流式細(xì)胞術(shù)

內(nèi)容概要

流式細(xì)胞術(shù)融合了流體動(dòng)力學(xué)、激光技術(shù)、電子工程、計(jì)算機(jī)技術(shù)和單克隆抗體染色技術(shù)等多學(xué)科的知識(shí)，成為一個(gè)專(zhuān)門(mén)的領(lǐng)域。它不僅應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、生物化學(xué)、微生物學(xué)等理論科學(xué)的研究，以及血液學(xué)、免疫學(xué)、病理學(xué)、腫瘤學(xué)、遺傳學(xué)等臨床醫(yī)學(xué)的疾病診斷和治療，而且可以應(yīng)用于農(nóng)林畜牧養(yǎng)殖業(yè)及環(huán)境、食品、藥品等檢測(cè)。    本書(shū)的特點(diǎn)：（1）內(nèi)容先進(jìn)。展示了流式細(xì)胞術(shù)的最新技術(shù)及該領(lǐng)域研究的最新進(jìn)展。（2）操作性強(qiáng)。文中列舉了大量有代表性的實(shí)例、樣本的處理方法、圖譜的分析方法等供讀者參考。（3）適用于教學(xué)。注重基礎(chǔ)理論與實(shí)際問(wèn)題的結(jié)合，圖文并茂，文字簡(jiǎn)練。    本書(shū)可供綜合性大學(xué)和農(nóng)林、醫(yī)學(xué)院校的本科生、研究生使用，也可供有關(guān)科研人員和檢驗(yàn)人員使用。

書(shū)籍目錄

第一章　概述　第一節(jié)　什么是流式細(xì)胞術(shù)？　第二節(jié)　流式細(xì)胞術(shù)能做什么？　第三節(jié)　背景與回顧　第四節(jié)　儀器簡(jiǎn)介　　一、BD公司　　二、Beckman Coulter公司　　三、Cytomation公司第二章　流式細(xì)胞術(shù)原理　第一節(jié)　工作原理　第二節(jié)　液流系統(tǒng)　　一、鞘液　　二、嘖嘴　　三、流式照射室　第三節(jié)　光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)　　一、激光和熒光　　二、激光照射液流　　三、光學(xué)信號(hào)的檢測(cè)　　四、參與信號(hào)處理的光學(xué)元件　　五、光學(xué)信號(hào)檢測(cè)系統(tǒng)　第四節(jié)　電子控制系統(tǒng)　　一、光電檢測(cè)器　　二、通道　　三、閾值　　小結(jié)　　參考文獻(xiàn)第三章　數(shù)據(jù)儲(chǔ)存與分析系統(tǒng)　第一節(jié)　數(shù)據(jù)儲(chǔ)存　第二節(jié)　數(shù)據(jù)分析　　一、常用術(shù)語(yǔ)　　二、流式圖譜的表現(xiàn)形式　　三、熒光補(bǔ)償　第三節(jié)　數(shù)據(jù)分析實(shí)例　　實(shí)例一：雙參數(shù)FSC／SSC分析　　實(shí)例二：三參數(shù)FSC／SSC／FL1分析　　實(shí)例三：四參數(shù)FSC／SSC／FL1／FL2簡(jiǎn)單樣本分析　　實(shí)例四：四參數(shù)FSC／SSC／FL1／FL2復(fù)雜樣本分析  小結(jié)  參考文獻(xiàn)第四章　細(xì)胞分選  第一節(jié)　細(xì)胞分選的原理　　一、液滴形成　　二、延遲時(shí)間　　三、液滴充電與偏轉(zhuǎn)　　四、液滴的收集  第二節(jié)　影響分選的因素　　一、分選速度　　二、分選門(mén)的設(shè)定　　三、分選模式  第三節(jié)　分選的質(zhì)量控制與評(píng)價(jià)　　一、分選的準(zhǔn)確性　　二、分選的效率　　三、無(wú)菌分選　　四、分選對(duì)細(xì)胞活性的影響  第四節(jié)　分選前的準(zhǔn)備　　一、分選用細(xì)胞的制備要求　　二、準(zhǔn)備的材料　　三、分選時(shí)需考慮的幾個(gè)問(wèn)題  第五節(jié)　細(xì)胞分選的應(yīng)用實(shí)例　　實(shí)例一：淋巴細(xì)胞分選　　實(shí)例二：組織特異性干細(xì)胞分選　　實(shí)例三：染料排異性干細(xì)胞分選　　……第五章　細(xì)胞表面標(biāo)志的檢測(cè)第六章　細(xì)胞內(nèi)蛋白的檢測(cè)第七章　細(xì)胞梳成分的檢測(cè)第八章　流式細(xì)胞術(shù)的應(yīng)用概述第九章　流式細(xì)胞術(shù)的樣本制備和染色方法附錄

