核酸提取與純化實(shí)驗(yàn)指南

前言

　　序言　　２１世紀(jì)是生命科學(xué)的世紀(jì)，這已成為人們的共識。生命科學(xué)隨著人類對自身和自然的認(rèn)識、探索而萌芽，隨著人類生產(chǎn)和科學(xué)實(shí)踐的進(jìn)步而發(fā)展。現(xiàn)代生命科學(xué)包括生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、農(nóng)學(xué)等傳統(tǒng)學(xué)科領(lǐng)域，以及生物學(xué)、生物技術(shù)與環(huán)境科學(xué)乃至社會科學(xué)等其他學(xué)科相互滲透、交叉而產(chǎn)生的新型學(xué)科體系。20世紀(jì)后葉，現(xiàn)代生物科學(xué)尤其是分子生物學(xué)取得了一系列突破性成就，使得生命科學(xué)在自然科學(xué)體系中的位置發(fā)生了革命性的變化，成為21世紀(jì)的帶頭學(xué)科。人們對生命科學(xué)也寄予了無限的期望，希望能夠解決人類社會所面臨的人口膨脹、資源匱乏、疾病危害、環(huán)境污染和生態(tài)破壞等一系列重大問題?；仡櫳茖W(xué)的發(fā)展歷程，實(shí)驗(yàn)技術(shù)一直起著非常重要的促進(jìn)作用。如17世紀(jì)Ｌｅｅｕｗｅｎｈｏｅｋ等人發(fā)明并應(yīng)用顯微鏡技術(shù)，直接催生了“細(xì)胞學(xué)說”的建立和發(fā)展；1973年Ｃｏｈｎ和Ｂｏｙｅｒ完成了ＤＮＡ體外重組實(shí)驗(yàn)，標(biāo)志著基因工程的肇始；1988年ＫａｒｙＭｕｌｌｉｓ發(fā)明的ＰＣＲ技術(shù)甚至使生命科學(xué)產(chǎn)生了飛躍性的發(fā)展?？梢哉f，生命科學(xué)每時每刻離不開實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)是開啟神奇的生命王國大門的鑰匙。沒有實(shí)驗(yàn)技術(shù)的不斷進(jìn)步，也就沒有生命科學(xué)今天的巨大發(fā)展；同時，生命科學(xué)的發(fā)展又對實(shí)驗(yàn)技術(shù)提出了更高的要求，進(jìn)一步刺激了后者的不斷進(jìn)步。生命科學(xué)正是在“實(shí)驗(yàn)催生和驗(yàn)證著基礎(chǔ)理論，理論指導(dǎo)和發(fā)展了實(shí)驗(yàn)技術(shù)”的不斷循環(huán)中從必然王國走向自由王國。工欲善其事，必先利其器。為了有助于生命科學(xué)工作者更多地了解相關(guān)實(shí)驗(yàn)技術(shù)和儀器設(shè)備，更好地設(shè)計實(shí)驗(yàn)方案，更有效地開展實(shí)驗(yàn)過程，更合理地處理實(shí)驗(yàn)結(jié)果，化學(xué)工業(yè)出版社組織出版了《生物實(shí)驗(yàn)室系列》圖書。系列圖書在整體規(guī)劃的基礎(chǔ)上，本著“經(jīng)典、前沿、實(shí)用，理論與技術(shù)并重”的原則組織編寫，分批出版。在題材上，系列圖書涵蓋綜合實(shí)驗(yàn)技術(shù)和單項實(shí)驗(yàn)技術(shù)兩個方面。