相互作用蛋白質(zhì)組學(xué)研究中較為簡(jiǎn)單的內(nèi)容；還包括蛋白質(zhì)復(fù)合體中多個(gè)蛋白質(zhì)間的相互作用，即包括蛋白質(zhì)間的直接相互作用，也包括蛋白質(zhì)間間接的相互作用，這是相互作用蛋白質(zhì)組學(xué)研究的較為高級(jí)的內(nèi)容。從規(guī)模上可以將相互作用蛋白篩選方法分為小規(guī)模蛋白質(zhì)相互作用研究和高通量相互作用蛋白的篩選。隨著功能蛋白質(zhì)組學(xué)的快速發(fā)展，目前已經(jīng)開發(fā)出來(lái)的、可以應(yīng)用于相互作用蛋白質(zhì)組學(xué)的研究方法有很多，這些方法在原理上存在一定的相似性，但是其中絕大部分只能適合于小規(guī)模的蛋白質(zhì)相互作用研究，而不能應(yīng)用于蛋白質(zhì)組范圍內(nèi)大規(guī)模研究蛋白質(zhì)間的相互作用關(guān)系。我們需要注意的是，相對(duì)于小規(guī)模篩選技術(shù)而言，盡管大規(guī)模篩選具有高通量的優(yōu)勢(shì)，但是這些方法往往容易產(chǎn)生較多的假陽(yáng)性結(jié)果，因此在進(jìn)行高通量研究時(shí)，最終一定要選擇一些小規(guī)模研究方法進(jìn)一步驗(yàn)證這些候選蛋白之間的相互作用關(guān)系，以排除假陽(yáng)性的干擾，接下來(lái)我們將簡(jiǎn)單介紹一下常見的相互作用蛋白質(zhì)篩選和鑒定技術(shù)。雙雜交技術(shù)（包括“酵母雙雜交技術(shù)”及其衍生技術(shù)“細(xì)菌雙雜交技術(shù)”等）以及“親和純化與質(zhì)譜分析聯(lián)用技術(shù)”是目前較為常用的高通量蛋白質(zhì)相互作用的研究方法。雙雜交技術(shù)主要用于研究蛋白質(zhì)間的兩兩相互作用，其中酵母雙雜交技術(shù)是第一個(gè)適合于全面系統(tǒng)分析蛋白質(zhì)兩兩相互作用的相互作用蛋白質(zhì)組學(xué)研究技術(shù)，該技術(shù)通過(guò)在酵母細(xì)胞內(nèi)檢測(cè)蛋白質(zhì)間相互作用，而實(shí)現(xiàn)了在體外情況下研究蛋白質(zhì)間的相互作用。我們將在后續(xù)章節(jié)主要討論酵母雙雜交技術(shù)的優(yōu)缺點(diǎn)。此外，幾種標(biāo)準(zhǔn)的雙雜交系統(tǒng)的衍生技術(shù)也已經(jīng)用于相互作用蛋白質(zhì)組學(xué)的研究（如反向雙雜交系統(tǒng)、雙誘餌雜交系統(tǒng)和細(xì)菌雙雜交系統(tǒng)等）。親和純化是另外一種常用的可以高通量富集一組相互作用蛋白質(zhì)的研究方法，主要用于研究蛋白復(fù)合體多個(gè)蛋白亞基間相互作用，這種方法利用固定結(jié)合在介質(zhì)上的抗體或受體，通過(guò)類似于免疫共沉淀的原理親和純化某一蛋白質(zhì)組分，在蛋白質(zhì)層析的同時(shí)也可將與其通過(guò)相互作用形成蛋白復(fù)合物的其他組分蛋白一起分離下來(lái)，在得到這些復(fù)合物或混合物后，再利用聚丙烯酰胺二維凝膠電泳等技術(shù)分離各個(gè)組分，利用質(zhì)譜技術(shù)或肽質(zhì)量指紋圖譜技術(shù)，快速地對(duì)復(fù)合物或混合物中所含有的組分進(jìn)行鑒定，進(jìn)而確定可能發(fā)生相互作用的各種蛋白質(zhì)。免疫共沉淀技術(shù)和GST融合蛋白沉降技術(shù)是了解蛋白質(zhì)一蛋白質(zhì)相互作用的一種較為簡(jiǎn)便易行的小規(guī)模篩選和鑒定方法。這兩種方法均屬于利用相互作用蛋白分子間存在的選擇性相對(duì)親和力來(lái)對(duì)蛋白質(zhì)間的相互作用加以證明的生物化學(xué)方法。原理是當(dāng)一些蛋白質(zhì)分子之間存在足夠強(qiáng)大的結(jié)合常數(shù)，并且能夠通過(guò)相互作用形成復(fù)合物進(jìn)而發(fā)揮某種生物學(xué)功能時(shí)，復(fù)合物中的相互作用蛋白質(zhì)均可在其中一個(gè)蛋白質(zhì)組分被其特異性抗體（或底物，如谷胱甘肽）蛋白沉淀下來(lái)的同時(shí)也被沉淀下來(lái)。

編輯推薦

《醫(yī)學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)》為全國(guó)高等醫(yī)藥院校實(shí)驗(yàn)教材之一。

圖書封面

評(píng)論、評(píng)分、閱讀與下載

---

    醫(yī)學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù) PDF格式下載

---