章節(jié)摘錄

插圖:第一章　概述第一節(jié)　什么是流式細(xì)胞術(shù)？流式細(xì)胞術(shù)研究的對(duì)象是動(dòng)物細(xì)胞、植物細(xì)胞、細(xì)菌、病毒以及其中的遺傳物質(zhì)、各種蛋白或其他分子，還可以研究塑料微球或其他懸浮于液體中的微粒。它是對(duì)處于液流中的細(xì)胞或其他各種微粒進(jìn)行多參數(shù)快速分析和分選的技術(shù)。具體地說(shuō)，流式細(xì)胞術(shù)可以對(duì)細(xì)胞膜上、細(xì)胞質(zhì)中的蛋白、細(xì)胞因子和其他各種特異標(biāo)志，以及細(xì)胞核中的DNA、RNA和蛋白等進(jìn)行分析，上述各種細(xì)胞成分要用帶有熒光素的特異抗體或染料進(jìn)行染色才能檢測(cè)到。儀器在收集大量細(xì)胞的基礎(chǔ)上，可以根據(jù)細(xì)胞熒光強(qiáng)度的差異，從混合細(xì)胞群中鑒別出不同亞群，并對(duì)每一亞群的比例做出精確定量。流式細(xì)胞術(shù)不僅具有分析功能，尤為重要的是，還具有高速分選功能，可以從大量細(xì)胞中挑選出感興趣的目標(biāo)細(xì)胞，因此，這一技術(shù)不僅為科研、臨床及教學(xué)等不同領(lǐng)域的研究工作提供了強(qiáng)有力的工具，而且將為醫(yī)療和農(nóng)牧業(yè)生產(chǎn)等應(yīng)用領(lǐng)域提供極其重要的支持。流式細(xì)胞術(shù)的工作原理是：在一定壓力下，鞘液帶著細(xì)胞或微粒通過(guò)噴嘴中心進(jìn)入到流式照射室，在流式照射室的分析點(diǎn)，激光照射到細(xì)胞發(fā)生散射和折射，發(fā)射出散射光；同時(shí)，細(xì)胞所攜帶的熒光素被激光激發(fā)并發(fā)射出熒光。前向散射光（FSC）和側(cè)向散射光（SSC）檢測(cè)器把散射光轉(zhuǎn)換成電信號(hào)，熒光則被聚光器收集，不同顏色的熒光被雙色反光鏡轉(zhuǎn)向不同的光電倍增管檢測(cè)器，把熒光轉(zhuǎn)換成電信號(hào)。散射光信號(hào)和熒光信號(hào)經(jīng)過(guò)放大后，再經(jīng)過(guò)數(shù)據(jù)化處理輸入電腦并儲(chǔ)存，根據(jù)細(xì)胞的散射光和熒光進(jìn)行分析或分選。

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《流式細(xì)胞術(shù)》可供綜合性大學(xué)和農(nóng)林、醫(yī)學(xué)院校的本科生、研究生使用，也可供有關(guān)科研人員和檢驗(yàn)人員使用。

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