其中綜合實(shí)驗(yàn)技術(shù)既有以實(shí)驗(yàn)?zāi)康臑轭}，如“蛋白質(zhì)化學(xué)分析技術(shù)”，內(nèi)容縱向覆蓋多項實(shí)驗(yàn)技術(shù)；也有以某一生命學(xué)科領(lǐng)域的綜合實(shí)驗(yàn)技術(shù)為題，如“發(fā)酵工程實(shí)驗(yàn)技術(shù)”、“生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)”等。而單項實(shí)驗(yàn)技術(shù)則以深入介紹某一專項技術(shù)及其應(yīng)用為主，在闡述其基本原理的基礎(chǔ)上，橫向介紹該項技術(shù)在多個領(lǐng)域的應(yīng)用，如“雙向電泳技術(shù)”、“流式細(xì)胞術(shù)”等。在內(nèi)容上，系列圖書主要有以下兩個顯著特點(diǎn)。一是強(qiáng)調(diào)先進(jìn)性——除了系統(tǒng)介紹常用和經(jīng)典實(shí)驗(yàn)技術(shù)以外，特別突出了當(dāng)前該領(lǐng)域?qū)嶒?yàn)手段的新理論、新技術(shù)、新發(fā)展，為國內(nèi)專業(yè)人員起到借鑒和引導(dǎo)作用。二是強(qiáng)調(diào)可操作性——對于每一項實(shí)驗(yàn)技術(shù)，系統(tǒng)介紹其原理方法、設(shè)備儀器和實(shí)驗(yàn)過程，讓讀者明了實(shí)驗(yàn)的目的、方案設(shè)計以及具體步驟和結(jié)果處理，以期起到實(shí)驗(yàn)指南的作用。本系列圖書堅持質(zhì)量為先，開拓國內(nèi)和國際兩個出版資源。一方面，邀請國內(nèi)相關(guān)領(lǐng)域兼具理論造詣和豐富實(shí)驗(yàn)室工作經(jīng)驗(yàn)的專家學(xué)者編著；另一方面，時刻關(guān)注國際生命科學(xué)前沿領(lǐng)域和先進(jìn)技術(shù)的進(jìn)展，及時引進(jìn)（翻譯或影?。﹪庵霭嫔绲臋?quán)威力作?！渡飳?shí)驗(yàn)室系列》圖書的讀者對象設(shè)定為國內(nèi)從事生命科學(xué)及生物技術(shù)和相關(guān)領(lǐng)域（如醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、農(nóng)學(xué)）的專業(yè)研究人員，企業(yè)或公司的生產(chǎn)、研發(fā)、管理技術(shù)人員，以及高校相關(guān)專業(yè)的教師、研究生等。我們殷切希望《生物實(shí)驗(yàn)室系列》圖書的出版能夠服務(wù)于我國生命科學(xué)的發(fā)展需要，同時熱忱歡迎從事和關(guān)心生命科學(xué)的廣大科技人員不僅對已出版圖書提供寶貴意見和建議，也能對系列圖書的后續(xù)題目設(shè)計貢獻(xiàn)良策或推薦作者，以便我們能夠集思廣益，將這一系列圖書沿著可持續(xù)發(fā)展的方向不斷豐富品種，推陳出新。謹(jǐn)向所有關(guān)心和熱愛生命科學(xué)，為生命科學(xué)的發(fā)展孜孜以求的科學(xué)工作者致以崇高的敬意！祝愿我國的科技事業(yè)如生命之樹根深葉茂，欣欣向榮！化學(xué)工業(yè)出版社生物·醫(yī)藥出版分社

內(nèi)容概要

　　核酸是遺傳信息的攜帶者，是基因表達(dá)的物質(zhì)基礎(chǔ)，是分子生物學(xué)研究的主要對象。無論是進(jìn)行核酸的結(jié)構(gòu)還是功能研究，首先都需要對核酸進(jìn)行提取和純化。本書根據(jù)近幾年核酸提取與純化技術(shù)的發(fā)展現(xiàn)狀組織編寫，內(nèi)容涵蓋動物、植物、細(xì)菌、病毒和其他核酸提取與純化技術(shù)。全書內(nèi)容新、技術(shù)全、操作性強(qiáng)，具有較好的可讀性、實(shí)用性。本書可供遺傳學(xué)、分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)等專業(yè)的研究生、高年級本科生以及相關(guān)研究人員閱讀參考。

書籍目錄

"第一章概述
第一節(jié)核酸提取與純化的歷史
第二節(jié)核酸提取與純化的現(xiàn)狀
一、當(dāng)前核酸提取與純化的應(yīng)用領(lǐng)域
二、當(dāng)前核酸提取與純化的常見方法
三、核酸提取與純化存在的問題和解決方法
參考文獻(xiàn)
第二章動物核酸的提取與純化
第一節(jié)概述
第二節(jié)動物基因組DNA的提取與純化
一、動物組織材料的預(yù)處理
二、DNA提取的預(yù)處理
三、DNA提取的方法
四、DNA的純化方法
五、DNA的檢測和鑒定
第三節(jié)動物RNA的提取與純化
一、動物總RNA的提取與純化
二、動物mRNA的提取與純化
三、動物microRNA的提取與純化
參考文獻(xiàn)
第三章植物核酸的提取與純化
第一節(jié)概述
一、應(yīng)用于重要農(nóng)藝性狀功能基因的分離
二、應(yīng)用于農(nóng)業(yè)基因組學(xué)
三、應(yīng)用于植物轉(zhuǎn)基因技術(shù)及其改良品種
四、應(yīng)用于植物染色體工程技術(shù)
五、應(yīng)用于植物次生代謝產(chǎn)物的生產(chǎn)
六、應(yīng)用于植物DNA分子標(biāo)記輔助育種
七、應(yīng)用于轉(zhuǎn)基因食品的檢測
第二節(jié)植物基因組DNA的提取與純化
一、植物組織材料的預(yù)處理
二、植物基因組DNA的提取
三、植物基因組DNA的純化
四、植物基因組DNA的檢測
第三節(jié)植物RNA的提取與純化
一、植物總RNA的提取與純化
二、植物mRNA的提取與純化
三、植物microRNA的提取與純化
四、植物RNA的檢測
參考文獻(xiàn)
第四章細(xì)菌核酸的提取與純化
第一節(jié)概述
第二節(jié)細(xì)菌基因組DNA的提取與純化
一、細(xì)菌基因組DNA小量制備
二、氯化銫法大規(guī)模制備細(xì)菌基因組DNA
三、細(xì)菌基因組DNA提取試劑盒(溶液法)
四、提取基因組DNA注意事項
五、基因組DNA鑒定
六、DNA的純化
第三節(jié)細(xì)菌RNA的提取與純化
一、從革蘭氏陰性細(xì)菌中分離高質(zhì)量的RNA
二、從革蘭氏陽性細(xì)菌分離RNA
三、從革蘭氏陰性細(xì)菌中快速分離RNA
四、細(xì)菌RNA提取試劑盒
參考文獻(xiàn)
第五章病毒核酸的提取與純化
第一節(jié)概述
一、病毒的大小和形態(tài)
二、病毒的結(jié)構(gòu)及化學(xué)組成
三、病毒的分類
四、病毒的復(fù)制過程
五、病毒純度的標(biāo)準(zhǔn)
六、病毒提純的一般原則
七、病毒核酸的應(yīng)用領(lǐng)域和提取方法指導(dǎo)
第二節(jié)病毒DNA的提取與純化
一、病毒DNA單鏈及雙鏈特點(diǎn)
二、具體的實(shí)驗(yàn)方法
三、檢測和鑒定
第三節(jié)病毒RNA的提取與純化
一、病毒RNA的提取
二、具體的實(shí)驗(yàn)方法
三、檢測和鑒定(電泳鑒定)
參考文獻(xiàn)
第六章其他核酸的提取與純化
第一節(jié)線粒體DNA與葉綠體DNA的提取與純化
一、線粒體DNA的提取與純化
二、葉綠體DNA的提取與純化
第二節(jié)質(zhì)粒DNA的提取與純化
一、質(zhì)粒DNA的小量提取與純化
二、質(zhì)粒DNA的大量提取與純化
第三節(jié)DNA片段的提取與純化
一、酶切片段的提取和純化
二、小片段DNA的提取和純化：PCR產(chǎn)物等的提取純化
三、cDNA的提取和純化
四、帶特殊標(biāo)記的DNA的提取和純化
第四節(jié)其他RNA的提取與純化
一、核糖體RNA的提取與純化
二、RNA探針的提取和純化
參考文獻(xiàn)

圖書封面

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